综述：促进基础卵泡生长的卵巢刺激新策略：开启生育希望之门

为解决传统卵巢刺激方法的局限，研究人员开展促进基础卵泡生长研究，发现多种干预措施可提高活产率，意义重大。

　　在生育领域，辅助生殖技术（ART）的发展为众多家庭带来了新希望，然而，传统的卵巢刺激方法却存在着诸多挑战。自试管婴儿（IVF）和胚胎移植（ET）技术诞生以来，各种卵巢刺激方法不断涌现，旨在提高妊娠率。但大多数方法依赖于对促性腺激素（Gn）的调节，通常在卵泡生长约 2 周、从周期性募集开始时进行干预，主要通过使用 Gn、GnRH 激动剂 / 拮抗剂、克罗米芬柠檬酸盐和 / 或芳香化酶抑制剂等药物。然而，人类卵泡生长需要 6 个多月，而周期性募集前的早期生长阶段尤为漫长，且许多旁分泌和自分泌因子在卵泡发育，特别是在周期性募集前起着重要作用，这使得传统方法难以精准作用于卵泡发育的关键早期阶段。

在临床实践中，卵巢储备功能不良和多囊卵巢综合征（PCOS）等情况较为常见，分别以血清抗苗勒管激素（AMH）浓度低和高为特征。这些情况会干扰通过传统卵巢刺激获得高质量卵子，因为 AMH 主要由周期性募集前的窦前和早期窦卵泡分泌，这表明相关卵巢功能障碍的主要原因可能在周期性募集前的卵泡发育过程中就已产生，传统的卵巢刺激方法对这些患者的疗效有限。因此，探索新的早期卵巢刺激方法，改善周期性募集前的卵泡发育，成为了生殖医学领域亟待解决的问题。

为了攻克这一难题，来自日本 Women’s Clinic Jinno 的 Masao Jinno 开展了一系列深入研究，相关成果发表在《Reproductive Biology and Endocrinology》上。

研究人员采用了多种研究方法来探索促进基础卵泡生长的策略。在临床试验方面，进行了多个前瞻性随机对照试验，招募了不同情况的不孕患者作为样本队列。例如在 G-CSF 启动（G-CSF priming）的研究中，招募了 100 名卵巢储备功能不良（AMH<2 ng/mL）、年龄在 20 - 42 岁的患者；在溴隐亭反跳法（bromocriptine-rebound method）的研究中，选取了内分泌正常、至少有一次长方案 ART 治疗失败的排卵女性。同时，还进行了回顾性分析，如对使用达那唑启动（danazol priming）的患者 ART 数据进行回顾。在实验技术上，运用了多种检测手段，包括测量血清 AMH、检测激素浓度、分析基因表达等，以评估不同干预措施对卵泡发育、胚胎质量和妊娠结局的影响。

早期卵泡发育的机制探索

研究人员首先对窦前和早期窦卵泡发育进行了详细的综述，明确了卵泡发育的过程，包括静止卵泡激活、基础卵泡生长、周期性募集和选择等阶段。基础卵泡生长从激活的静止卵泡开始，到周期性募集前的早期窦可选择卵泡结束，这一阶段不依赖于 Gn，但对其有反应。而后续的排卵阶段则依赖于 Gn。基础卵泡生长受 FSH 与局部自分泌 / 旁分泌因子相互作用的调节，还受到 Hippo 信号通路的限制。静止卵泡激活由卵泡内和局部环境的旁分泌信号以非促性腺激素依赖的方式调节，PI3K/AKT 和 mTOR 级联反应与 Hippo 通路之间的平衡起着关键作用。周期性募集和选择过程中，当卵泡生长为可选择的小窦卵泡（2 - 5mm）时，对 FSH 的周期性变化产生反应，且多个动物研究发现，在每个发情周期中存在多个卵泡波，人类也存在类似现象。选择是对募集的生长卵泡进行最终调整，使达到排卵数量，IGF 系统在这一过程中发挥关键作用。

