综述：纳米抗体增强型 CAR-T 细胞疗法：攻克实体瘤的新希望

为解决 CAR-T 疗法在实体瘤治疗中的难题，研究人员开展纳米抗体相关研究，发现其可提升疗效，意义重大。

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近年来，癌症治疗领域不断探索创新，细胞疗法成为备受瞩目的焦点，其中嵌合抗原受体 T 细胞（CAR-T）疗法更是大放异彩。CAR-T 细胞就像是经过基因改造的 “超级战士”，它能表达特殊的 CAR 分子，精准识别肿瘤细胞上的特定抗原，进而发起攻击，消灭癌细胞。在血液癌症治疗方面，CAR-T 疗法成绩斐然，像针对 CD19 和 B 细胞成熟抗原（BCMA）的疗法，让许多白血病和淋巴瘤患者看到了希望。然而，当面对实体瘤时，CAR-T 疗法却遭遇了重重困境。

实体瘤拥有复杂的肿瘤微环境（TME），这里就像一个 “免疫抑制场”，低 pH、缺氧、高渗透性等恶劣条件，严重阻碍了 CAR-T 细胞的生存和功能发挥。同时，肿瘤细胞还会释放各种免疫抑制因子，进一步削弱 CAR-T 细胞的战斗力。而且，实体瘤存在抗原异质性，肿瘤细胞表面的抗原千变万化，使得 CAR-T 细胞难以精准打击。此外，T 细胞耗竭也是一个大问题，CAR-T 细胞在与肿瘤细胞的战斗中容易 “疲惫不堪”，失去杀敌能力。这些难题严重限制了 CAR-T 疗法在实体瘤治疗中的应用，寻找新的突破迫在眉睫。

为了攻克这些难题，山东女子学院等机构的研究人员开展了关于纳米抗体增强型 CAR-T 细胞疗法的研究。他们发现，单域抗体（sdAbs），如源自骆驼科动物的 VHH 和鲨鱼的 VNAR，具有独特的优势，有望为 CAR-T 疗法带来新的转机。相关研究成果发表在《Biomarker Research》上。

研究人员主要采用了基因工程技术，对 CAR-T 细胞进行改造，将单域抗体整合到 CAR 结构中。同时，通过细胞实验和动物实验，评估改造后的 CAR-T 细胞对肿瘤细胞的杀伤效果、在体内的持久性以及安全性等。

在 CAR-T 细胞疗法的发展历程中，从第一代到如今，每一次的进步都凝聚着科研人员的心血。而单域抗体在 CAR-T 疗法中的应用，为治疗实体瘤开辟了新方向。单域抗体具有诸多优势，其分子量小，仅为传统抗体的 1/10 左右，这使得它能够轻松穿透实体瘤组织，更好地接近肿瘤细胞。同时，单域抗体稳定性高，在高温、有机溶剂、蛋白酶以及较宽的 pH 范围内都能保持稳定，不易失活。而且，它免疫原性低，与人类 VH 基因相似度高，经过简单改造就能具备人类抗体特性，降低了人体免疫系统对 CAR-T 细胞的排斥反应。

在靶点选择方面，基于单域抗体的 CAR-T 疗法不再局限于传统的 CD19 靶点，而是拓展到了 HER2、PD-L1、EGFR 等多个靶点。例如，针对癌胚抗原相关细胞黏附分子（CEACAM）的 CAR-T 细胞，在体外和体内实验中都对 CEACAM5 和 CEACAM6 高表达的肿瘤细胞表现出强大的杀伤力；以 MUC1 为靶点的 CAR-T 细胞，能够有效识别并攻击过表达 MUC1 的肿瘤细胞，且副作用小。这些研究结果表明，单域抗体能够精准靶向肿瘤细胞，为治疗不同类型的实体瘤提供了更多可能。

从结构优势来看，VHH 纳米抗体在 CAR-T 疗法中表现出色。其结构中的关键部分，如间隔区，通常采用(G4? S)柔性接头或与 IgG 或 CD8α 胞外域结合的形式，这种设计确保了 CAR-T 细胞的正确空间定位，促进了免疫突触的形成，从而增强了 CAR-T 细胞的激活和抗肿瘤效果。此外，Tandem CARs（TanCARs）和多域 CAR-T 细胞的出现，进一步提升了治疗效果。TanCARs 通过双特异性抗原结合域，能够同时靶向同一抗原的不同表位或不同肿瘤细胞上的不同抗原，大大提高了肿瘤靶向性和治疗效果。

VNAR 抗体同样潜力巨大。研究人员构建的抗 PD-L1 VNAR（B2），能够部分阻断 PD-1 与 PD-L1 的相互作用，CAR (B2) T 细胞可以有效靶向表达 PD-L1 的癌细胞，抑制肿瘤转移。这一成果为免疫治疗提供了新的思路，有望克服实体瘤的免疫逃逸机制。

尽管 VHH 和 VNAR - 基于的 CAR-T 疗法展现出了巨大的潜力，但目前仍面临一些挑战。在临床进展方面，只有少数针对实体瘤的疗法处于临床前研究阶段。肿瘤微环境的免疫抑制作用、抗原表达的异质性、细胞因子释放综合征（CRS）以及脱靶毒性等问题，仍然是亟待解决的难题。同时，VHH/VNAR 构建体在生产过程中也存在一定困难，免疫原性问题也需要进一步研究。

总的来说，单域抗体增强型 CAR-T 细胞疗法为癌症免疫治疗带来了新的曙光。它利用单域抗体的独特优势，在一定程度上克服了传统 CAR-T 疗法在实体瘤治疗中的障碍。未来，研究人员将继续努力，通过开发双靶点或多靶点 CAR-T 疗法、结合免疫检查点抑制剂或放疗等手段，进一步提升治疗效果。同时，借助基因编辑技术，有望开发出通用的 CAR-T 细胞，降低生产成本，让更多患者受益。相信在科研人员的不懈努力下，这种疗法将在癌症治疗领域发挥更大的作用，为众多癌症患者带来新的希望。