华支睾吸虫感染可改善小鼠溃疡性结肠炎：肠道菌群与次级胆汁酸的关键作用

为探究华支睾吸虫（Clonorchis sinensis）对溃疡性结肠炎（UC）的作用，研究发现其感染可改善 DSS 诱导的小鼠 UC，依赖肠道菌群相关次级胆汁酸（SBAs）。

　　在当今社会，肠道健康问题日益受到关注，其中溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）作为一种慢性、非特异性炎症性疾病，严重影响着人们的生活质量。UC 在全球范围内广泛流行，西方国家的发病率超过 0.3%，而在像中国这样的新兴工业化国家，其患病率也在急剧上升。目前，针对 UC 的多种治疗方法存在诸多挑战，比如长期用药可能带来副作用，停药后疾病容易复发，治疗成本高昂等。而且，UC 的发病机制至今仍未完全明确，这使得寻找更有效的治疗方法迫在眉睫。

在这样的背景下，徐州医科大学等机构的研究人员开展了一项关于华支睾吸虫（Clonorchis sinensis，简称 C. sinensis）感染与 UC 关系的研究，相关成果发表在《Inflammation》杂志上。这项研究意义重大，它为揭示 UC 的潜在治疗靶点和新的治疗策略提供了重要依据。

研究人员在开展此项研究时，用到了多种关键技术方法。首先是动物实验模型的建立，选用 BALB/c 小鼠构建华支睾吸虫感染模型以及葡聚糖硫酸钠（Dextran Sodium Sulfate，DSS）诱导的结肠炎模型。然后，运用 16S rDNA 高通量测序技术分析小鼠肠道菌群的多样性和结构变化；采用液相色谱 - 质谱联用（Liquid Chromatography Mass Spectrometry，LC/MS）技术检测结肠中的胆汁酸；通过 ELISA、Western blot、免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）染色、定量实时荧光 PCR（Quantitative Real-Time Fluorescence PCR，qRT-PCR）等实验方法，对相关细胞因子、蛋白表达水平进行检测分析。

研究结果如下：

• 华支睾吸虫感染可改善 DSS 诱导的结肠炎严重程度：研究人员给感染华支睾吸虫的小鼠饮用含 4% DSS 的水 7 天，结果发现，与未感染且饮用 DSS 水的小鼠相比，感染华支睾吸虫的小鼠体重下降、结肠缩短情况得到改善，疾病活动指数（DAI）和组织病理学评分降低，促炎细胞因子白细胞介素 - 6（IL-6）和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）水平显著下降，而白细胞介素 - 10（IL-10）水平无明显变化，这表明华支睾吸虫感染可保护小鼠免受 DSS 诱导的实验性结肠炎，且这种改善作用与 IL-10 无关。
• 华支睾吸虫感染保护肠道屏障完整性：在评估肠道屏障完整性时发现，PAS - Alcian Blue 染色显示，感染华支睾吸虫的小鼠在 DSS 诱导的结肠炎中，黏液分泌显著高于未感染小鼠；Mucin 2（Muc2，黏液层的关键成分，对肠道屏障起保护作用）的免疫组化染色结果表明，感染华支睾吸虫可增加 Muc2 的表达；同时，感染华支睾吸虫还能降低基质金属蛋白酶 2（Matrix Metalloproteinase 2，MMP2，一种可破坏肠道屏障的酶）的表达，提高紧密连接蛋白 Occludin 和 zonula occludens - 1（ZO1）的水平，这些都证明华支睾吸虫感染能促进实验性结肠炎中肠道屏障的完整性。
• 华支睾吸虫感染调节肠道菌群失调：通过细菌 16S rDNA 高通量测序分析发现，华支睾吸虫感染可改善 DSS 诱导的肠道菌群 α/β 多样性，重新平衡被破坏的微生物结构。在 DSS 处理的小鼠中，微生物 α 多样性显著降低，而感染华支睾吸虫的 DSS 小鼠微生物 α 多样性明显升高；β 多样性分析显示，华支睾吸虫感染可防止 DSS 诱导的微生物结构破坏，使微生物结构从拟杆菌门（Bacteroidota）向厚壁菌门（Bacillota）转变得到逆转。
• 华支睾吸虫感染诱导高水平 SBAs 并增加 TGR5 表达：研究人员利用 LC - MS 筛选胆汁酸，发现华支睾吸虫感染可使小鼠结肠中某些次级胆汁酸（Secondary Bile Acids，SBAs）如石胆酸（Lithocholic Acid，LCA）和熊去氧胆酸（Ursodeoxycholic Acid，UDCA）水平显著升高，而这些胆汁酸在未感染的结肠炎小鼠中是降低的。同时，作为重要胆汁酸受体的武田 G 蛋白偶联受体 5（Takeda G protein - coupled receptor 5，TGR5）在感染华支睾吸虫的结肠炎小鼠中的表达也显著增加，这表明 SBAs（LCA/UDCA）及其胆汁酸受体 TGR5 可能参与了华支睾吸虫感染对 DSS 诱导的结肠炎的改善作用。
• 肠道菌群衍生的 LCA 和 UDCA 与华支睾吸虫抑制结肠炎相关：通过对有或没有共饲养的结肠炎小鼠结肠中的 SBAs 进行检测发现，与未共饲养的未感染小鼠相比，与感染小鼠共饲养的未感染小鼠中 LCA 和 UDCA 水平显著增加，且 TGR5 的表达也增强，这表明共饲养导致的细菌转移可诱导高水平的胆汁酸，有助于华支睾吸虫抑制 DSS 诱导的结肠炎。
• 肠道菌群对华支睾吸虫保护结肠炎至关重要：采用共饲养实验和抗生素清除肠道菌群实验发现，与感染华支睾吸虫的小鼠共饲养的未感染小鼠，结肠炎症状得到改善，促炎细胞因子 TNF-α 和 IL-6 水平降低；而用抗生素清除肠道菌群后，华支睾吸虫对结肠炎的保护作用减弱，补充 LCA 后，结肠炎症状又得到明显改善，这说明华支睾吸虫对结肠炎的保护作用依赖于肠道菌群介导的 SBAs，尤其是 LCA。

研究结论和讨论部分指出，本研究揭示了华支睾吸虫感染通过调节肠道菌群及其代谢产物 SBAs，减轻小鼠实验性结肠炎的机制。肠道菌群和其代谢产物 SBAs 在华支睾吸虫感染保护结肠炎的过程中起着关键作用，这为揭示寄生虫感染保护炎症性疾病的新机制提供了证据。然而，虽然本研究表明活虫感染可保护结肠炎，但由于华支睾吸虫感染也会导致严重的胆道损伤，因此不能直接将其用于治疗 UC 患者。未来还需要进一步研究，以明确这些微生物衍生的胆汁酸在寄生虫感染背景下保护结肠炎的确切机制，为开发更安全有效的 UC 治疗方法奠定基础。