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为探究台中芽孢杆菌(Paenibacillus taichungensis)特性,研究人员测序其基因组,发现生物防治潜力,意义重大。
《解开台中芽孢杆菌完整基因组序列:挖掘其基因组特征与生物防治潜力》
在神奇的微生物世界里,芽孢杆菌属的成员们一直是科学家们关注的焦点。自 1993 年被命名以来,芽孢杆菌属不断有新物种被发现,如今已超过 150 种。它们如同隐藏在自然界的 “多面手”,在工业和农业领域发挥着重要作用,比如促进植物生长、生物防治病虫害以及参与物质的生物降解等。
台中芽孢杆菌作为其中一员,同样蕴含着巨大的应用潜力。它最早在中国台湾台中地区的土壤样本中被分离鉴定出来,随后又在拟南芥的内生细菌中现身,并且被发现能够显著促进植物生长。此外,从福建紫金铜金矿中分离出的台中芽孢杆菌 NC1 菌株,还展现出了强大的抗砷能力。这意味着在农业上,它或许能帮助植物在砷污染的土壤中茁壮成长;在工业领域,它也可能助力治理环境污染。然而,令人遗憾的是,此前台中芽孢杆菌的研究数据相对匮乏,完整基因组层面的研究更是少之又少,NCBI 数据库中仅有 9 条重叠群 / 支架水平的数据,这极大地限制了人们对它的深入了解和应用。
与此同时,由青枯雷尔氏菌复合种(Ralstonia solanacearum species complex,RSSC)引发的植物青枯病,正给农业生产带来毁灭性的打击,造成了巨大的经济损失。传统的化学防治手段不仅效果不佳,还可能对环境造成污染。因此,生物防治成为了农业领域的研究热点,科学家们渴望找到能够有效对抗青枯病的微生物 “小能手”。
在这样的背景下,广东省农业科学院植物保护研究所的研究人员挺身而出,开展了一项极具意义的研究。他们从广东梅州松树的根际土壤中分离出了一株台中芽孢杆菌 BB507,惊喜地发现这株细菌对 RSSC 具有强大的抗菌活性。随后,研究人员对 BB507 进行了全基因组测序和分析,试图揭开它的神秘面纱,挖掘其生物防治的潜在机制。该研究成果发表在《BMC Genomic Data》上。
为了深入探究 BB507 的奥秘,研究人员运用了多种关键技术方法。他们采用了 Illumina NovaSeq(二代测序技术)和 Oxford Nanopore(三代测序技术)平台对菌株进行全基因组测序。通过这两种技术的结合,能够更准确、更全面地获取基因组信息。在基因预测和注释方面,使用了 GeneMarkS v4.17、tRNAscan-SE v1.3.1、rRNAmmer v1.2 等软件工具,以确定基因组中的基因、转运 RNA(tRNA)和核糖体 RNA(rRNA)等元件。此外,还利用了 antiSMASH v7.0 预测次生代谢物基因簇,通过多种生物信息学工具进行分类学分析,明确 BB507 在物种中的地位。
下面来看看具体的研究结果:
- 基因组特征:BB507 的基因组总长度为 7.33 Mb,GC 含量为 45.84%,由一条 6.97 Mb 的环状染色体和一条 0.35 Mb 的环状质粒组成。研究人员共鉴定出 6,649 个基因,平均基因长度为 950 bp,同时还发现了 103 个 tRNA、2 个 sRNA 和 36 个 rRNA。此外,预测出 3 个候选 CRISPR(成簇规律间隔短回文重复序列,是细菌的一种获得性免疫系统)、6 个基因组岛(基因组中一段具有特殊功能的区域,可能与细菌的适应性进化有关)和 14 个原噬菌体(整合在细菌基因组中的噬菌体基因组)。
- 功能注释:通过功能注释发现,4,296 个基因被归类到 47 个基因本体(Gene Ontology,GO)类别中,6,016 个基因富集在 106 条京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路中,4,483 个基因被划分到 23 个直系同源基因簇(Clusters of Orthologous Groups,COG)类别中。同时,还鉴定出 244 个推定的毒力因子、498 个病原体 - 宿主相互作用基因、604 个转运蛋白、484 个碳水化合物活性酶和 2 个抗生素抗性蛋白。
- 分类学分析:利用直系同源平均核苷酸同一性工具(Orthologous Average Nucleotide Identity Tool,OAT)和类型基因组服务器(Type Genome Server,TYGS)进行分析,结果显示 BB507 与其他台中芽孢杆菌菌株聚类在一起,属于台中芽孢杆菌。不过,研究中也发现部分菌株的 ANI 指数和数字 DNA - DNA 杂交(dDDH)值存在差异,这表明台中芽孢杆菌的分类地位可能还需要进一步研究和完善。
- 次生代谢物基因簇预测:使用 antiSMASH v7.0 预测发现,BB507 基因组中存在 10 个潜在的次生代谢物基因簇,其中 9 个位于染色体上,1 个位于质粒上。7 个基因簇与已知的生物合成基因簇具有相似性,分别涉及 Paeninodin、Staphyloferrin B、Corynecin、Bacillopaline、Carotenoid、Bacillibactin 和 Aurantinin 的合成,相似度在 10% - 100% 之间。另外,还有 3 个功能未知的基因簇,这意味着可能存在尚未被发现的新型次生代谢物。
在研究结论和讨论部分,研究人员成功获得了台中芽孢杆菌 BB507 的完整基因组序列,并对其基因组特征、功能注释、分类学地位以及次生代谢物基因簇进行了全面分析。这些发现为进一步研究台中芽孢杆菌在工农业生物技术领域的应用提供了重要的数据基础。然而,研究也存在一些局限性。例如,预测的次生代谢物基因簇的功能还需要进一步通过实验验证,目前的分类学分析也受到样本量和相似菌株的限制。尽管如此,这项研究仍然为后续深入探索台中芽孢杆菌的奥秘、开发其生物防治潜力以及优化分类体系指明了方向,具有重要的科学意义和应用价值。相信在未来,随着研究的不断深入,台中芽孢杆菌将在更多领域展现出它的独特魅力,为人类的生产生活带来更多的惊喜和帮助。