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为探究希拉季特(Shilajit)对人牙周膜(hPDL)细胞伤口愈合的影响,研究发现其可促进细胞迁移、增殖,利于牙周组织修复。
牙周炎,这个口腔健康的 “隐形杀手”,正悄然影响着全球超 90% 成年人的生活。它就像一个狡猾的破坏者,不仅能引发牙龈红肿、出血,还会逐渐侵蚀牙齿的支撑结构,包括牙龈、牙周膜和牙槽骨,严重时甚至导致牙齿松动、脱落。传统的治疗方法,如洗牙和牙根平整,虽然能在一定程度上控制病情发展,但受损牙周组织的再生却始终是个难题。
在这样的背景下,来自沙特阿拉伯国王哈立德大学、印度和柬埔寨等多所机构的研究人员,将目光投向了一种神秘的天然物质 —— 希拉季特(Shilajit)。希拉季特是一种从世界各地山脉岩石层渗出的物质,颜色从浅棕色到深棕色不等,在传统医学中,它早已凭借其抗氧化、抗炎等多种神奇功效,被用于治疗多种疾病。然而,希拉季特对牙周膜细胞伤口愈合的影响,此前却鲜有人研究。于是,研究人员开展了一项关于希拉季特对人牙周膜(hPDL)细胞伤口愈合影响的研究,相关成果发表在《BMC Complementary Medicine and Therapies》杂志上。
研究人员主要采用了以下关键技术方法:首先是细胞培养技术,从健康人牙齿中分离出 hPDL 细胞进行培养;MTT 检测用于评估细胞活力;利用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;通过吖啶橙 / 溴化乙锭(AO/EtBr)双染法检测细胞凋亡;划痕愈合实验评估 hPDL 细胞的伤口愈合能力;ELISA 技术测定基质金属蛋白酶 - 2(MMP-2)和基质金属蛋白酶 - 9(MMP-9)的水平;实时 PCR 用于分析与伤口愈合和凋亡相关基因的表达。
下面来看看具体的研究结果:
细胞毒性评估 :通过 MTT 实验,研究人员发现,浓度高达 3mg/mL 的希拉季特对 hPDL 细胞没有不良影响,甚至还可能刺激细胞增殖,而浓度超过 4mg/mL 时,细胞活力显著下降,表明高浓度希拉季特具有细胞毒性。从显微镜下观察,2 - 3mg/mL 希拉季特处理的细胞呈现出更细长、纺锤状的形态,暗示希拉季特可能影响细胞骨架,参与伤口愈合和细胞迁移过程。
对 hPDL 细胞伤口愈合潜力的影响 :划痕愈合实验显示,与对照组相比,用 2mg/mL 和 3mg/mL 希拉季特处理的 hPDL 细胞单层伤口愈合速度明显加快,细胞迁移能力增强,这表明希拉季特具有促进人牙周膜细胞伤口愈合和细胞迁移的潜力。
通过调节炎症信号分子促进伤口愈合过程 :实时 PCR 结果表明,希拉季特可通过调节肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、白细胞介素 - 1β(IL-1β)、环氧化酶 - 2(Cox-2)和 I 型胶原 α1 链(COL1A1)等基因的表达来促进伤口愈合。它能上调 TNF-α 和 IL-1β 等促炎细胞因子的表达,营造更可控的炎症环境,同时调节 Cox-2 基因表达影响炎症反应,还能增加 COL1A1 基因表达,维持牙周膜的结构完整性和促进愈合。
对 MMP2 和 MMP9 蛋白水平的影响 :MMP2 和 MMP9 是参与组织重塑的关键酶,对维持组织稳态至关重要。研究发现,希拉季特处理的 hPDL 细胞中,MMP2 和 MMP9 蛋白水平显著升高,这表明希拉季特可能通过调节这两种酶的表达,影响牙周膜细胞外基质的更新。
对细胞增殖和凋亡的影响 :AO/EtBr 双染结果显示,经 2mg/mL 和 3mg/mL 希拉季特处理 24 小时的 hPDL 细胞没有出现凋亡特征。同时,希拉季特处理使细胞增殖特异性标记物 PCNA 的表达显著上调,而凋亡标记物 Caspase-3、Bcl-2 和 p53 的表达没有明显变化,这说明希拉季特在促进细胞增殖的同时,对这些与细胞存活和凋亡相关的基因没有显著影响。
综合研究结论和讨论部分,此次研究首次证实了希拉季特能够促进 hPDL 细胞的迁移和增殖,进而加速伤口闭合,这为牙周组织修复提供了新的可能。希拉季特在牙周健康领域展现出了巨大的潜力,有望成为促进牙周组织再生、加速伤口愈合的关键因素。不过,目前的研究只是在体外进行,未来还需要进一步开展动物实验和临床试验,以全面验证希拉季特作为伤口愈合剂的实际效果。但无论如何,这项研究为再生医学开辟了新的研究方向,为未来牙周疾病的治疗带来了新的希望。
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