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为探究 ASFV-G-ΔI177L 疫苗安全性和稳定性，研究发现其不安全且不稳定，为疫苗研发敲响警钟。
# 非洲猪瘟病毒疫苗研究新发现：ASFV-G-ΔI177L 的安全性与稳定性问题
在养猪业的世界里，非洲猪瘟（African swine fever，ASF）就像一场可怕的噩梦。这是一种高度传染性的出血性病毒疾病，能在家猪和野猪中引发高死亡率。自 2018 年以来，基因型 II 的非洲猪瘟病毒（如 ASFV Georgia 2007 或 ASFV-G）在亚洲多国肆虐，让大量猪群遭受灭顶之灾。由于很多受影响地区的猪场生物安全水平较低，病毒的传播愈发猖獗。在疫苗研发的赛道上，虽然减毒活疫苗被寄予厚望，但它的安全性一直备受争议。ASFV-G-ΔI177L 作为一种减毒活重组疫苗株，曾被应用于商业疫苗，可它真的安全吗？带着这样的疑问，来自 MSD Animal Health、HUN-REN Veterinary Medical Research Institute 等机构的研究人员展开了深入研究，相关成果发表在《npj Vaccines》杂志上。
这项研究意义重大，它关乎着养猪业的未来。如果能确定 ASFV-G-ΔI177L 疫苗的安全性和稳定性，就能为非洲猪瘟的防控提供有力武器；反之，如果它存在安全隐患，那养猪业就必须重新寻找更可靠的防疫方法。
研究人员在探索 ASFV-G-ΔI177L 疫苗安全性和稳定性的过程中，运用了多种关键技术方法。首先是动物实验，挑选了健康状况良好、符合特定条件的 6 - 9 周龄雄性猪和怀孕母猪参与实验，这些猪均来自同一农场，且接种前各项检测指标均为阴性。实验在高防护设施中进行，严格遵循相关法规和动物福利标准。其次是病毒检测技术，通过 qPCR 检测 EDTA 血液样本中 ASFV DNA 的存在，精确判断病毒感染情况。最后是测序和序列分析技术，运用下一代测序（NGS）获得 ASFV-G-ΔI177L 的全长基因组序列，对特定基因区域进行扩增和测序，分析病毒基因组的变化。
研究结果主要从以下几个方面呈现：
- Study 1—ASFV-G-ΔI177L 免疫怀孕母猪对后代的负面影响：为评估 I177L 缺失疫苗株对怀孕母猪及其后代的潜在风险，研究人员给两只怀孕后期的母猪接种了 1.5×102 TCID50的 ASFV-G-ΔI177L。接种后，两只母猪都出现了病毒血症，其中一只还出现了发热、食欲不振等非洲猪瘟相关临床症状。在繁殖性能方面，接种母猪的仔猪死产率高达 43%，而对照组仅为 17%。接种组活产仔猪中，多数出现非洲猪瘟特异性临床症状，很多提前被安乐死，仅有 17% 存活到研究结束，且存活仔猪在实验期间一直保持病毒血症。此外，通过 PCR 检测发现，病毒能穿过胎盘屏障感染胎儿，这表明 ASFV-G-ΔI177L 会对怀孕母猪和胎儿产生严重不良影响123。
- Study 2—ASFV-G-ΔI177L 在猪体内 3 代内可恢复毒力：考虑到 ASFV-G-ΔI177L 可能从接种动物传播到未感染动物，研究人员进行了毒力恢复研究。在体内传代实验中，第一代接种的两只动物未出现非洲猪瘟相关临床症状；第二代动物开始出现体温升高的症状；第三代和第四代动物则表现出严重的非洲猪瘟特异性临床症状，包括高热、食欲不振、行动迟缓、神经症状等，部分动物甚至死亡。随着传代次数增加，病毒血症水平也显著上升，这表明 ASFV-G-ΔI177L 在猪体内传代过程中恢复了毒力，且复制能力增强456。
- Study 3— 第 4 代稀释血液对猪的安全性研究：为排除高病毒剂量对毒力增强的影响，研究人员用第 4 代血液样本进行了后续实验。分别给三组动物接种未稀释、103 倍稀释和 10?倍稀释的第 4 代血液样本。结果显示，无论接种剂量如何，所有动物都出现了严重的临床症状，且全部死亡，高病毒血症水平在接种后 7 天被检测到。这进一步证实了第 4 代病毒（P4 病毒）具有高毒力，高接种剂量并非导致毒力增强的唯一因素78。
- 体内传代 ASFV-G-ΔI177L 的基因分析：对传代病毒的基因分析发现，在传代过程中，病毒基因组发生了变化。除了常见的 MGF 110 - 11L 和 MGF 110 - 14L 基因中多聚 G/C 区域的变化外，C257L 基因出现了一系列突变。这些突变在不同传代中呈现出一定的规律性，且部分突变在已发表的 ASFV 菌株中从未出现过。研究人员推测，C257L 蛋白的突变可能在 ASFV-G-ΔI177L 毒力恢复过程中起主要作用。此外，研究还发现 C257L 基因对非洲猪瘟病毒的生命周期至关重要，敲除该基因的尝试以失败告终91011。
综合研究结果，研究人员得出结论：ASFV-G-ΔI177L 在水平或垂直传播过程中，基因型和表型均不稳定，是一种不安全的疫苗株。这一发现为非洲猪瘟疫苗的研发和应用敲响了警钟。在未来的疫苗研发中，必须更加重视疫苗株的安全性和稳定性评估，尤其是在怀孕动物中的安全性测试。同时，这也提醒养猪业从业者，在非洲猪瘟防控中，不能盲目依赖现有的疫苗，需要进一步探索更安全、有效的防控策略。只有这样，才能在与非洲猪瘟这场艰苦的战斗中取得胜利，保护养猪业的健康发展。
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