CGREF1—— 肝癌治疗新希望：激活 Wnt/β-Catenin 通路促进癌细胞发展

为探究 CGREF1 在肝癌（HCC）中的作用，研究发现其高表达促癌，或成潜在治疗靶点。

　　# 肝癌研究新突破：CGREF1 成为潜在治疗靶点
在人体的微观世界里，肝脏是一个至关重要的器官，然而肝癌却如同隐藏在暗处的杀手，严重威胁着人类健康。肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）作为原发性肝癌中最常见的类型，是全球范围内高发的恶性肿瘤，也是癌症相关死亡的主要原因之一。由于肝癌早期症状隐匿，多数患者确诊时已处于中晚期，这使得早期诊断率较低。即便近年来肝癌的治疗手段有所进步，但患者的复发率依然居高不下，生存率依旧极低。因此，从分子层面深入探究肝癌的发病机制，寻找关键分子并明确其作用机制，对提高肝癌的诊断率、延长患者生存期以及改善预后意义重大。

在这样的背景下，浙江省诸暨市人民医院的研究人员开展了一项针对肝癌的研究，相关成果发表在《BMC Cancer》杂志上。此次研究聚焦于一种名为细胞生长调节因子 1（Cell growth regulator with EF-hand domain 1，CGREF1）的蛋白，它含有两个高度保守的钙结合 EF 手结构域，虽此前有研究预测其在多种癌症中表达上调，但在肝癌中的具体功能却尚不明确。

研究人员为了深入了解 CGREF1 在肝癌中的作用，运用了多种技术方法。首先，利用生物信息学数据库 UALCAN 和 GEPIA 分析 CGREF1 在肝癌组织中的表达模式及其与患者生存结局的临床相关性；接着，通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、免疫组化（IHC）和蛋白质免疫印迹（Western blot）等实验技术进行验证；此外，构建肝癌细胞系的基因敲低和过表达模型，采用 MTT 法、集落形成实验以及 Transwell 迁移和侵袭实验，研究 CGREF1 对肝癌细胞恶性表型的调控作用；最后，综合生物信息学预测和 Western blot 分析，探究 CGREF1 影响肝癌进展的分子机制。

研究结果

1. CGREF1 在肝癌中高表达且与不良预后相关：通过 UALCAN 数据库分析发现，CGREF1 在肝癌组织中高表达。GEPIA 数据库进一步验证了这一结果，并且显示高表达 CGREF1 的肝癌患者总生存率更低。免疫组化和 Western blot 分析表明，CGREF1 在肝癌患者的癌组织中表达水平显著高于正常肝组织。在细胞水平上，RT-qPCR 检测发现多种肝癌细胞系（SK-Hep1、Huh7、Hep3B 和 HCC-LM3）中 CGREF1 的 mRNA 水平明显高于非癌肝细胞系 THLE-3，其中 HCC-LM3 和 Hep3B 细胞系中尤为突出。
2. CGREF1 在肝癌细胞中起癌基因作用：在肝癌细胞系中进行 CGREF1 的过表达和敲低实验。RT-qPCR 验证了过表达和敲低的效果。MTT 实验显示，过表达 CGREF1 显著提高肝癌细胞活力，敲低则导致活力明显下降；集落形成实验表明，过表达 CGREF1 增强了细胞的集落形成能力，敲低则抑制该能力；Transwell 实验发现，过表达 CGREF1 促进肝癌细胞的迁移和侵袭，敲低则起到抑制作用。这些结果表明 CGREF1 在肝癌细胞中可能作为癌基因发挥作用。
3. CGREF1 激活肝癌细胞中的 Wnt/β-Catenin 信号通路：利用基因集富集分析（GSEA）发现 CGREF1 与 Wnt/β-Catenin 信号通路密切相关。进一步研究发现，过表达 CGREF1 可通过降低 p-β-Catenin 水平、增加 β-Catenin 水平来激活 Wnt/β-Catenin 信号通路；相反，敲低 CGREF1 则显著抑制该信号通路。
4. CGREF1 正向调节肝癌细胞中 EIF3H 的表达：通过对 TCGA 数据库中与 CGREF1 正相关的基因进行分析，并结合文献研究，选择真核翻译起始因子 3H 亚基（EIF3H）进行深入研究。结果显示，过表达 CGREF1 导致 EIF3H 表达水平显著增加，敲低 CGREF1 则使 EIF3H 表达下调，表明 CGREF1 可能上调 EIF3H 的表达。
5. CGREF1 通过 EIF3H 介导的机制激活 Wnt/β-Catenin 通路并促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭：当单独过表达 CGREF1 时，EIF3H 表达上调且 Wnt/β-Catenin 通路激活；但在过表达 CGREF1 的同时敲低 EIF3H，Wnt/β-Catenin 通路受到抑制。同时，单独过表达 CGREF1 可促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭，而过表达 CGREF1 并敲低 EIF3H 时，这些促进作用减弱。这表明 CGREF1 可通过上调 EIF3H 激活 Wnt/β-Catenin 通路，进而促进肝癌细胞的恶性行为。

研究结论与意义

综合上述研究结果，CGREF1 在肝癌组织中高表达，其高表达与肝癌患者的不良预后相关。体外研究表明，CGREF1 通过上调 EIF3H，激活 Wnt/β-Catenin 信号通路，促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。这一发现揭示了 CGREF1 在肝癌发生发展中的重要作用机制，为肝癌的治疗提供了新的潜在靶点，有望为开发更有效的肝癌治疗策略提供理论依据，对改善肝癌患者的预后具有重要意义。不过，该研究也存在一定局限性，目前尚未完全阐明 CGREF1 上调 EIF3H 表达的具体机制，后续还需要更深入广泛的研究来全面理解这一调控过程 。