RNA 结合蛋白 KSRP：哮喘治疗潜在新靶点

为探究 KSRP 对 Th2相关免疫反应的影响，研究人员以小鼠为模型，发现 KSRP 可减轻哮喘症状，为哮喘治疗提供新方向。

　　

哮喘研究新突破：RNA 结合蛋白 KSRP 的关键作用

在人体的免疫系统中，细胞因子就像一群忙碌的 “小信使”，它们在免疫细胞之间传递信息，调节着免疫细胞的功能。当病原体入侵时，这些 “小信使” 会迅速做出反应，启动免疫应答，帮助身体抵御外敌。但如果 “小信使” 失控，过度表达，就会引发一系列问题，比如组织损伤、自身免疫反应等。在众多调控细胞因子表达的机制中，mRNA 稳定性的调节是一个重要环节，而 RNA 结合蛋白（RBP）在其中扮演着关键角色。

过敏性哮喘是一种常见的慢性炎症性疾病，它严重影响着全球数亿人的生活质量。在哮喘患者体内，气道变得异常敏感，免疫细胞大量浸润，尤其是嗜酸性粒细胞和 T 细胞。辅助性 T 细胞 2（Th₂）亚群产生的白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-9 和 IL-13 等细胞因子，在哮喘的发病过程中起着关键作用，它们会促使 B 细胞产生 IgE 抗体，激活和招募肥大细胞、嗜酸性粒细胞，引发气道高反应性（AHR）等症状。

此前研究发现，RNA 结合蛋白 KSRP（KH 型剪接调节蛋白）能够调节一些促炎介质的表达，可它在适应性免疫细胞中的作用却知之甚少。在体外实验中，KSRP 虽能减少 Th₂相关细胞因子的产生，但这一结果能否在体内得到验证，仍是个未知数。因此，为了深入了解 KSRP 在体内对 Th₂相关免疫反应的影响，来自德国美因茨约翰内斯?古滕贝格大学医学中心的研究人员开展了一项重要研究，相关成果发表在《Inflammation Research》上。

研究人员主要采用了动物模型、细胞实验和分子生物学技术等方法。在动物实验方面，他们选用了 8 - 12 周龄的雌性 C57BL/6 小鼠，构建了卵清蛋白（OVA）诱导的过敏性哮喘小鼠模型，将 KSRP 基因敲除小鼠（KSRP^-/-）与野生型（WT）小鼠进行对比研究。在细胞实验中，分离培养了小鼠的脾细胞和 CD₄⁺ T 细胞，对其进行刺激和抑制处理。在分子生物学技术上，运用了细胞因子检测（CBA）、mRNA 稳定性分析、蛋白质印迹（Western blot）、定量逆转录聚合酶链反应（qRT - PCR）等技术来检测相关指标。

研究结果主要体现在以下几个方面：

1. KSRP 基因敲除加重哮喘症状：通过对小鼠进行 OVA 诱导的哮喘实验，研究人员发现，与 WT 小鼠相比，KSRP^-/-小鼠的 AHR 更为严重，肺组织损伤更明显，黏液产生细胞（杯状细胞）增生加剧，OVA 特异性抗体生成增加。在检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞因子时，发现 KSRP^-/-小鼠的 IL-4、IL-5 和 IL-13 水平显著升高。这表明 KSRP 的缺失会加剧 Th₂细胞介导的免疫反应，进而加重哮喘症状。
2. 中和 IL-4 可减轻气道炎症：为了进一步验证 KSRP 对 Th₂相关细胞因子的调节作用，研究人员在哮喘激发阶段给小鼠注射抗 IL-4 抗体来中和 IL-4。结果发现，抗体处理后，KSRP^-/-小鼠的气道阻力明显降低，肺组织中 IL-4 和 IL-13 的表达水平下降，肺炎症和损伤程度减轻。这说明 KSRP 对这些细胞因子的调节是导致 KSRP^-/-小鼠气道炎症加重的主要原因，也暗示了 KSRP 在抑制 Th₂细胞介导的免疫反应中具有重要作用。
3. KSRP 调节 Th₂细胞因子的机制并非通过 mRNA 稳定性：KSRP 的一个重要功能是调节含 ARE（富 AU 元件）的 mRNA 稳定性。研究人员对多克隆刺激的 CD₄⁺ T 细胞中 IL-4 mRNA 的稳定性进行检测，结果发现，虽然 KSRP^-/- T 细胞中 IL-4 mRNA 表达较高，但在添加 RNA 聚合酶 II 抑制剂后，并未检测到 KSRP^-/-和 WT 小鼠之间 IL-4 mRNA 半衰期的显著差异，IL-5 和 IL-13 mRNA 的降解情况也类似。这表明调节 mRNA 稳定性并非 KSRP 介导 Th₂相关细胞因子表达的主要机制。
4. KSRP 通过 STAT6 和 NFAT 信号通路调节 Th₂细胞因子表达：研究人员深入探究了 KSRP 调节 Th₂细胞因子表达的信号通路。他们发现，KSRP^-/-细胞中 STAT6 的磷酸化水平升高，这意味着 STAT6 信号通路被激活。使用 STAT6 抑制剂后，IL-4 和 IL-13 的表达受到抑制。此外，NFAT 信号通路也参与了 KSRP 对哮喘进展的调节。抑制 NFAT 活性后，KSRP^-/-和 WT 小鼠中 IL-4 和 IL-13 的表达差异几乎消失。这表明 KSRP 主要通过调节 STAT6 和 NFAT 信号通路来影响 Th₂相关细胞因子的表达。

综合上述研究，RNA 结合蛋白 KSRP 在调节适应性免疫反应中发挥着重要作用，KSRP 基因敲除会加剧 Th₂介导的过敏性气道疾病症状。KSRP 对 Th₂细胞因子的调节主要通过转录过程，而非 mRNA 稳定性。KSRP 很可能通过 NFAT 介导的机制减少 IL-4 表达，进而影响 STAT6 活性和 IL-13 产生。同时，KSRP 对 IL-5 表达的调节机制与 IL-4 和 IL-13 有所不同。这些研究结果揭示了 KSRP 在哮喘发病机制中的重要作用，为哮喘治疗提供了一个潜在的新靶点，有望为开发更有效的哮喘治疗方法带来新的思路和方向。未来，研究人员还需进一步深入探究 KSRP 的作用机制，以及其与其他信号通路的相互关系，为攻克哮喘这一难题提供更多有力的证据。