基于聚乙烯亚胺功能化氧化铁纳米颗粒从唾液样本中提取 DNA:法医学调查的新突破

《Egyptian Journal of Forensic Sciences》:Polyethyleneimine-functionalized iron oxide nanoparticle-based method for isolation of Deoxyribonucleic Acid (DNA) from saliva samples in forensic investigations

【字体: 时间:2025年03月17日 来源:Egyptian Journal of Forensic Sciences 1.3

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  在法医学调查中,从唾液样本高效提取高质量 DNA 存在挑战,因商业试剂盒昂贵,样本含抑制剂等。研究人员开展用聚乙烯亚胺功能化氧化铁纳米颗粒(PEI-IONP)从唾液样本提取 DNA 的研究。结果显示该方法高效、安全,有应用潜力,为法医学提供新途径。

  在法医学的世界里,DNA 分析就像一把神奇的钥匙,能够解开无数谜题,帮助警方锁定犯罪嫌疑人、确定亲子关系,还能在灾难后辨认遇难者身份。而唾液,作为一种容易获取的生物样本,本应是 DNA 的 “富矿”,但实际提取过程却困难重重。商业 DNA 提取试剂盒成本高昂,对于一些资源有限的实验室来说,是不小的负担。同时,唾液中含有的抑制剂、黏蛋白等物质,就像一个个 “小恶魔”,阻碍着高质量 DNA 的提取,让后续的聚合酶链式反应(PCR)等分析难以顺利进行 。
为了解决这些难题,来自 Sharda University、Pennsylvania State University Hershey Medical Center 和 All India Institute of Medical Sciences 的研究人员,将目光投向了纳米技术领域。他们开展了一项利用聚乙烯亚胺功能化氧化铁纳米颗粒(PEI-IONP)从唾液样本中提取 DNA 的研究,成果发表在《Egyptian Journal of Forensic Sciences》上。这项研究意义重大,若成功,将为法医学提供一种高效、安全且环保的 DNA 提取新方法,有望改写传统的样本处理方式。

研究人员为开展此项研究,主要运用了以下关键技术方法:首先,通过共沉淀法合成并对 PEI-IONP 进行功能化和表征;然后,收集 20 名健康个体的唾液样本;最后,利用优化后的基于 PEI-IONP 的方法提取 DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和紫外 - 可见分光光度法对提取的 DNA 进行定性和定量评估。

下面来看具体的研究结果:

  • DNA 提取效率:使用 PEI-IONP 方法从 200μL 唾液样本中提取 DNA,平均产量达到 5.8μg,平均浓度为 29.0ng/μL ,这表明该方法在提取唾液 DNA 方面具有较高的效率。
  • DNA 纯度评估:通过计算 OD260/OD280的比值来评估 DNA 纯度,平均值为 1.82。这个数值落在纯净 DNA 公认的 1.8 - 2.0 范围内,说明提取的 DNA 纯度较高,受到蛋白质和 RNA 的污染较少。
  • DNA 完整性验证:利用琼脂糖凝胶电泳对 DNA 进行分析,结果显示出对应高分子量 DNA 的清晰尖锐条带,这进一步证实了提取的 DNA 具有良好的完整性。

综合研究结果,研究人员得出结论:PEI-IONP 是一种可靠、安全且高效的从唾液样本中提取 DNA 的方法。它不仅能获得较高的 DNA 产量和纯度,还能保证 DNA 的完整性,为法医学相关应用提供了潜在的有力工具。同时,该方法减少了有害化学物质的使用,更加环保。

然而,研究也存在一些局限性。比如,研究中使用的紫外 - 可见分光光度法无法区分人类 DNA 和细菌 DNA,而唾液中细菌 DNA 的存在可能影响测量结果。此外,提取的 DNA 在下游基于 PCR 的应用(如短串联重复序列(STR)分析和线粒体 DNA 分型)中的兼容性尚未评估,也未与传统 DNA 提取技术进行回收效率的比较。

尽管如此,这项研究依然为法医学领域的 DNA 提取技术开辟了新方向。未来研究可针对这些局限性深入探索,进一步优化该方法,使其在实际法医学案件处理中发挥更大的作用,帮助司法系统更加准确、高效地伸张正义。

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