优化噬菌体 Phi6 从手部的回收：包膜病毒研究的关键进展

为优化包膜病毒替代物噬菌体 Phi6 从手部的回收，研究人员经多因素探究，发现特定条件下回收效率最高，助力手卫生研究。

　　在全球范围内，包膜病毒如严重急性呼吸综合征冠状病毒 2（SARS-CoV-2）和人类流感病毒，严重威胁着公众健康。它们不仅能通过气溶胶或大的呼吸道飞沫传播，还可能借助受污染的表面，经手部接触间接传播。像甲型流感（H1N1）病毒，在不同温度下可在玻璃表面存活数天甚至数十天，SARS-CoV-2 也能在塑料和不锈钢等多种表面存活数小时至数天 。由此可见，研究如何有效从手部回收包膜病毒，对评估手卫生措施的效果至关重要。

然而，目前从手部回收包膜病毒替代物噬菌体 Phi6（Φ6）的方法并不完善。美国材料与试验协会（ASTM）推荐的从整个手部回收病毒的标准方法，主要针对非包膜病毒，可能无法准确反映包膜病毒的回收情况。而且现有研究存在局限性，比如仅关注部分回收方法和洗脱液，未充分考虑接种方式等因素对回收效率的影响。

为了解决这些问题，美国阿肯色大学系统农业分校食品安全中心的研究人员开展了一项研究。他们致力于优化噬菌体 Phi6 从手部的回收方法，相关成果发表在《Food and Environmental Virology》上。

研究人员采用了多种关键技术方法。首先是宿主培养和病毒繁殖技术，利用丁香假单胞菌致病变种菜豆致病变种（Pph）在溶原琼脂 / 肉汤（LC）中培养 Φ6，并通过双层琼脂覆盖试验（DAL）制备病毒原液。在手部准备环节，研究人员要求志愿者用非抗菌肥皂洗手，再用乙醇消毒，以确保手部初始状态一致。对于病毒接种，研究人员根据 ASTM E2011-21 标准进行了改良，将含有 Φ6 的悬浮液接种到志愿者手上。在病毒回收阶段，分别使用手套汁液法（GJM）、手部冲洗法和改良平板法，并选用了三种洗脱液，即溶原肉汤（LC）、胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）和 1.5% 牛肉浸膏（BE）。最后，通过 DAL 测定回收病毒的浓度，并利用 R 统计软件对数据进行分析。

研究结果如下：

• 洗脱液类型对回收效率的影响：在湿基回收条件下，虽然不同洗脱液之间的回收效率没有统计学差异，但 LC 的总体回收效率最高，其次是 TSB 和 BE。若不考虑 GJM 方法的影响，LC、TSB 和 BE 的回收效率分别为 72.8±9.82%、68.0±16.3% 和 66.5±13.7%。
• 回收方法类型对回收效率的影响：由于干基回收和 GJM 方法几乎无法回收 Φ6，研究人员针对湿基回收的平板法和冲洗法进行分析。结果显示，两种方法的回收效率没有统计学差异，但平板法的回收效率略高，分别为 69.3±15.9% 和 68.9±10.9%。
• 回收基础对回收效率的影响：湿基回收和干基回收的效率差异显著，湿基回收的总体效率为 46.0±35.0%，而干基回收仅为 0.15±1.13%。这表明干燥对 Φ6 的存活有显著的抑制作用。
• 接种方式对回收效率的影响：将接种物应用于手掌表面的回收效率明显高于整个手部。在湿基回收且接种于手掌表面时，平板法和冲洗法的回收效率分别达到 80.3±9.53% 和 74.2±9.76%，而整个手部接种时，这两种方法的回收效率分别为 58.4±13.3% 和 63.6±9.57%。

研究结论和讨论部分指出，多种因素会显著影响包膜病毒从人类手部的回收效率。为了有效回收包膜病毒，应将接种物应用于手掌表面，并在其仍湿润时使用 LC 作为洗脱液进行回收。让接种物干燥后再回收，会对 Φ6 的存活产生不利影响，而摩擦可能进一步加剧病毒的失活。此外，研究过程中也面临一些挑战，如泡沫颗粒的形成可能会捕获病毒颗粒，降低回收效率，以及在采样后难以完全回收手套中的洗脱液。

这项研究具有重要意义，它为包膜病毒的研究提供了更优化的回收方法，有助于准确评估手卫生措施对包膜病毒的防控效果，从而为预防和控制包膜病毒的传播提供有力支持，对保障公众健康具有重要的现实意义。