瑞士日内瓦分离出广泛耐药流感嗜血杆菌：意义重大的首次发现

研究人员针对流感嗜血杆菌耐药问题，开展 XDR 菌株研究，首次在瑞士日内瓦分离出该菌株，意义重大。

　　# 瑞士日内瓦分离出广泛耐药流感嗜血杆菌：重要的首次发现与研究解读
在医学微生物学的领域中，流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）一直是人们关注的重要病原体。它能引发多种疾病，从常见的呼吸道感染，到较为严重的脑膜炎等，给人们的健康带来了不小的威胁。近年来，随着抗生素的广泛使用，耐药问题日益凸显，流感嗜血杆菌也未能幸免。多药耐药（MDR）乃至广泛耐药（XDR）菌株不断出现，使得原本有效的抗生素治疗逐渐失去效果，这无疑给临床治疗带来了巨大挑战。在这样的背景下，探究流感嗜血杆菌的耐药机制、监测耐药菌株的出现，对于制定合理的治疗策略、控制感染的传播至关重要。

为了解决这些棘手的问题，来自瑞士日内瓦大学医院（Geneva University Hospitals）和日内瓦大学医学院（Faculty of Medicine, Geneva）的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases》上，首次报道了在瑞士日内瓦分离出的一株广泛耐药流感嗜血杆菌，这一发现具有重大意义。

研究人员开展此项研究时，运用了多种关键技术方法。首先，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）对菌株进行鉴定，准确识别出该流感嗜血杆菌。药敏试验方面，依据 EUCAST 指南，通过纸片扩散法确定抗菌药物敏感性，同时使用 Etest? 条测定最低抑菌浓度（MICs），以精确评估菌株对各类抗生素的耐药程度。此外，全基因组测序技术也发挥了关键作用，研究人员利用 Illumina NovaSeq 6000 进行高通量测序，对菌株基因组进行深入分析，探究其耐药基因及突变情况。

研究结果如下：

• 菌株来源与基本特征：该 XDR 流感嗜血杆菌菌株分离自一位 63 岁男性患者的高质量痰液样本，采集样本时患者未被诊断出患有呼吸道感染。经鉴定，该菌株为不可分型，且对泛 β- 内酰胺类药物耐药。
• 药敏试验结果：纸片扩散法显示，该菌株除对利福平（rifampicin）和氯霉素（chloramphenicol）敏感外，对所有测试的 β- 内酰胺类抗生素、氟喹诺酮类（fluoroquinolones）、四环素类（cycline drugs）和复方新诺明（co-trimoxazole）均耐药，因此被归类为 XDR 菌株。进一步测定 MICs 发现，不同 β- 内酰胺类药物的 MICs 值各异，且该菌株经检测为 β- 内酰胺酶阳性的阿莫西林 - 克拉维酸耐药菌株（BLPACR），其携带bla_TEM-1基因123。
• 全基因组测序分析：全基因组测序表明，该菌株属于序列型 159（sequence type 159）和 ST-107 克隆复合体。在青霉素结合蛋白 3（PBP3）的转肽酶结构域中，发现了多个氨基酸取代，这些取代使其被归类为 III + 组。同时，在 GyrA、ParC、ParE 和 GyrB 等基因中也鉴定出多个关键突变，部分突变与氟喹诺酮类高水平耐药相关。此外，基因组分析还发现了携带 msr (D) 和 mef (A) 基因的转座子 Tn6009 - 7，但未检测到与阿奇霉素高度耐药相关的 23S rRNA V 区 Ala2058Gly 突变，且该菌株无质粒456。
• 系统发育分析：研究人员将该 XDR 日内瓦菌株与其他耐药菌株及参考菌株构建系统发育树和成对单核苷酸多态性（SNP）表，结果显示该菌株与其他耐药表型的菌株差异较大7。

研究结论与讨论部分指出，近年来多个国家的流感嗜血杆菌抗生素敏感性模式发生了显著变化，耐药性呈上升趋势，对第三代头孢菌素（3GC）的耐药已不再罕见。本研究中发现的 ftsI 基因突变模式，在很大程度上解释了该菌株对 β- 内酰胺类药物的耐药性。这一首次在瑞士日内瓦分离出 XDR 流感嗜血杆菌的报告，为深入了解流感嗜血杆菌的耐药机制提供了重要依据。确定这些耐药决定因素的分布，有助于开发合适的分子诊断工具，同时也为制定有效策略以遏制流感嗜血杆菌高水平耐药的发展和传播提供了方向，对临床治疗和公共卫生防控具有重要的指导意义。