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为探究埃塞俄比亚鸡群新城疫(ND)发病原因,研究人员对新城疫病毒(NDV)进行研究,发现流行毒株为 VII.1.1 基因型,对防控有重要意义。
新城疫(Newcastle disease,ND)是一种严重危害家禽养殖业的传染病,给全球养禽业带来了巨大的经济损失。在埃塞俄比亚,家禽养殖是重要的蛋白质和收入来源,但却深受新城疫的困扰。自 1971 年首次报告以来,新城疫在埃塞俄比亚迅速传播并成为地方病,每年都有疫情爆发。虽然自 1974 年商业农场就开始进行 ND 疫苗接种,但接种疫苗的鸡群仍频繁爆发疫情,其原因尚不明确,可能与野毒株和疫苗株之间的抗原性差异有关。此外,埃塞俄比亚地理位置特殊,临近红海这一重要贸易路线,且与多个非洲国家接壤,家禽和野鸟的频繁流动增加了病毒传播的风险。因此,明确当前埃塞俄比亚流行的 NDV 基因型,对制定有效的防控策略至关重要。
为了解决这些问题,日本鸟取大学联合埃塞俄比亚动物健康研究所的研究人员 Berihun Dires Mihiretu、Tatsufumi Usui、Tesfaye Rufael Chibssa 和 Tsuyoshi Yamaguchi 开展了相关研究,研究成果发表在《Virology Journal》上。
研究人员采用了多种技术方法。首先是样本采集,从埃塞俄比亚五个不同地点的商业鸡场、后院鸡群以及活禽市场(LBM)采集了 231 份鸡的咽拭子和泄殖腔拭子样本。然后通过实时逆转录聚合酶链式反应(RRT-PCR)对样本进行 NDV 筛查,将 RRT-PCR 阳性样本接种到 9 - 11 日龄的鸡胚中进行病毒分离,并利用血凝试验(HA)检测病毒。接着,使用针对常用疫苗 Hitchner B1(HB1)的抗血清,通过血凝抑制试验(HI)和病毒中和试验(VN)检测病毒的抗原性。此外,研究人员还进行了热稳定性测试,评估病毒在 56°C 条件下的稳定性。同时,提取病毒 RNA 进行 cDNA 合成,扩增并测序部分 F 基因,通过系统发育分析确定病毒基因型。最后,选取代表性毒株进行平均死亡时间(MDT)测试,判断病毒的致病性。
研究结果如下:
- NDV 检测与分离:在 231 只鸡中,29 只(12.6%)通过 RRT-PCR 检测呈 NDV 阳性,成功从 25 只鸡中分离出病毒。未接种疫苗的后院鸡(Wolaita 地区)的检测率和分离率相对较高,分别为 17.3% 和 16%,高于接种疫苗的商业鸡群。
- 抗原性和热稳定性:HI 试验显示,25 株分离株与 HB1 疫苗株的抗原性存在显著差异,但 VN 试验表明,HB1 抗血清对现场分离株和疫苗株的中和效价相似,说明疫苗对这些分离株有保护作用。25 株分离株中,23 株的 HA 活性在 56°C 处理 5 分钟后即被破坏,仅有 2 株在 15 分钟后仍有 HA 活性,这 2 株被确定为热稳定株。
- F 基因核苷酸序列比较:24 株分离株的部分 F 基因(489bp)核苷酸相似性在 97% - 100% 之间,与厄立特里亚和伊朗的毒株亲缘关系较近,与之前在埃塞俄比亚分离的基因型 XXI 和 VII.1.1 毒株差异较大。
- NDV 分离株的致病性:所有分离株的 F 蛋白裂解位点均具有多个碱性氨基酸和 F117,表明为强毒株。7 株代表性分离株的 MDT 均小于 60 小时,属于速发型毒株。
- NDV 分离株的系统发育分析:基于部分 F 基因核苷酸序列的系统发育树显示,所有分离株均属于基因型 VII 的 VII.1.1 亚基因型,且与厄立特里亚和中东地区的毒株聚类在一起。
研究结论和讨论部分指出,本次研究中分离的所有强毒力 NDV 毒株均属于 VII.1.1 基因型。虽然 HI 试验显示现场分离株与疫苗株存在抗原性差异,但 VN 试验证实国内现有的经典疫苗仍能提供保护。然而,埃塞俄比亚接种疫苗的鸡群中仍频繁爆发 ND,其原因有待进一步研究,可能与疫苗失效、其他传染病导致的免疫抑制或卫生管理不善等因素有关。此外,热稳定毒株在环境中存活时间长,增加了病毒传播风险。研究还发现,埃塞俄比亚流行的 NDV 基因型已发生转变,当前流行的 VII.1.1 基因型可能通过家禽贸易从周边国家传入。这些研究结果对于制定埃塞俄比亚及整个东非地区的 ND 防控策略具有重要意义,有助于更有效地控制 ND 的传播,减少其对家禽养殖业的危害。