纳米靶向脂质体：肾癌联合免疫治疗的新希望

为解决肾癌免疫治疗难题，研究人员构建 Axi/siRNAPD-L1@NGR-Lipo 脂质体，显著提升抗癌效果。

　　肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，近年来发病率持续上升。对于早期肾癌患者，根治性手术是主要的有效治疗手段，但多数患者确诊时已处于晚期，生存率仅 12% 。晚期肾癌患者主要依赖全身药物治疗，然而传统化疗药物效果不佳。免疫检查点抑制剂（ICI）虽为多种恶性肿瘤的治疗带来新希望，但在肾癌治疗中，仅一小部分患者对 PD-1/PD-L1 阻断疗法有积极反应。这是因为肾癌属于富血管肿瘤，其异常的肿瘤血管系统不仅阻碍效应 T 细胞浸润，还会诱导免疫抑制性肿瘤微环境，从而削弱 ICI 治疗效果。因此，如何调节异常的肿瘤血管，增强免疫治疗效果，成为肾癌治疗领域亟待解决的关键问题。

为了攻克这一难题，中国医学科学院药物研究所等机构的研究人员开展了一项创新研究。研究成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》上。该研究设计并构建了 NGR 肽修饰的主动靶向脂质体（Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo），用于共包裹抗血管生成药物阿昔替尼（Axitinib，Axi）和 PD-L1 siRNA，旨在实现血管正常化和免疫检查点抑制的协同作用，增强抗肿瘤免疫。

研究人员运用了多种关键技术方法。在脂质体制备与表征方面，通过薄膜分散法制备脂质体，并利用动态光散射（DLS）、透射电子显微镜（TEM）等技术对其粒径、电位和微观结构进行表征。细胞实验技术上，采用细胞摄取实验、基因沉默实验、细胞毒性实验、细胞凋亡实验等，在体外探究脂质体的作用效果。动物实验方面，构建皮下肾癌小鼠模型，借助体内成像系统研究脂质体的生物分布和肿瘤积累情况，通过多种染色方法评估肿瘤生长、转移、血管重塑以及免疫细胞浸润等情况。此外，还运用了转录组测序分析，深入探究脂质体作用的分子机制。

在研究结果部分：

• 脂质体的制备与表征：成功合成了 DSPE-PEG2000-NGR，并制备出 Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo。该脂质体平均粒径约 156.2nm，具有良好的稳定性，在多种介质中储存 7 天，粒径变化小于 200nm 且变化率在 20% 以内。
• 体外细胞实验：NGR 修饰的脂质体可显著增强人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和小鼠肾癌细胞（Renca）的摄取效率。Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 能有效降低 Renca 细胞表面 PD-L1 蛋白的表达，其细胞毒性和诱导凋亡能力均优于其他制剂。在三维肿瘤球实验中，该脂质体穿透能力强，对肿瘤球生长抑制作用明显。
• 体内实验：体内成像显示，NGR 修饰增强了脂质体在肿瘤组织的靶向性和聚集能力。Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 在小鼠肾癌模型中表现出卓越的抗肿瘤和抗转移效果，能显著抑制肿瘤生长，延长小鼠生存期，且几乎无肺转移。同时，该脂质体具有良好的生物安全性，对小鼠体重、肝肾功能以及主要器官均无明显不良影响。
• 肿瘤血管重塑：经 Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 处理后，肿瘤血管结构和功能得到有效改善，微血管密度降低，周细胞覆盖率增加，血管灌注提高，血管通透性降低。
• 免疫治疗机制：Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 可显著增加肿瘤内细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL，CD8⁺ T 细胞）和自然杀伤细胞（NK 细胞）的浸润，同时减少调节性 T 细胞（Tregs）和髓源性抑制细胞（MDSCs）等免疫抑制细胞的比例，有效逆转肿瘤免疫抑制微环境。此外，该脂质体还能有效沉默 PD-L1 基因，降低肿瘤细胞表面 PD-L1 蛋白的表达。
• 转录组测序分析：转录组测序结果表明，Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 处理后，差异基因主要富集在免疫反应和肿瘤血管系统相关通路。它可抑制血管生成相关信号通路，同时激活免疫相关信号通路，促进 T 细胞和 NK 细胞浸润，增强抗肿瘤免疫治疗效果。

综上所述，该研究成功构建了 Axi/siRNA^PD-L1@NGR-Lipo 脂质体，其在肿瘤血管重塑、免疫微环境调节以及抗肿瘤免疫治疗方面展现出显著优势。这一研究为抗血管生成治疗与 ICI 联合治疗肾癌提供了新的策略，有望改善肾癌患者的治疗现状，为多种实体肿瘤的免疫治疗开辟新的方向，具有重要的临床转化和应用价值。