RMT1-10：对抗肝脏缺血再灌注损伤的新希望

研究人员针对肝脏缺血再灌注损伤（IRI），研究 RMT1-10 的作用，发现其可保护肝脏，为治疗提供新策略。

　　肝脏，作为人体最大的实质性器官，肩负着代谢、解毒、免疫防御等重要使命，默默守护着我们的身体健康。然而，当肝脏遭遇缺血再灌注损伤（IRI）时，这一平静便被打破。IRI 常见于肝移植过程中，器官获取时的热缺血、移植前长时间的冷保存，都可能引发它。这一损伤不仅会导致原发性移植物功能障碍，还会增加后期慢性排斥的风险，严重影响肝移植的成功率和患者的预后，成为肝脏疾病治疗道路上的一块绊脚石。

为了攻克这一难题，浙江大学医学院附属第一医院的研究人员勇挑重担，开展了一项极具意义的研究。他们将目光聚焦于抗 T 细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域（TIM1）单克隆抗体 RMT1-10，深入探究其对肝脏 IRI 的保护作用及潜在机制。最终，研究成果发表在《Cell Death and Disease》杂志上，为肝脏 IRI 的治疗带来了新的曙光。

在这项研究中，研究人员运用了多种关键技术方法。他们构建了小鼠肝脏 IRI 模型，以此模拟临床实际情况；利用苏木精 - 伊红（HE）染色、透射电子显微镜（TEM）观察和末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）染色，分别从组织形态、超微结构和细胞凋亡水平评估肝脏损伤程度；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测多种指标，如丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）等，以了解肝脏功能和炎症状态；借助流式细胞术分析各类免疫细胞数量和比例的变化；通过测序分析确定相关基因表达的差异，并运用京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析筛选关键信号通路。

研究结果令人振奋：

1. RMT1-10 减轻肝脏 IRI 损伤：研究人员建立肝脏 IRI 模型后发现，与假手术组相比，IRI 组肝脏损伤明显加重。而 RMT1-10 处理后，HE 染色显示肝脏损伤得到缓解，TEM 观察到细胞肿胀减轻、细胞膜完整性改善、细胞器结构相对完整，TUNEL 染色表明细胞凋亡数量减少，这一系列结果表明 RMT1-10 能够有效减轻 IRI 诱导的肝脏损伤。
2. RMT1-10 增加 TIM1⁺ Bregs 数量并调节炎症因子表达：在评估 RMT1-10 对肝脏功能损伤的影响时，研究人员发现 IRI 会使 ALT 和 AST 水平升高，而 RMT1-10 处理后可使其降低；同时，RMT1-10 还能抑制 MDA 的上调，增加 GSH 水平，降低髓过氧化物酶（MPO）活性和二氢乙啶（DHE）强度。ELISA 检测显示，RMT1-10 进一步上调 IL-10 水平，下调 TNFα、IL-6 和 IL-1β 水平。此外，流式细胞术分析表明，RMT1-10 处理后，外周血单个核细胞（PBMCs）、脾脏和肝脏免疫细胞中 TIM1⁺ Bregs 数量增加，且 TIM1 表达也进一步提升。
3. Anti-CD20 部分逆转 RMT1-10 对肝脏 IRI 的保护作用：为探究 TIM1⁺ Bregs 在肝脏 IRI 中的保护机制，研究人员使用 Anti-CD20 去除 B 细胞后再进行实验。结果显示，Anti-CD20 与 RMT1-10 联合处理，使 RMT1-10 减轻肝脏损伤的效果部分逆转，肝脏细胞损伤加剧，凋亡细胞数量增加，同时 ALT、AST、MDA 水平上升，GSH 水平下降，IL-10 上调被抑制，TNFα、IL-6 和 IL-1β 水平下调被逆转，TIM1⁺ Bregs 数量减少。
4. RMT1-10 在体外促进 TIM1⁺ Bregs 和 IL-10 分泌：在体外实验中，研究人员构建了免疫细胞与肝细胞的共培养体系。结果发现，RMT1-10 处理可逆转 IRI 导致的细胞活力下降，显著增加 IL-10 表达和 TIM1⁺ Bregs 数量。此外，RMT1-10 还能抑制 Th1 细胞分化，激活调节性 T 细胞（Tregs），而去除 B 细胞后，RMT1-10 对 Tregs 的激活作用消失。
5. RMT1-10 通过 NF-κB 通路保护肝脏 IRI：通过测序分析和 KEGG 富集分析，研究人员发现 RMT1-10 处理后，核因子 κB（NF-κB）信号通路相关基因表达发生变化。进一步检测发现，IRI 会使 p-IκBα、p-IKKα/β 水平上调，而 RMT1-10 处理可使其下调，表明 RMT1-10 可能通过非典型 NF-κB 通路促进 B 细胞成熟，增加 TIM1⁺ Bregs 数量，进而调节炎症反应，保护肝脏免受 IRI 损伤。

综合以上研究，RMT1-10 可通过非典型 NF-κB 通路促进 B 细胞成熟，增加 TIM1⁺ Bregs 数量，这些细胞分泌 IL-10 调节炎症反应，从而有效保护肝脏免受缺血再灌注损伤。这一研究成果为肝脏 IRI 的治疗提供了新的潜在治疗靶点和策略，有望推动肝脏疾病治疗领域的进一步发展，为广大患者带来新的希望。