重新定位拉米夫定（LAM）：对抗铜绿假单胞菌的潜在新武器

为应对抗生素耐药问题，研究人员探究拉米夫定（LAM）对铜绿假单胞菌的作用，发现其有抗致病和抗群体感应（QS）活性，或可用于治疗感染。

　　# 拉米夫定：对抗铜绿假单胞菌感染的新希望？
在微观的细菌世界里，铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）可谓是臭名昭著的 “捣乱分子”。它能在各种环境中顽强生存，作为机会致病菌，常常趁人体免疫力下降时发动攻击，让艾滋病患者、癌症患者、严重烧伤患者以及囊性纤维化患者等群体深受其害 ，引发肺部、血液、尿路等多个身体系统的感染。更棘手的是，这家伙还练就了一身 “抗药本领”，对多种抗生素产生耐药性，其形成的生物膜就像一层坚固的 “铠甲”，把抗生素挡在外面，使得治疗困难重重。面对这一严峻的健康挑战，寻找新的治疗方法迫在眉睫。

在此背景下，来自沙特阿拉伯国王阿卜杜勒阿齐兹大学、埃及扎加济格大学等机构的研究人员开展了一项意义重大的研究，相关成果发表在《AMB Express》杂志上。他们把目光聚焦在拉米夫定（Lamivudine，LAM）这款药物上，试图探索它对铜绿假单胞菌的潜在作用。

研究人员在这项研究中运用了多种关键技术方法。首先是体外实验，通过肉汤微量稀释法测定 LAM 对铜绿假单胞菌 PAO1 标准菌株的最小抑菌浓度（MIC） ，以此确定后续实验中使用的亚抑菌浓度（sub - MIC）。同时，采用多种实验方法分别检测 LAM 对细菌生长、生物膜形成、群集运动、蛋白酶活性和绿脓菌素产生的影响。其次，在分子水平上，运用定量实时 PCR 技术评估 LAM 对群体感应（Quorum Sensing，QS）基因表达的影响；借助分子对接和分子动力学模拟技术，深入探究 LAM 与 QS 受体的结合能力和相互作用。最后，进行小鼠体内实验，验证 LAM 的抗致病活性，通过给小鼠注射铜绿假单胞菌和 LAM 处理后的细菌，观察小鼠的存活情况。

下面来看看具体的研究结果：

1. LAM 对 PAO1 生长的影响：研究发现，LAM 在 2.5mg/ml 时能抑制 PAO1 的生长，而实验选用的亚抑菌浓度（0.625mg/ml，即 ?MIC）对 PAO1 的生长没有显著影响，这为后续研究其抗毒力和抗 QS 活性排除了生长干扰因素。
2. 抗生物膜活性：通过生物膜抑制实验表明，LAM 对 PAO1 生物膜具有强大的抑制作用，可使生物膜形成减少 45%，有效削弱了细菌的 “防御堡垒”。
3. 抑制群集运动：群集运动实验显示，LAM 显著抑制了 PAO1 的群集运动，抑制率达到 50%，降低了细菌的扩散和感染能力。
4. 抗蛋白酶活性：在蛋白酶活性抑制实验中，LAM 处理后的 PAO1 蛋白酶活性明显降低，减少了 40%，降低了细菌对宿主组织的破坏能力。
5. 抑制绿脓菌素产生：绿脓菌素抑制实验表明，LAM 能使 PAO1 的绿脓菌素产生减少 36.67%，减轻了细菌对宿主细胞的损伤。
6. 下调 QS 基因表达：定量实时 PCR 结果显示，LAM 显著下调了 QS 基因 LasI、LasR、RhlI、PqsA 和 PqsR 的表达，下调幅度在 45.7% - 91.2% 之间，从基因层面抑制了细菌的群体感应系统。
7. 分子对接分析：分子对接研究发现，LAM 与 LasR、RhlR 和 PqsR 这三种 QS 受体具有较高的结合亲和力，结合能力甚至超过了正常配体，这表明 LAM 能够有效干扰 QS 信号传导。
8. 分子动力学模拟：模拟结果显示，LAM 与 QS 受体形成的复合物在模拟过程中表现出良好的稳定性，进一步证实了 LAM 与 QS 受体的结合效果和潜在的抗毒力活性。
9. 小鼠生存实验：在小鼠生存实验中，LAM 展现出强大的保护能力，使感染铜绿假单胞菌的小鼠存活率达到 100%，与未感染的阴性对照组相同，而未处理的 PAO1 则导致小鼠 100% 死亡。

综合上述研究，研究人员得出结论：LAM 具有显著的抗致病和抗 QS 活性，能够有效干扰铜绿假单胞菌的生物膜形成、群集运动，抑制毒力因子（如绿脓菌素和蛋白酶）的产生，并下调 QS 基因的表达。在体内实验中，LAM 也充分证明了其对小鼠的保护作用。这一研究成果意义非凡，为治疗耐药性铜绿假单胞菌感染提供了新的方向。LAM 有望与传统抗生素联合使用，成为治疗严重铜绿假单胞菌感染的辅助疗法，为解决抗生素耐药问题带来了新的希望。不过，研究人员也指出，在将 LAM 应用于临床之前，还需要进一步开展药理学和药学研究，以排除可能存在的副作用。