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为控制青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum )感染,研究人员构建 Eu@DMSNs/Pec 纳米载体,能有效控释杀菌,且低毒安全。
番茄青枯病是农业生产中的一大难题,它由青枯雷尔氏菌引发,如同隐藏在土壤中的 “恶魔”,悄悄侵袭着番茄、土豆、辣椒等重要农作物。一旦感染,农作物会迅速枯萎,导致大幅减产,给全球农业带来巨大损失。目前,化学防治是应对青枯病的主要手段,但化学药剂残留不仅污染环境,还威胁着人们的健康和食品安全,长期使用还会使病菌产生抗药性。
在这样的背景下,寻找绿色、高效的替代方案迫在眉睫。福建农林大学和福州大学的研究人员展开了一项极具意义的研究,相关成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》上。他们以果胶修饰的树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒(DMSNs)为载体,成功构建了一种对微环境(pH、温度和酶)响应的丁香酚(Eu)纳米杀菌递送系统 Eu@DMSNs/Pec,用于精准控制青枯雷尔氏菌感染,为番茄青枯病的防治带来了新希望。
研究人员为开展此项研究,运用了多种关键技术方法。首先是材料合成技术,通过特定的反应步骤制备出 DMSNs,并进一步合成 Eu@DMSNs/Pec。其次是材料表征技术,利用透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、X 射线衍射(XRD)等对合成的纳米颗粒进行全面表征。还运用了体外释放研究技术,通过透析法研究丁香酚在不同条件下的释放过程。另外,抗菌实验技术用于检测材料的抗菌活性,借助多种检测手段探究其抗菌机制1 2 。
研究结果如下:
合成与表征 :通过一系列反应成功合成 Eu@DMSNs/Pec,DMSNs 的粒径、比表面积和孔径等影响丁香酚的负载能力,经优化后负载能力高达 72.50%。多种表征手段证实了果胶和丁香酚成功负载到 DMSNs 上,且材料具有良好的分散稳定性3 4 。
响应释放性能 :Eu@DMSNs/Pec 对 pH、果胶酶和温度具有显著响应。在 pH 为 6.8 时,丁香酚释放效果最佳;果胶酶可加速丁香酚释放;25℃时释放效果最好。其释放行为符合一级动力学模型5 6 。
体外抗菌活性 :Eu@DMSNs/Pec 抗菌效果优于单独的丁香酚。DMSNs 本身具有抗菌性,能协同丁香酚增强抗菌效果。通过多种实验观察到,Eu@DMSNs/Pec 可破坏细菌细胞膜,导致细胞内容物泄漏,抑制细菌生长7 8 。
过氧化损伤 :研究发现 Eu@DMSNs/Pec 可诱导青枯雷尔氏菌产生更多活性氧(ROS),包括超氧自由基(?O2 - )、单线态氧(1 O2 )和羟基自由基(?OH),造成更严重的 DNA 损伤,破坏细菌的抗氧化防御系统9 10 。
叶面滞留与粘附 :Eu@DMSNs/Pec 在番茄叶表面形成斑块并聚集,通过果胶增强与叶片的相互作用,具有良好的滞留和粘附性能,能有效抵抗雨水冲刷,提高丁香酚在叶片上的留存率11 12 。
体内外抗菌活性 :通过体外叶片感染实验和体内植物感染实验表明,Eu@DMSNs/Pec 能有效减轻番茄青枯病症状,且通过根吸收途径可更有效地将杀菌剂输送到感染组织,增强防治效果13 14 。
生物安全性评估 :不同浓度的 Eu@DMSNs/Pec 对番茄种子萌发影响不显著,低浓度促进根生长。对蚯蚓、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和成年斑马鱼的实验显示,Eu@DMSNs/Pec 在一定浓度下对非靶标生物安全性较高15 16 。
研究结论和讨论部分表明,该研究成功构建的 Eu@DMSNs/Pec 纳米载体,能有效实现杀菌剂的精准释放,减少杀菌剂用量。其具有良好的抗菌性能、抗雨水冲刷能力和叶面滞留率,对番茄青枯病防治效果显著。同时,对番茄种子萌发和根生长影响小,对非靶标生物毒性低,是一种高效且安全的纳米控释制剂。这一研究成果为番茄青枯病的防治提供了新的策略和方法,也为纳米技术在农业病害防治领域的应用开辟了新的道路,有望推动农业绿色可持续发展。
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