黄芩素通过 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路抑制巨噬细胞 M1 极化，减少高脂血症性急性胰腺炎中腺泡细胞焦亡

为探究黄芩素（BAI）影响高脂血症性急性胰腺炎（HAP）中胰腺腺泡细胞（PACs）焦亡的机制，研究发现 BAI 可抑制巨噬细胞 M1 极化，减少 PACs 焦亡，为 HAP 治疗提供新靶点。

　　在人体这个复杂的 “小宇宙” 里，胰腺就像一个勤劳的 “小工匠”，默默分泌各种消化酶，帮助身体消化食物。然而，有一种疾病却总是来捣乱，它就是急性胰腺炎（AP）。AP 发生时，胰腺会产生炎症，那些原本帮助消化的蛋白酶就像失控的 “小恶魔”，在胰腺组织里胡作非为，导致胰腺组织自我消化，胰腺腺泡细胞（PACs）也会因此受损甚至死亡。而高脂血症性急性胰腺炎（HAP）作为 AP 的主要类型之一，约占所有 AP 病例的 10%。HAP 患者常常会出现早期持续性多器官衰竭和晚期感染性坏死，预后较差，死亡率也很高。所以，深入了解 HAP 的分子调控机制，找到有效的治疗靶点，就成了医学领域亟待解决的难题。

为了攻克这个难题，湖南师范大学第一附属医院（湖南省人民医院）的研究人员展开了一项重要研究。他们把目光聚焦在一种名为黄芩素（BAI）的物质上。BAI 是从中药黄芩的根部提取出来的天然黄酮类化合物，它就像一个 “多面手”，具有抗氧化、抗炎和神经保护等多种生物学作用，之前也有研究发现它能减少 AP 大鼠胰腺组织中的炎症因子。但 BAI 影响 HAP 中 PACs 焦亡的具体分子机制，却一直是个未解之谜。

这项研究成果发表在《Inflammation》杂志上。研究人员通过一系列实验，得出了令人惊喜的结论：BAI 可以通过 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路抑制巨噬细胞 M1 极化，进而减少 HAP 中 PACs 的焦亡。这一发现为 HAP 的临床治疗提供了全新的潜在靶点，意义重大。

研究人员在研究过程中使用了多种关键技术方法。首先，他们构建了 HAP 大鼠模型和进行细胞培养，模拟疾病发生的体内外环境。然后，运用分子对接技术，分析 BAI 与 HMGB1 蛋白的结合情况，就像是给它们的 “相遇” 过程拍了张 “特写”；利用药物亲和反应靶点稳定性（DARTS）测定，进一步验证两者的结合；通过免疫共沉淀（Co-IP）技术，明确蛋白之间的相互作用；还采用细胞共培养技术，研究不同细胞之间的相互影响。

下面来看具体的研究结果：

• BAI 减少 HAP 大鼠胰腺组织中 M1 巨噬细胞数量：研究人员诱导建立 HAP 大鼠模型后，进行苏木精 - 伊红（H&E）染色、免疫组织化学（IHC）分析和流式细胞术检测。结果显示，BAI 治疗改善了 HAP 大鼠的胰腺组织病变，降低了诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，减少了 M1 巨噬细胞的数量。这表明 BAI 对 HAP 大鼠胰腺组织的炎症反应有抑制作用。
• BAI 抑制 HAP 大鼠的焦亡：通过免疫荧光（IF）分析、蛋白质免疫印迹（Western Blotting）和酶联免疫吸附测定（ELISA）等实验发现，BAI 处理降低了 HAP 大鼠胰腺组织中 CD68、HMGB1、NLRP3 的表达，抑制了 ASC、cleaved caspase - 1 和 GSDMD - N 的水平，同时降低了血清中 IL - 1β 和 IL - 18 的水平，说明 BAI 能够有效抑制 HAP 大鼠体内的焦亡过程。
• BAI 调节 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路：研究人员发现，HAP 大鼠体内 HMGB1、TLR4 和 NLRP3 的水平升高，而 BAI 处理可降低它们的表达。分子对接和 DARTS 测定表明 BAI 与 HMGB1 稳定结合，Co - IP 验证了 HMGB1 与 TLR4、NLRP3 之间以及 TLR4 与 NLRP3 之间的相互作用，说明 BAI 通过与 HMGB1 结合，使 TLR4/NLRP3 通路失活。
• BAI 通过 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路抑制巨噬细胞焦亡和 M1 极化：在细胞水平实验中，研究人员用不同处理因素作用于巨噬细胞，结果显示 BAI 在一定浓度下对正常巨噬细胞活力无影响，还能增加棕榈酸（PA）诱导的巨噬细胞活性。BAI 和 HMGB1 抑制剂 EP 能抑制 PA 诱导的巨噬细胞中 HMGB1、TLR4 和 NLRP3 的表达，提高细胞活力，抑制焦亡、活性氧（ROS）释放和 M1 极化。这进一步证明了 BAI 通过 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路发挥作用。
• 巨噬细胞极化促进胰腺炎中 PACs 的焦亡：通过细胞共培养实验，研究人员发现 PA 诱导的巨噬细胞会抑制 PACs 的活性，促进其焦亡，增加 ROS 释放和 IL - 1β、IL - 18 的水平，表明巨噬细胞极化与 PACs 焦亡之间存在密切联系。
• BAI 通过 HMGB1/TLR4/NLRP3 通路介导 M1 巨噬细胞极化，抑制 PACs 的焦亡：同样是细胞共培养实验，研究结果显示 BAI 和 EP 能增加 PA 诱导的巨噬细胞中 PACs 的活性，抑制焦亡、ROS 释放和 IL - 1β、IL - 18 的表达，而 HMGB1 过表达则会产生相反的效果，这再次证实了 BAI 通过该通路抑制 PACs 焦亡的机制。

研究结论和讨论部分指出，BAI 能够减少 HAP 大鼠胰腺病变程度，降低相关蛋白和炎症因子的表达。分子对接和 DARTS 结果表明 BAI 与 HMGB1 蛋白结合，Co - IP 验证了相关蛋白间的相互作用。体外实验也进一步证明了 BAI 和 EP 的作用，且 HMGB1 过表达会部分逆转 BAI 的效果。这一系列研究结果为 HAP 的治疗提供了新的方向和理论依据，不过 BAI 目前还处于临床前研究阶段，未来还需要进一步探索其在 HAP 治疗中的其他分子机制和应用潜力。