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为解决玉米花粉寿命短阻碍种质改良和杂交种子生产问题,研究人员开展花粉存储技术研究,得出可存储 7 天的低成本方法,助力种业。
玉米,作为全球重要的粮食、饲料及工业原料作物,在农业生产中占据着举足轻重的地位。在玉米的繁殖过程里,花粉起着关键作用。然而,玉米花粉(Zea mays pollen)却有着一个让人头疼的 “短命” 问题,它在自然环境下存活时间极短,这给玉米的种质改良和杂交种子生产带来了巨大挑战。想象一下,育种专家们满怀期待地想要培育出更优质、高产的玉米品种,却因为花粉存活时间不够,无法顺利完成授粉,那该有多无奈。而且,在杂交种子生产环节,大量新鲜花粉的及时供应也成了难题,严重影响了种子的产量和质量。
为了攻克这一难关,来自先正达(Syngenta)等机构的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Communications Biology》上,为玉米花粉存储技术带来了新的曙光。
研究人员在研究过程中采用了多种关键技术方法。在花粉收集与处理方面,温室和田间种植的玉米,其花粉收集时间均选在花粉散落和活力最强的时段,收集后经过筛选去除杂质,并与载体化合物混合。对于花粉活力评估,运用了花粉管萌发培养基(pollen tube germination media)结合特定的评分标准进行检测。此外,利用气体分析仪对存储容器内的氧气(O?)和二氧化碳(CO?)含量进行监测,以此来分析花粉的呼吸代谢情况。
下面来看看具体的研究结果:
- 花粉呼吸动力学与温度的关系:研究人员将玉米花粉与滑石粉混合后,置于不同温度下存储。实验发现,在 23°C 存储时,花粉代谢气体交换速率很高,4 天后就出现了霉菌生长,3 天花粉管萌发完全停止;而在 2°C 和 6°C 存储时,花粉代谢气体交换速率明显降低,分别可保持 6 天和 7 天的活力。进一步研究发现,存储在 2°C 时温度会偶尔降至 0°C,这可能导致花粉提前死亡,因此后续实验选择在 6°C 进行。
- 代谢气体交换对存储容器的要求:研究发现,当在 125 mL 存储容器中存储超过 1 克花粉 7 天时,花粉管萌发率会下降。这是因为细胞呼吸产生的 CO?浓度增加,抑制了花粉管萌发。降低 O?浓度、减少 CO?积累的实验表明,在部分真空条件下存储花粉,虽能保持花粉活力 7 天,但 O?消耗速率未显著降低,且当花粉量超过一定限度时,花粉管萌发仍会受影响。研究人员还测试了多种 CO? 封存剂,发现苏打石灰、氢氧化锂、乙醇胺和 Florisil? 效果较好,最终选择苏打石灰用于后续实验,因为它成本低、全球易购且安全性高。此外,增加存储容器内 O?含量的实验表明,添加纯 O?并不能提高授粉性能,高浓度 O?还会延迟花粉管萌发,且玉米花粉在高于 3 个大气压的环境下无法长时间存活。
- 透气屏障简化花粉存储并优化存储容器效率:由于玉米花粉的高代谢率限制了存储规模的扩大,研究人员从植物组织培养中获得灵感,尝试使用透气屏障。他们发现,Micropore?纤维素胶带和 Tyvek?(高密度聚乙烯)薄膜等透气屏障能有效减少水蒸气损失,维持存储容器内的气体平衡,提高花粉存储量和种子结实率。通过实验确定,每克纯花粉需要大于 1.67 平方毫米的透气屏障来维持活力。研究人员还对存储容器进行了优化,在一升规模的存储实验中,通过在容器上打孔增加透气屏障表面积,有效解决了气体扩散距离过长的问题,显著提高了种子结实率。
- 优良玉米花粉存储载体化合物的鉴定:研究人员通过扫描电子显微镜(SEM)、复合显微镜和苯胺蓝染色等方法对不同载体化合物进行研究,发现滑石粉会过度包裹玉米花粉粒,抑制花粉与花丝的粘附和花粉管萌发,从而影响种子结实。而结晶二氧化硅(crystalline silica)、微粉硅胶(Florisil?)等载体表现出更好的性能。进一步研究发现,载体的颗粒大小和比表面积是影响其性能的关键因素。经过对多种载体的筛选和测试,最终确定微晶纤维素(MCC)是最适合玉米花粉存储的载体,它不仅能提高每穗种子数,还能保证种子大小和形状的一致性,这对杂交种子生产至关重要。
研究结论和讨论部分表明,这项研究成果意义重大。研究人员通过对 100 年玉米花粉存储研究的梳理和分析,优化出了一套高性能的短期玉米花粉存储方案。该方案利用冷藏降低花粉呼吸速率,结合透气屏障简化存储过程,使用微晶纤维素作为载体提高授粉性能。此方案成本低、全球易购,适用于不同的玉米品种和生产环境,为玉米育种和种子生产提供了有力支持。不过,将该技术应用于商业种子生产,还需要解决机械化花粉收集和应用的效率问题。未来研究可以进一步深入探讨载体化合物、存储容器湿度与花粉含水量之间的关系,为玉米花粉存储技术的发展提供更多理论依据。
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