褪黑素联合吉西他滨治疗胰腺癌：增效减毒新策略

《Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology》：Melatonin augments anti-tumor activity and alleviates nephrotoxicity of gemcitabine in a pancreatic cancer xenograft model targeting P62/Keap1 pathway

为解决吉西他滨治疗胰腺癌时的耐药和肾毒性问题，研究人员探究褪黑素的作用，发现其可增效减毒，意义重大。

　　在癌症治疗的漫长征程中，胰腺癌一直是一座难以攻克的 “堡垒”。它恶性程度极高，多数患者确诊时已处于晚期，手术往往无能为力，化疗成为重要的治疗手段。其中，吉西他滨（Gemcitabine，Gem）作为胰腺癌化疗的常用药物，虽能在一定程度上缓解症状、延长患者生命，但却面临着两大棘手难题：化疗耐药性和肾毒性。肿瘤细胞对吉西他滨产生耐药，使得药物疗效大打折扣；而肾毒性不仅影响患者生活质量，还可能限制化疗的持续进行，严重阻碍了胰腺癌的有效治疗，这让无数患者和医生陷入困境。

为了打破这一僵局，来自埃及多个大学的研究人员决心深入探索，寻找新的治疗策略。他们将目光聚焦在褪黑素（Melatonin，Mel）上，试图探究其是否能增强吉西他滨的抗癌效果，同时减轻其肾毒性，相关研究成果发表在《Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology》杂志上。

研究人员开展此项研究时，运用了多种关键技术方法。首先建立了大鼠胰腺癌异种移植模型，为后续研究提供了可靠的实验对象。通过组织病理学分析，对胰腺和肾脏组织的病理变化进行直观观察；采用氧化应激评估，检测丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和还原型谷胱甘肽（GSH）等指标，来衡量组织的氧化应激水平；利用酶联免疫吸附测定（ELISA）分析，测定胰腺组织中转化生长因子 β - 1（TGF-β₁）、肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、白细胞介素 - 1β（IL-1β）和白细胞介素 - 10（IL-10）等蛋白的水平；借助 Western blot 分析，检测胰腺组织中 p62 和 Kelch 样 ECH 相关蛋白 - 1（Keap1）的蛋白表达水平，从分子层面揭示其作用机制。

研究结果

1. 褪黑素的分子相互作用：通过分子对接技术研究发现，褪黑素与 p62 在精氨酸结合位点具有一定的结合亲和力，结合能为 - 4 kcal/mol，并且形成了 3 个氢键，还存在疏水相互作用，这为后续研究褪黑素通过 p62 发挥作用提供了结构基础。
2. 增强抗肿瘤活性：对胰腺组织进行苏木精 - 伊红（H&E）染色后观察发现，吉西他滨治疗组有一定改善，而褪黑素与吉西他滨联合治疗组效果更为显著，炎症反应主要局限于胰腺周围组织，胰岛和腺泡基本恢复正常，表明褪黑素增强了吉西他滨的抗肿瘤活性。
3. 调节 p62/Keap1 信号通路：研究结果显示，胰腺癌模型组 p62 和 Keap1 蛋白水平显著升高。而褪黑素、吉西他滨单独治疗以及二者联合治疗均能降低 p62 和 Keap1 的蛋白水平，且联合治疗效果更优，说明褪黑素和吉西他滨联合可调节 p62/Keap1 信号通路。
4. 减轻胰腺纤维化：检测纤维化关键标志物 TGF-β₁的蛋白表达发现，胰腺癌模型组 TGF-β₁水平明显上升，吉西他滨和褪黑素单独治疗均可降低其水平，联合治疗降低幅度更大，表明褪黑素联合吉西他滨可有效减轻胰腺纤维化。
5. 增强抗氧化活性：在氧化应激指标检测中，胰腺癌模型组 MDA 水平升高，SOD、CAT 和 GSH 水平降低。吉西他滨治疗使 MDA 水平进一步升高，而褪黑素和联合治疗可降低 MDA 水平，同时提高 SOD、CAT 和 GSH 水平，说明褪黑素增强了吉西他滨的抗氧化活性。
6. 增强抗炎活性：ELISA 检测结果表明，胰腺癌模型组 IL-1β 和 TNF-α 水平升高，IL-10 水平降低。吉西他滨、褪黑素单独治疗以及联合治疗均能降低 IL-1β 和 TNF-α 水平，升高 IL-10 水平，联合治疗效果更明显，表明褪黑素增强了吉西他滨的抗炎活性。
7. 减轻肾毒性：对肾脏组织进行 H&E 染色观察发现，吉西他滨治疗组肾脏出现明显病理变化，如血管充血、炎症细胞浸润等，而褪黑素联合吉西他滨治疗组肾脏病理改变明显减轻，仅见少数血管扩张，说明褪黑素减轻了吉西他滨诱导的肾毒性。

研究结论与意义

本研究表明，褪黑素通过调节 Keap1/p62 通路，不仅显著增强了吉西他滨的抗肿瘤活性，还减轻了其肾毒性。在胰腺癌治疗中，褪黑素展现出了作为辅助治疗药物的潜力，为胰腺癌患者带来了新的希望。它可以在不降低化疗疗效的同时，减少患者因肾毒性而遭受的痛苦，提高患者的生活质量。不过，目前仍有一些问题有待进一步探索，例如褪黑素与自噬调节因子之间精确的分子相互作用，以及 p62 介导的自噬在胰腺癌中的具体作用机制等。未来对这些方面的深入研究，将有助于更全面地了解褪黑素在胰腺癌治疗中的作用，为临床实践提供更坚实的理论基础和更有效的治疗方案。