3,3′?二吲哚甲烷（DIM）：非小细胞肺癌治疗的新希望

研究人员针对非小细胞肺癌（NSCLC）治疗难题，研究 3,3′?二吲哚甲烷（DIM），发现其可诱导癌细胞铁死亡，为 NSCLC 治疗提供依据。

　　肺癌，这个 “癌症杀手”，多年来一直稳居全球癌症相关死亡原因的榜首。每年都有大量患者被诊断出患有肺癌，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比高达 85%。尽管近年来靶向治疗和免疫治疗等新型疗法给 NSCLC 患者带来了一丝希望，但由于肿瘤的异质性和耐药性问题，这些疗法的应用受到了极大限制。因此，寻找新的治疗靶点和方法迫在眉睫。

在这样的背景下，锦州医科大学附属第一医院等机构的研究人员开展了一项关于 3,3′?二吲哚甲烷（DIM）治疗 NSCLC 的研究。该研究成果发表在《Discover Oncology》上，为 NSCLC 的治疗带来了新的曙光。

研究人员采用了多种关键技术方法。细胞实验方面，利用细胞活力检测（CCK-8 assay）、细胞凋亡和周期检测、细胞迁移和侵袭实验（伤口愈合实验、Transwell 实验）等技术，研究 DIM 对 NSCLC 细胞的作用；分子生物学实验方面，运用分子对接模拟技术，探究 DIM 与芳烃受体（AHR）的结合能力，还通过蛋白质免疫印迹（Western blotting）、免疫荧光（Immunofluorescence）技术检测相关蛋白表达；动物实验方面，建立裸鼠皮下荷瘤模型，结合组织学检查（苏木精 - 伊红染色、普鲁士蓝染色）和免疫组化分析，验证 DIM 在体内的抗肿瘤效果。

下面来看具体的研究结果：

1. DIM 显著抑制 NSCLC 细胞增殖并诱导凋亡：CCK-8 实验表明，DIM 对 NSCLC 细胞的抑制作用呈浓度和时间依赖性。经不同浓度 DIM 处理后，A549 和 H1299 细胞的活力明显下降，且凋亡细胞比例显著增加。细胞周期检测发现，DIM 可使 A549 细胞阻滞于 G₁期，H1299 细胞阻滞于 G₂期。
2. DIM 抑制 NSCLC 细胞的迁移和侵袭：伤口愈合实验和 Transwell 实验结果显示，DIM 处理后的细胞迁移和侵袭能力显著降低。同时，蛋白免疫印迹检测发现，DIM 能增加上皮标记蛋白 E-cadherin 的表达，降低间质标记蛋白 vimentin 和 MMP9 的表达，表明 DIM 可抑制上皮间质转化（EMT），进而抑制癌细胞的迁移和侵袭。
3. DIM 诱导 NSCLC 细胞发生铁死亡：通过多种检测方法发现，DIM 处理后，细胞内 Fe²⁺、活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）水平升高，而谷胱甘肽（GSH）水平降低。线粒体膜电位受损，线粒体体积减小、嵴减少、膜密度增加。铁死亡抑制剂 Fer-1、ROS 清除剂 NAC 以及 AHR 拮抗剂 CH-223191 可逆转这些变化，证明 DIM 通过调节 AHR 表达诱导 NSCLC 细胞发生铁死亡。
4. DIM 通过调节 AHR/NRF2/GPX4 轴诱导 NSCLC 细胞铁死亡：分子对接结果显示，DIM 与 AHR 具有良好的结合能力。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验表明，DIM 可降低 AHR、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）的表达，且这些变化可被 CH-223191、Fer-1 和 NAC 逆转。过表达 NRF2 可部分逆转 DIM 诱导的铁死亡，进一步证实 DIM 通过 AHR/NRF2/GPX4 轴诱导铁死亡。
5. 体内实验验证 DIM 抑制 NSCLC 肿瘤生长：在裸鼠皮下荷瘤模型实验中，DIM 处理组的肿瘤体积明显小于对照组，且对小鼠体重无显著影响。组织学检查表明，DIM 对肝、肾组织无损伤。普鲁士蓝染色显示，DIM 处理组肿瘤组织中的铁颗粒聚集增加，免疫组化结果显示，DIM 可抑制 Ki-67、AHR、NRF2 和 GPX4 蛋白的表达，表明 DIM 在体内通过诱导铁死亡抑制肿瘤生长。

研究结论和讨论部分指出，该研究首次从多个角度分析了 DIM 在 NSCLC 治疗中的意义。DIM 可通过调节 AHR/NRF2/GPX4 轴诱导 NSCLC 细胞发生铁死亡，显著抑制 NSCLC 细胞系在体内外的恶性行为，为 DIM 在 NSCLC 临床治疗中的开发和应用提供了理论依据。不过，DIM 在 NSCLC 中的作用机制较为复杂，涉及多个信号通路，后续研究可进一步深入探索，以推动 NSCLC 治疗的发展。