circ_0029941 在急性缺血性卒中中的关键作用及机制揭秘

研究人员构建模型探究 circ_0029941 在 AIS 中的作用，发现其经特定轴影响病情，意义重大。

　　环状 RNA（circRNA）的异常表达与多种人类疾病的发展相关，其中就包括急性缺血性卒中（AIS）。然而，circ_0029941 在 AIS 进展中的作用和机制尚不清楚。研究人员构建了短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO）模型来模拟 AIS 小鼠模型，并使用氧糖剥夺 / 复氧（OGD/R）诱导的星形胶质细胞来模拟 AIS 细胞模型。通过定量实时聚合酶链反应（PCR）测定 circ_0029941、真核翻译起始因子 4A-III（EIF4A3）、微小核糖核酸（miR）-224-5p 和活化 T 细胞核因子 5（NFAT5）的表达。利用氯化三苯基四氮唑染色评估小鼠的梗死面积，并通过免疫染色确定胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白 1 轻链 3B（MAP1LC3B）和 NFAT5 的水平。采用蛋白质免疫印迹分析检测蛋白质表达情况，利用荧光原位杂交（FISH）进行共定位分析。通过 RNA 免疫沉淀（RIP）和 RNA 下拉实验验证 circ_0029941 与 miR-224-5p 之间的相互作用，通过 RIP 和双荧光素酶报告基因实验确认 miR-224-5p 与 NFAT5 之间的相互作用。结果显示，circ_0029941 在 AIS 患者、tMCAO 模型小鼠和 OGD/R 诱导的星形胶质细胞中表达升高。敲低 circ_0029941 可减轻 tMCAO 小鼠的脑梗死情况。此外，敲低 circ_0029941 还抑制了星形胶质细胞的活化以及自噬相关蛋白 5（ATG5）介导的细胞自噬。进一步研究发现，EIF4A3 可促进 circ_0029941 的表达水平，circ_0029941 通过吸附 miR-224-5p 来调节 NFAT5 的表达。而且，miR-224-5p 抑制剂或 NFAT5 过表达能够逆转敲低 circ_0029941 对星形胶质细胞活化和细胞自噬的抑制作用。同时，抗 miR-224-5p（antagomiR-224-5p）也消除了敲低 circ_0029941 对 tMCAO 小鼠脑梗死的缓解作用。综上，EIF4A3 诱导的 circ_0029941 通过调节 miR-224-5p/NFAT5 轴促进了星形胶质细胞的活化和细胞自噬。