新型解聚酶编码裂解性噬菌体 vB_AbaM_AB4P2 的特性及其抗鲍曼不动杆菌生物被膜的研究

研究人员针对鲍曼不动杆菌感染问题，研究噬菌体 vB_AbaM_AB4P2，发现其能有效抑制细菌生长和破坏生物被膜。

　　# 新型噬菌体助力抗击鲍曼不动杆菌感染：打破生物被膜防线
在医院这个本应充满希望与康复的地方，却隐藏着一些 “小恶魔”，时刻威胁着患者的健康。鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）就是其中之一，它是一种条件致病菌，堪称医院里的 “麻烦制造者”。它常常引发各种感染，像呼吸道感染、血流感染、尿路感染等，尤其是在重症监护病房（ICU），它的 “身影” 随处可见，隔离率超过 70% 。更让人头疼的是，它会在医疗器械表面形成生物被膜，就像给细菌穿上了一层坚固的 “铠甲”，不仅让普通消毒剂难以发挥作用，还对抗生素产生了很强的耐药性，使得相关感染治疗困难重重。因此，寻找有效的方法来消除鲍曼不动杆菌的生物被膜迫在眉睫。

为了解决这个难题，广东工业大学的研究人员开展了一项重要研究。他们把目光投向了噬菌体（phage），这是一类能杀死细菌的天然 “杀手”，从 20 世纪初就开始应用于实际。研究人员从污水处理厂的水中分离出了一种新型裂解性噬菌体 vB_AbaM_AB4P2（简称噬菌体 AB4P2），并对其进行了深入研究。相关研究成果发表在《BMC Microbiology》上。

研究人员为了探究噬菌体 AB4P2 的特性及作用，采用了多种技术方法。在样本获取上，鲍曼不动杆菌菌株来自广州临床样本，水样取自洛阳污水处理厂 。利用透射电子显微镜（TEM）观察噬菌体形态；通过对不同温度和 pH 条件下噬菌体滴度的测定，评估其稳定性；运用基因组测序和生物信息学分析技术，对噬菌体的基因组进行全面剖析；采用结晶紫染色和荧光显微镜观察等方法，研究噬菌体对生物被膜的消融效果。

噬菌体 AB4P2 的基本特性

研究人员从污水处理厂水中成功分离出 29 种噬菌体，其中噬菌体 AB4P2 在宿主菌株鲍曼不动杆菌 AB4 的菌苔上形成了直径 4mm 的清晰噬菌斑，周围还有直径约 10mm 的晕圈，这表明它可能具有解聚胞外多糖和生物被膜的能力。TEM 观察显示，它有直径约 80nm 的二十面体头部和长度约 100nm 的尾部。宿主范围测试发现，它能在鲍曼不动杆菌 AB3 和 AB4 上形成噬菌斑 。

在生长和稳定性方面，当感染复数（MOI）为 1 时，噬菌体 AB4P2 的滴度达到最大值6.8×109 PFU/ml。一步生长曲线实验表明，它有大约 20 分钟的潜伏期，随后进入指数增长期，裂解量约为 61 PFU / 细胞。而且，它在 30 - 70°C 和 pH 3 - 11 的范围内都表现出良好的稳定性。

噬菌体 AB4P2 的基因组及系统发育分析

噬菌体 AB4P2 的基因组由长度为 45,680bp 的双链 DNA（dsDNA）分子组成，G + C 含量为 46.13%。基因组中共有 90 个开放阅读框（ORFs），其中 44 个（48.9%）注释基因与噬菌体的各种功能相关，如噬菌体结构、裂解蛋白、转录调节因子和代谢等。值得注意的是，未检测到 rRNA、tRNA、抗生素抗性基因或毒力基因 。

通过 BLASTn 分析和系统发育树构建发现，噬菌体 AB4P2 与沙门氏菌噬菌体 IME207 序列相似性最高，但身份仅为 92.58%，覆盖度为 65%。综合分析表明，噬菌体 AB4P2 是有尾噬菌体目（Caudoviricetes）的一个新物种。其尾纤维蛋白含有一个果胶裂解酶样结构域，与解聚酶活性相关，在破坏生物被膜中发挥关键作用。

噬菌体 AB4P2 对鲍曼不动杆菌的抑制作用

在研究噬菌体 AB4P2 对鲍曼不动杆菌生长的影响时发现，在最初的 0 - 4 小时内，鲍曼不动杆菌 AB4 快速生长，5 小时后进入稳定期。而加入噬菌体 AB4P2 后，它能在 16 小时内完全抑制 AB4 菌株的生长，虽然之后菌株生长有所恢复，但仍显著低于未加噬菌体的对照组，这充分显示了噬菌体 AB4P2 高效的抗菌能力。

在生物被膜消融实验中，无论是 24 孔板实验还是聚氯乙烯（PVC）导管模型实验，噬菌体 AB4P2 都表现出色。在 24 孔板实验中，它对生物被膜有显著的消融作用，消融率达到 52%，且处理后生物被膜中的死菌数量明显增加。在 PVC 导管模型实验中，噬菌体处理后，导管内的生物被膜明显减少，生物被膜消融率达到 33% 。

综上所述，噬菌体 AB4P2 属于有尾噬菌体目新物种，它携带解聚酶和裂解盒，具有很强的抑制鲍曼不动杆菌生长和破坏其生物被膜的能力。虽然长期使用可能会导致鲍曼不动杆菌 AB4 产生噬菌体抗性突变体，但它与其他噬菌体、抗生素和光敏剂联合使用，有望成为医院中对抗鲍曼不动杆菌感染的有力武器，为控制医院感染带来新的希望。未来，随着研究的深入，噬菌体疗法或许能在临床治疗中发挥更大的作用，帮助更多患者摆脱鲍曼不动杆菌感染的困扰。