揭秘布鲁氏菌重组蛋白：为人类布鲁氏菌病疫苗研发开辟新路径

为解决现有布鲁氏菌（Brucella）活疫苗问题，研究人员开展重组蛋白研究，获有免疫原性蛋白，助力新疫苗开发。

　　布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患病。在俄罗斯联邦，基于减毒菌株流产布鲁氏菌（B. abortus）19BA 的活疫苗被用于预防人类布鲁氏菌病。然而，该疫苗明显的反应原性以及免疫后可能引发感染过程，使得研发安全的亚单位疫苗成为一项紧迫任务。为此，研究人员制备了 47 种重组布鲁氏菌蛋白，并在小鼠细胞培养物上评估其疫苗潜力。

本研究旨在评估重组布鲁氏菌蛋白在接种布鲁氏菌疫苗菌株的 BALB/c 小鼠的细胞培养物和血清中的免疫原性。研究人员利用反向疫苗学方法，鉴定出布鲁氏菌病候选蛋白，并开发了其生产和纯化技术。在大肠杆菌系统中获得了 47 种单一和融合的重组蛋白，其浓度和纯度达到最佳，可进一步用于免疫测定。

为了评估重组蛋白的免疫原性，研究人员用流产布鲁氏菌 19BA 疫苗菌株免疫 BALB/c 小鼠，并在感染第 30 天收集动物的血清和脾脏。这些蛋白在体外实验中作为刺激淋巴细胞的特异性诱导剂，同时作为抗原用于测定免疫小鼠和未免疫小鼠的血清抗体滴度。通过酶免疫测定法分析淋巴细胞细胞上清液中干扰素 -γ（IFN-γ）和白细胞介素 - 4（IL-4）细胞因子的水平，以及血清特异性抗体滴度，进而评估 47 种重组布鲁氏菌蛋白诱导体液免疫和细胞免疫反应的能力。

结果发现，有 41 种蛋白可激活 IFN-γ 的合成，8 种蛋白能诱导产生 IgG 抗体。研究人员成功获得并鉴定出能够在免疫活性细胞中诱导明显免疫反应的布鲁氏菌蛋白。这些蛋白可被视为可能的候选成分，用于开发针对人类布鲁氏菌病的载体疫苗、DNA 疫苗和亚单位疫苗。