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为解决根结线虫(Meloidogyne incognita)影响番茄产量问题,研究人员探究大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)作用,发现其可增强番茄抗性,为生物防治提供新途径。
# 大豆慢生根瘤菌助力番茄抵御根结线虫侵害的关键发现
在农业的微观世界里,植物时刻面临着各种生物的挑战。根结线虫(Meloidogyne incognita)便是其中一种极具破坏力的农业害虫,它如同隐藏在土壤中的 “小恶魔”,悄无声息地侵害着众多农作物。番茄(Solanum lycopersicum)作为全球广泛种植且营养丰富的重要作物,深受人们喜爱。然而,根结线虫的肆虐却给番茄的产量带来了沉重打击,在印度,其造成的产量损失可达 30 - 50%,全球经济损失更是高达 3580 亿美元。
以往,人们常用合成杀线虫剂来对抗根结线虫,但随着时间推移,这些化学药剂带来的环境和健康风险逐渐显现,比如污染土壤、水源,危害人体健康等。因此,寻找绿色、可持续的替代方法迫在眉睫。在这样的背景下,微生物作为生物防治的潜在 “利器”,受到了科研人员的广泛关注。其中,大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)虽在豆科植物中有所研究,但对非豆科植物番茄的作用却鲜为人知。于是,来自印度 Guru Nanak Dev University 的研究人员 Roohi Sharma、Nitika Kapoor 和 Puja Ohri 展开了深入研究,旨在揭示大豆慢生根瘤菌对番茄抵御根结线虫侵害的作用机制,该研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先,他们精心准备了根结线虫的接种物,从感染的茄子和番茄根中提取卵并孵化获得 J2 期幼虫。对于大豆慢生根瘤菌,从 IMTECH 获取菌株后进行活化和保存。实验设置了多种处理组,用不同处理的大豆慢生根瘤菌与根结线虫共同作用于番茄种子,在特定条件下培养 10 天后,检测番茄的各项生理生化指标。同时,运用共聚焦显微镜观察细胞内的变化,如过氧化氢(H2O2)定位、谷胱甘肽(GC)含量以及核膜和细胞膜的损伤情况。最后,通过统计分析确定各处理组之间的差异及相关性。
研究结果
- 死亡率:研究发现,随着处理时间增加,根结线虫 J2 期幼虫死亡率显著上升。处理 5 天后,大豆慢生根瘤菌的上清液使线虫死亡率达到 100%;细菌细胞沉淀处理下,线虫死亡率在第 7 天也超过 62%,远高于对照组。
- 形态学参数:根结线虫感染显著降低了番茄种子的发芽率,使根长、茎长、根重和茎重下降,同时增加了根上的虫瘿数量。而大豆慢生根瘤菌细胞和上清液处理不仅提高了种子发芽率,还显著增加了上述形态学参数,并且虫瘿形成明显减少。
- 光合色素:受根结线虫感染的番茄幼苗,叶绿素 a(Chl a)、叶绿素 b(Chl b)、总叶绿素和类胡萝卜素含量均有所下降。但经大豆慢生根瘤菌细胞和上清液处理后,这些光合色素含量显著增加,有助于植物更好地进行光合作用。
- 应激指标:根结线虫感染导致番茄幼苗体内的氧化应激指标丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量大幅上升,表明植株受到了严重的氧化损伤。不过,大豆慢生根瘤菌处理显著降低了这些指标,减轻了植株的氧化应激。
- 抗氧化酶:根结线虫感染使番茄幼苗中多种抗氧化酶(如过氧化氢酶 CAT、超氧化物歧化酶 SOD、抗坏血酸过氧化物酶 APOX、多酚氧化酶 PPO、谷胱甘肽 - S - 转移酶 GST 和愈创木酚过氧化物酶 GuPOX)的活性增强,以应对氧化应激。大豆慢生根瘤菌处理进一步提升了这些酶的活性,增强了植株的抗氧化防御能力。
- 非酶抗氧化剂:根结线虫感染的番茄幼苗中,谷胱甘肽(GC)、生育酚(TC)、脯氨酸(PRC)和抗坏血酸(AAC)等非酶抗氧化剂含量有所增加。大豆慢生根瘤菌细胞和上清液处理后,这些物质的含量进一步显著提高,有助于清除细胞内的活性氧(ROS),减轻氧化损伤。
- 酚类化合物:根结线虫感染促使番茄幼苗中总酚、黄酮类和花青素含量显著增加,以抵御线虫侵害。大豆慢生根瘤菌处理后,这些酚类化合物含量进一步升高,增强了植株的防御能力。
- 共聚焦显微镜观察:共聚焦显微镜观察发现,根结线虫感染导致番茄幼苗根部过氧化氢积累、谷胱甘肽含量增加,同时核膜和细胞膜出现损伤。而大豆慢生根瘤菌处理降低了过氧化氢水平,减少了细胞损伤,增强了幼苗的抗逆性。
- 相关性分析:通过相关性分析发现,番茄植株的生长参数之间存在显著正相关,如根长与茎长、根长与根重等。抗氧化酶与应激指标呈负相关,表明抗氧化酶活性越高,植株受到的氧化损伤越小。此外,非酶抗氧化剂之间也存在正相关,酚类化合物与生长参数和光合色素呈正相关。
研究结论与意义
综合上述研究结果,大豆慢生根瘤菌菌株 11477 在缓解番茄幼苗根结线虫胁迫方面表现出色。它不仅提高了根结线虫幼虫的死亡率,减少了虫瘿形成,还显著改善了番茄的生长状况,增强了植株的光合作用和抗氧化防御能力,提高了酚类化合物和其他代谢物的含量。这些发现表明,大豆慢生根瘤菌可作为一种有效的生物防治剂,为农业生产中应对根结线虫侵害提供了新的可持续解决方案。该研究首次揭示了豆科根瘤菌对非豆科植物番茄的影响,为生物防治线虫病害开辟了新方向,对可持续农业发展具有重要意义,有望在未来农业生产中得到广泛应用,帮助农民减少根结线虫带来的损失,促进绿色农业的发展。