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为改善脑出血治疗现状，研究人员探究外源性线粒体（ExMito）与脂肪间充质干细胞过表达细胞型朊蛋白（Ove?PrPC）联合疗法，发现其效果优于单一疗法。
# 脑出血治疗新曙光：外源性线粒体联合细胞型朊蛋白过表达疗法
在全球范围内，脑卒中已然成为导致死亡和永久性神经后遗症的重要原因之一。其中，出血性脑卒中（HS）虽仅占脑卒中病例的不到 30%，却有着极高的死亡率和永久性神经损伤风险。而脑出血（ICH）作为 HS 的一种常见类型，其治疗手段在过去几十年间几乎没有显著进展。目前标准的治疗方案，无论是手术干预还是强化药物治疗，都难以有效降低患者的死亡率和致残率，这不仅严重影响了患者的生活质量，还极大地限制了他们的社会活动和就业能力。因此，寻找一种安全有效的 ICH 新疗法迫在眉睫。
来自高雄长庚纪念医院等机构的研究人员，为了攻克这一难题，开展了一项极具意义的研究。他们致力于探究外源性线粒体（ExMito）和脂肪间充质干细胞过表达细胞型朊蛋白（Ove?PrPC）联合治疗是否比单一疗法更能有效保护脑出血大鼠的大脑。该研究成果发表在《Journal of Molecular Histology》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，利用免疫荧光显微镜（IF microscopy）观察线粒体的转移情况以及细胞内相关蛋白的表达；通过 MTT 细胞活力测定法评估细胞活力；运用 Western blot 分析检测细胞内各种蛋白的表达水平。在动物实验方面，建立大鼠脑出血模型，通过脑磁共振成像（MRI）测量脑梗死面积和脑出血体积；使用角落测试（corner test）评估大鼠的神经功能。
研究结果如下：
- 外源性线粒体在受体细胞中的作用：通过实时定量 PCR 和 Seahorse XF24 细胞外通量分析发现，ExMito能够被受体 N2a 细胞摄取，尤其是在缺氧条件下，且能显著提高细胞的氧消耗率（OCR），增强线粒体呼吸功能。免疫荧光显微镜观察证实，ExMito可以被转移到 N2a 细胞中，并且 ADMSCs 来源的线粒体能够通过隧道纳米管（TNT）转移到 ρ0 细胞（线粒体 DNA 缺失细胞）中。此外，ExMito处理还能显著促进 N2a 细胞的增殖。
- Ove?PrPC在 ADMSCs 中的作用：实验表明，Ove?PrPC在 ADMSCs 中能够显著抵抗H2?O2?诱导的细胞衰老、DNA 和线粒体损伤。同时，它还能上调细胞周期蛋白和细胞增殖相关蛋白的表达，增强细胞活力。具体表现为，在H2?O2?处理的细胞中，Ove?PrPC能够显著降低细胞衰老指标 β - 半乳糖苷酶和 DNA 损伤指标 γ - H2AX 的表达，提高线粒体完整性指标线粒体细胞色素 C 的表达。Western blot 分析也显示，Ove?PrPC能显著上调细胞增殖标记物PrPC和 Ki67 的蛋白水平，下调氧化应激指标 NOX1 和 NOX - 4、线粒体损伤指标 cyclophilin D 和 p - DRP1 以及细胞凋亡指标 cleaved caspase 3、cleaved PARP 和 Bax 的蛋白水平。
- 联合治疗对脑出血大鼠的影响：在脑出血大鼠模型中，联合ExMito和Ove?PrPC - ADMSCs 治疗组的脑出血面积、脑梗死面积和炎症细胞浸润显著低于单一治疗组，且神经功能（角落测试）明显改善。具体数据显示，到第 28 天，联合治疗组的各项损伤指标在所有实验组中处于最低水平，而神经功能改善最为显著。同时，联合治疗还能显著上调细胞周期和细胞应激信号蛋白的表达，下调氧化应激、线粒体损伤、DNA 损伤、细胞凋亡和纤维化相关蛋白的表达。
研究结论和讨论部分指出，联合ExMito和Ove?PrPC在 ADMSCs 中的治疗方案在减少 ICH 体积和梗死面积方面优于单一治疗方案。在大鼠 ICH 模型中，两种治疗方法均显著改善了神经功能，而联合治疗进一步提高了治疗效果。从分子细胞水平来看，这些治疗方案主要通过减少氧化应激、线粒体损伤和炎症反应，同时激活细胞周期和增殖来改善治疗效果。然而，该研究也存在一定的局限性。一方面，尽管在临床前研究中取得了有前景的结果，但将这种治疗策略应用于临床 ICH 患者时，可能会面临伦理问题。另一方面，ICH 后神经元损伤和神经功能障碍的潜在机制较为复杂，仍需进一步深入分析。
总的来说，该研究为脑出血的治疗提供了新的思路和潜在的治疗方案，虽然距离临床应用还有一定的距离，但无疑为未来的研究奠定了坚实的基础，有望在未来为脑出血患者带来新的希望。
