重大发现!TaSnRK1α - TaCAT2 模型介导小麦抗冠腐病的分子机制解析

《Nature Communications》:

【字体: 时间:2025年03月16日 来源:Nature Communications

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  为解决小麦冠腐病(FCR)严重威胁产量和品质且抗性基因稀缺的问题,河南农业大学研究人员开展了小麦 FCR 抗性基因的研究。通过多方法鉴定出 TaCAT2 基因,揭示 TaSnRK1α - TaCAT2 模型介导 FCR 抗性机制,为培育抗性品种提供基因资源。

  在广袤的麦田里,一种名为冠腐病(Fusarium crown rot,FCR)的病害正悄然肆虐。FCR 主要由病原菌 F. pseudograminearum(F.pg)引发,它像隐藏在土壤中的 “杀手”,能在土壤或残茬中长期存活,伺机侵害小麦。一旦发病,不仅会导致小麦产量大幅下降,还会使植物茎或籽粒中积累各种毒素,如脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、雪腐镰刀菌烯醇(nivalenol,NIV)等,严重危害人畜健康。目前,还未发现免疫或高抗的小麦种质资源,大多数现代小麦品种对 FCR 易感或高度易感。因此,挖掘小麦 FCR 抗性基因,培育抗性品种迫在眉睫。
为了攻克这一难题,河南农业大学的研究人员勇挑重担,开展了深入研究。他们通过全基因组关联研究(genome - wide association study,GWAS)、全外显子测序(whole - exome sequencing,WES)和转录组分析等多种技术,鉴定出一个关键的 FCR 抗性基因 TaCAT2。研究发现,TaCAT2 能通过清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)来增强小麦对 FCR 的抗性。同时,研究人员还筛选出与 TaCAT2 相互作用的蔗糖非发酵 - 1 相关蛋白激酶 α 亚基(TaSnRK1α),证实 TaSnRK1α 能磷酸化 TaCAT2,进而提高 TaCAT2 的蛋白积累,增强其清除 ROS 的能力,最终提升小麦对 FCR 的抗性。这一研究成果发表在《Nature Communications》上,为小麦抗 FCR 育种提供了新的基因资源和理论依据,具有重要的科学意义和应用价值。

在研究过程中,研究人员运用了多种关键技术方法。他们选取 243 份小麦种质资源作为关联群体,用于 FCR 抗性调查和 GWAS 分析。通过 GWAS 初步定位与 FCR 抗性相关的遗传位点,接着利用 WES 对极端表型子代池和亲本进行基因分型,筛选候选基因。之后,采用病毒诱导的基因沉默(virus - induced gene silencing,VIGS)、过表达实验等技术,验证基因功能;运用酵母双杂交(Y2H)、体外 pull - down 等实验,探究蛋白间的相互作用和调控机制。

下面详细介绍研究结果:

  1. TaCAT2 基因的鉴定:研究人员利用小麦 660K SNP 芯片对 243 份中国小麦种质资源进行 GWAS 分析,发现染色体 6A 上一个重要遗传位点与 FCR 抗性相关。通过构建两个嵌套重组自交系群体,进行 WES 和 BSR - Seq(bulked segregation RNA sequencing)分析,最终确定 TaCAT2 为候选基因。
  2. TaCAT2 基因与 FCR 抗性的关联:克隆 TaCAT2 基因发现,抗性和易感亲本间存在多态性变异。开发共显性标记后发现,携带 TaCAT2 - R(无 215 - bp 插入)的小麦品系 FCR 抗性显著高于携带 TaCAT2 - S(含 215 - bp 插入)的品系。对 243 份中国小麦品种测序分析表明,TaCAT2 - R 品系的 FCR 抗性更强,且其酶活性更高。
  3. TaCAT2 基因功能验证:VIGS 实验显示,沉默 TaCAT2 基因的小麦植株 FCR 抗性显著降低,含量升高;EMS 突变体和过表达实验进一步证实,TaCAT2 能正向调控小麦 FCR 抗性,且过表达 TaCAT2 不会对小麦农艺性状产生负面影响。
  4. TaCAT2 与 TaSnRK1α 的相互作用及调控机制:酵母双杂交、split luciferase 互补实验和体外 pull - down 实验表明,TaCAT2 与 TaSnRK1α 在体内外均能相互作用,且 TaSnRK1α 能磷酸化 TaCAT2,Ser214 是关键磷酸化位点。TaSnRK1α 能提高 TaCAT2 的蛋白水平,增强其清除 ROS 的能力,进而提升小麦 FCR 抗性。
  5. TaSnRK1α 对小麦 FCR 抗性的调控作用:EMS 突变体和过表达实验证明,TaSnRK1α 能正向调控小麦 FCR 抗性,可能通过磷酸化增强 TaCAT2 蛋白稳定性,降低 ROS 积累。

研究结论和讨论部分表明,该研究鉴定出重要的小麦 FCR 抗性基因 TaCAT2,并提出 TaSnRK1α - TaCAT2 模型,揭示了其介导 FCR 抗性的分子机制。这不仅为理解小麦 FCR 抗性基因的调控机制提供了新视角,还为通过聚合育种提高小麦 FCR 抗性提供了宝贵的基因资源。未来,研究人员可基于此进一步深入探究,挖掘更多抗性基因,培育出更具抗性的小麦品种,为保障全球粮食安全贡献力量。

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