编辑推荐:
为解决现有核酸提取难题,韩国研究人员开发 ASAB - SPE 系统,高效提取核酸,极具应用潜力。
核酸提取在分子生物学研究中至关重要,它是医学、微生物学和免疫学等领域进步的基础,能为下游诊断、基因和治疗研究提供准确依据。目前常用的基于二氧化硅的固相萃取(SPE)方法存在诸多问题,如离液序列高的离子会抑制后续分析,有限的表面积导致核酸回收率不理想,而且传统提取过程繁琐,需要专业人员操作。
为了克服这些挑战,研究人员将目光投向了具有大表面积的材料。膨润土是一种黏土矿物,其表面带电、亲水且表面积大,但孔径分布不均匀。硫酸活化处理能有效扩大膨润土的表面积、增加孔径和孔体积,提高其吸附能力和表面改性效率。
在此基础上,研究人员利用 3 - 氨基丙基(二乙氧基)甲基硅烷(APDMS)对硫酸活化膨润土(SAB)进行胺功能化改性,得到 APDMS 改性的 SAB(ASAB)。他们还采用了一种基于非离液序列高的裂解和 pH 依赖的可逆交联策略,利用同双功能亚胺酯(HI)试剂与游离核酸的胺基结合,实现核酸与 ASAB 的可逆交联。
该 ASAB - SPE 系统操作简便,仅需手动移液器、离心机和加热块等基础设备。它能在 30 分钟内从多种样本(如临床体液和培养基)中高效提取 DNA、RNA 和微小 RNA(miRNA)。对于大体积样本(高达 50mL)中的低浓度带负电病原体(低至 20CFU / 反应),通过 30 分钟的预富集步骤就能有效富集。与商业 SPE 试剂盒相比,在人类尿液和血浆样本中,DNA 回收率提高了 3.95 倍;在从临床鼻咽拭子中分离不稳定的病毒 RNA 方面,效率提高了 6.3 倍,同时还能有效分离关键的 miRNA 生物标志物。
这项研究成果展示了 ASAB - SPE 系统在核酸提取方面的高效性和多功能性,有望彻底改变传统的 SPE 方法,成为分子生物学研究通用的核酸提取平台。
下载安捷伦电子书《通过细胞代谢揭示新的药物靶点》探索如何通过代谢分析促进您的药物发现研究
10x Genomics新品Visium HD 开启单细胞分辨率的全转录组空间分析!
欢迎下载Twist《不断变化的CRISPR筛选格局》电子书
单细胞测序入门大讲堂 - 深入了解从第一个单细胞实验设计到数据质控与可视化解析
下载《细胞内蛋白质互作分析方法电子书》