黑竹根提取物槲皮素对大鼠局灶性脑梗死的保护作用及机制研究

为探究黑竹根提取物槲皮素对大鼠局灶性脑梗死的作用，研究发现其有抗炎、抗氧化作用，机制或与抑制 TLR4 有关。

　　脑梗死，这个听起来就令人胆寒的疾病，如同隐藏在暗处的 “杀手”，时刻威胁着人们的健康。当脑部血管突然堵塞，局部脑组织因为缺血而受损，一系列可怕的连锁反应就此展开。在脑缺血 - 再灌注损伤的过程中，星形胶质细胞和小胶质细胞会从安静状态变得异常活跃，它们就像一把双刃剑，既有可能保护神经元，也可能释放出有害物质，加重神经细胞的损伤。而 Toll 样受体 4（TLR4）这个关键 “开关” 一旦被激活，会引发炎症反应的 “风暴”，让脑损伤雪上加霜。目前，虽然医学在不断进步，但对于如何有效调控这些细胞的状态，抑制 TLR4 等信号分子，从而减轻脑梗死带来的伤害，仍然是一个亟待攻克的难题。

在这样的背景下，湖南医药学院等机构的研究人员踏上了探索之旅，他们将目光聚焦在了黑竹根提取物槲皮素上。黑竹根，在传统医学中就有着治疗神经损伤的记载，但其在局灶性脑梗死治疗方面的效果和机制却一直不为人知。研究人员希望通过深入研究，揭开黑竹根提取物槲皮素的神秘面纱，为脑梗死的治疗找到新的希望。最终，他们的研究成果发表在了《Heliyon》杂志上。

研究人员为了开展这项研究，采用了多种关键技术方法。首先，利用线栓法构建了大鼠局灶性脑梗死模型，将实验动物分为假手术组、模型组、低剂量药物组和高剂量药物组等多个组别，以便进行对比研究。然后，运用免疫荧光双标法检测神经胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合衔接分子 1（Iba1）和 TLR4 的表达情况；通过免疫荧光测定神经元中神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达；采用免疫组织化学法检测皮质 GFAP 和 Iba1 蛋白；运用免疫蛋白印迹法检测 GFAP、Iba1、Nogo 受体 3（NgR3）、神经突生长抑制因子 - A（Nogo - A）、核转录因子 NF - κB p65（NF - κBp65）和 TLR4 等蛋白的表达；利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定白细胞介素 - 17（IL - 17）的浓度；通过比色法测量超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH - Px）的活性，使用硫代巴比妥酸法（TBA）测定丙二醛（MDA）的浓度 。

下面来看看具体的研究结果：

1. 黑竹根提取物槲皮素对脑缺血 - 再灌注损伤大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞表达的影响：免疫印迹分析结果显示，模型组中 GFAP 和 iba1 的蛋白表达比假手术组增加，而药物处理组，尤其是高剂量组，GFAP 和 iba1 的表达较模型组降低。免疫组织化学检测也证实了这一结果，表明黑竹根提取物能降低 GFAP 和 iba1 的表达。
2. 黑竹根提取物槲皮素抑制星形胶质细胞和小胶质细胞 TLR4 受体：免疫荧光实验表明，模型组大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞中 TLR4 的表达比假手术组增加。用药后，药物处理组，特别是高剂量组，大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞中 TLR4 的表达较模型组降低，说明黑竹根提取物可抑制大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞中 TLR4 的表达。
3. 黑竹根提取物槲皮素增加神经元 NSE 表达并抑制 NgR3 受体和 Nogo - A 蛋白：模型组中 NgR3 和 Nogo - A 的蛋白表达比假手术组增加。黑竹根干预后，NgR3 受体和 Nogo - A 蛋白表达降低，且 NgR3 受体表达的降低更为明显，表明黑竹根对神经元 NgR3 受体有抑制作用，减少了 Nogo - A 因子与 NgR3 受体的结合。
4. TLR4 阻滞剂预处理后黑竹根提取物槲皮素对 TLR4、IL - 17 和 NF - κB 的影响：预先注射 TLR4 阻滞剂并给予黑竹根提取物后，与假手术组相比，TLR4 和 NF - κB 的蛋白表达降低，高剂量组与模型组相比降低更明显。ELISA 分析显示，给予黑竹根提取物后，IL - 17 的表达也降低，高剂量组较模型组降低更显著。
5. 黑竹根提取物槲皮素对局灶性脑梗死大鼠氧化损伤的影响：假手术组的 SOD 和 GSH - Px 活性较高，MDA 含量较低，与模型对照组相比差异显著。黑竹根药物处理组的 SOD、GSH - Px 和 CAT 活性显著高于模型对照组，表明黑竹根提取物可减轻局灶性脑梗死大鼠的氧化损伤。

综合研究结果和讨论部分来看，黑竹根提取物干预局灶性脑梗死具有显著的治疗效果。它能够下调大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞的水平，减少神经胶质细胞中炎症受体 TLR4 和相关炎症因子的表达，增强神经细胞的抗氧化功能。研究人员推测，其作用机制可能与减少神经胶质细胞中炎症受体 TLR4 的表达有关。这一研究成果为黑竹根在局灶性脑梗死治疗方面的临床应用和进一步研究奠定了坚实的基础，为未来开发新的脑梗死治疗方法提供了重要的理论依据和潜在的药物选择方向，有望为众多脑梗死患者带来新的希望 。