促进基础卵泡生长的干预措施研究

1. G-CSF 启动：研究人员偶然发现，在传统卵巢刺激前给予 G-CSF（100μg 的 lenograstim），即 G-CSF 启动，可增加血清 AMH，改善胚胎质量和活产率。在一项前瞻性随机对照试验中，100 名卵巢储备功能不良的患者被随机分为 G-CSF 组和对照组。结果显示，G-CSF 组的受精率、胚胎发育、新鲜胚胎移植的着床率和卵母细胞发育能力均显著提高，临床和持续妊娠率也更高，累积活产率达到 32%，显著高于对照组的 14%。其作用机制可能与 G-CSF 直接对抗细胞凋亡、炎症和氧化，促进血管生成和生长，以及促进骨髓干细胞（BMSC）进入外周血，通过 BMSC 分泌的因子间接发挥作用有关。
2. 溴隐亭反跳法：研究发现，催乳素（PRL）在卵泡发育中起重要作用，适当水平的 PRL 对卵母细胞的正常生长和成熟至关重要。研究人员发现的溴隐亭反跳法，在长方案的基础上，从周期前的早期卵泡期（第 3 - 5 天）开始口服溴隐亭（2.5mg / 天），直至开始使用人绝经期促性腺激素（hMG）前 7 天。该方法显著改善了受精和胚胎发育，提高了妊娠和分娩率。其机制可能是，对于长方案治疗效果不佳的患者，可能存在卵泡 PRL 产生减少和 / 或颗粒细胞（GC）对 PRL 的受体后反应性降低，溴隐亭抑制垂体 PRL 产生，使小窦卵泡适应性增加卵泡 PRL 产生和 / 或 GC 对 PRL 的反应性，停药后血清 PRL 浓度反弹，增加垂体 PRL 供应，从而改善卵母细胞成熟。
3. 影响碳水化合物代谢的干预措施：胰岛素抵抗（IR）与不孕密切相关，AGE 与多种不孕原因有关。研究人员通过前瞻性随机对照试验发现，给予非 PCOS 且反复 ART 失败的患者低剂量二甲双胍（500mg / 天），当通过判别分数（DS）预测其有效时，可显著提高着床率和持续妊娠率。同时，研究还发现血清和卵泡液中有毒 AGE（TAGE）等与卵泡和胚胎发育呈显著负相关。给予水栗子提取物（Hishi extract）可降低血清和卵泡液中的 AGE，提高卵母细胞和胚胎的发育潜力，累积活产率显著提高。
4. 达那唑启动：达那唑是一种弱雄激素药物，研究人员回顾性分析了 113 名年龄较大、反复 ART 失败患者的资料，发现达那唑启动（200mg / 天，服用 6 周，随后直接进行 Kaufmann 周期和 ART）可显著提高日 2 胚胎、日 3 胚胎数量，提高囊胚获取率、临床妊娠率和活产率。其机制可能与改善胰岛素敏感性、增加肌肉量，或雄激素作用增强窦前 / 小窦卵泡生长，改善卵母细胞质量有关。

研究表明，调节基础卵泡生长可以提高活产率。G-CSF 启动、溴隐亭反跳法、影响碳水化合物代谢的干预措施以及达那唑启动等方法，为改善卵巢刺激效果、提高不孕患者的生育机会提供了新的策略。这些方法独立于 Gn 发挥作用，改善了周期性募集前的早期窦卵泡发育，尽管部分方法还可增强后期窦卵泡发育。然而，这些方法仍需要进一步的研究验证，以明确其长期安全性和有效性，以及最佳的使用方案。这一研究成果为生殖医学领域带来了新的希望，有望帮助更多对传统卵巢刺激方法耐药的患者实现生育梦想，也为基础研究人员和临床医生进一步探索窦前和早期窦卵泡刺激提供了重要的参考。