褪黑素抗肝癌新发现：抑制 PD-L1 表达，双效抗癌开启新征程

为探究褪黑素对肝癌免疫逃逸的影响，研究发现其可抑制 PD-L1 表达，双效抗癌，为肝癌治疗提供新思路。

　　在人体这个神奇的 “小宇宙” 里，癌症就像一群肆意捣乱的 “坏分子”，而肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）更是其中的 “重犯”，在全球范围内严重威胁着人类健康，它的高发病率和死亡率让人们谈之色变。目前，肝癌的治疗手段虽有进步，但患者的预后情况依旧不理想，这背后的 “罪魁祸首” 之一就是肿瘤免疫逃逸。肿瘤细胞就像狡猾的 “逃犯”，通过上调程序性死亡配体 1（programmed death-ligand 1，PD-L1）这一关键免疫检查点，成功躲过免疫系统的 “追捕”。PD-L1 主要位于肿瘤细胞表面，它能与免疫细胞上的程序性死亡受体 1（programmed death-1，PD-1）蛋白结合，让免疫细胞失去识别和攻击癌细胞的能力，从而使肿瘤细胞在体内肆意生长、转移。

为了攻克这一难题，寻找更有效的肝癌治疗方法，赣南医学院等研究机构的研究人员展开了深入研究。他们将目光聚焦在褪黑素（Melatonin）上，褪黑素是由松果体分泌的一种神经内分泌激素，不仅能调节昼夜节律，还具有免疫调节和抗癌等多种功能。然而，它在肝癌中的具体作用机制，尤其是对肝癌免疫逃逸的影响尚不清楚。此次研究成果发表在《Scientific Reports》上，为肝癌治疗带来了新的曙光。

在本次研究中，研究人员运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，他们培养了 Huh7 和 HepG2 两种肝癌细胞系，采用细胞活力检测（如 CCK-8 法）、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell 迁移和侵袭实验等，来观察褪黑素对癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响；通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）和荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）检测相关蛋白和基因的表达水平。动物实验上，构建了 H22 细胞皮下肿瘤模型和腹水型 H22 细胞皮下肿瘤模型，对实验小鼠进行分组处理，观察肿瘤生长情况，还运用了组织病理学染色（如苏木精 - 伊红染色，HE 染色）、免疫组化等技术检测肿瘤组织的病理变化和相关蛋白的表达。

研究结果如下：

1. 褪黑素抑制 Huh7 和 HepG2 细胞增殖、迁移和侵袭，促进凋亡：通过一系列细胞实验发现，褪黑素对 Huh7 和 HepG2 细胞的增殖、迁移和侵袭具有显著的抑制作用，且呈剂量依赖性。同时，褪黑素能促进细胞凋亡，使 Cleaved-Caspase-3 蛋白和 BAX、BAD 的 mRNA 表达水平上调，BCL2 蛋白和 mRNA 水平下调。
2. 褪黑素在共培养系统中通过下调 PD-L1 表达抑制细胞增殖、促进凋亡：研究表明，褪黑素可下调 Huh7 和 HepG2 细胞中 PD-L1 的蛋白和 mRNA 表达水平。在与 T 淋巴细胞共培养实验中，经褪黑素预处理的癌细胞增殖能力下降，细胞周期发生改变，凋亡率增加，同时 T 淋巴细胞分泌免疫细胞因子的能力增强。
3. 褪黑素在肝癌小鼠模型中展现抗癌效果：在构建的两种肝癌小鼠模型中，给予褪黑素口服后，随着用药时间延长，褪黑素处理组的肿瘤体积和重量明显小于对照组。HE 染色和 Ki-67 免疫染色结果显示，褪黑素能有效抑制癌细胞的异常增殖和病理变化。
4. 褪黑素对肿瘤组织中相关蛋白和 mRNA 水平及淋巴细胞活性的影响：在腹水肿瘤模型中，褪黑素处理组肿瘤组织的 PD-L1 蛋白表达显著降低，同时小鼠脾脏中淋巴细胞活性和细胞因子分泌能力增强。此外，褪黑素还能调节肿瘤组织中 BAX、BAD、BCL2、BCL2-L1 等基因的 mRNA 表达水平，以及相关蛋白的表达，促进 T 淋巴细胞浸润。进一步研究发现，褪黑素可降低缺氧诱导因子 1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）蛋白水平，同时增加丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路中 JNK、P38 及其磷酸化形式的表达。

研究结论和讨论部分指出，本研究证实了褪黑素在肝癌中具有双重抗癌作用。一方面，它能直接抑制癌细胞的增殖、迁移和侵袭；另一方面，通过降低 PD-L1 表达，抑制免疫逃逸，增强抗肿瘤免疫。其降低 PD-L1 表达的机制可能与抑制 HIF-1α 表达或激活 MAPK-JNK 和 MAPK-P38 通路有关。这一研究成果为肝癌治疗提供了新的理论依据和潜在治疗策略。目前，PD-1/PD-L1 抑制剂在肝癌治疗中虽有一定效果，但存在免疫相关不良反应和耐药性等问题。褪黑素作为一种相对安全的小分子药物，有望与 PD-1/PD-L1 抑制剂联合使用，减少抑制剂的用量，降低不良反应，提高治疗效果。同时，该研究结果也可能为其他癌症的治疗提供参考。不过，未来还需要开展更多的临床试验，进一步评估褪黑素治疗肝癌的有效性和最佳剂量，以及其抑制肿瘤免疫逃逸的实际效果。