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为评估昆虫特异性黄病毒（ISFs）风险及影响，研究人员分离海南伊蚊黄病毒（AEFV），发现其对哺乳动物风险低，可抑制 ZIKV 和 DENV2 复制。
在奇妙的病毒世界里，蚊子就像一个个 “移动的病毒库”，它们能传播多种对人类健康危害极大的病毒。黄病毒（Flaviviruses）便是其中一类由蚊子等节肢动物传播的病毒，像登革病毒（DENV）、西尼罗河病毒（WNV）和寨卡病毒（ZIKV），一旦感染人类，就会引发各种严重的疾病，给人们的生活带来极大困扰。
除了这些臭名昭著的致病黄病毒，蚊子还携带一类特殊的病毒 —— 昆虫特异性黄病毒（ISFs）。这类病毒只在蚊子细胞中 “安营扎寨”，却不会在脊椎动物细胞里复制。伊蚊黄病毒（AEFV）作为 ISFs 的典型代表，在世界各地的野生伊蚊中广泛存在。但随着 ISFs 被越来越多地发现，人们心中的担忧也与日俱增：这些病毒会不会哪天突然 “变脸”，对人类健康发起攻击？它们又是否会影响那些致病黄病毒在蚊子中的传播，从而间接加大人类感染的风险呢？这些未知就像一团团迷雾，笼罩在科研人员心头。
为了拨开这团迷雾，来自中国科学院动物研究所、海南医学院等机构的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Parasites & Vectors》杂志上，为我们揭示了许多重要信息。
研究人员开展了一系列实验。首先，从中国海南岛五指山市采集的野生白纹伊蚊中，成功分离出一株 AEFV，命名为 AEFV 海南株。接着，运用荧光原位杂交（FISH）、定量聚合酶链反应（qPCR）等技术，对该病毒在不同蚊子和哺乳动物细胞系中的感染情况进行研究；通过对感染 AEFV 后再感染 ZIKV 或 DENV2 的蚊子进行检测，探究 AEFV 对致病黄病毒复制的影响及其免疫机制。
研究结果如下：
- AEFV 在海南岛蚊子中的分布：研究人员在海南岛 13 个县采集的 15 种蚊子样本里，仅在南部 5 个地区的白纹伊蚊中检测到 AEFV 片段，其中五指山的 AEFV 最为流行。通过基因测序和系统发育分析发现，AEFV 海南株与中国云南、泰国和秘鲁的毒株在基因上较为相似，它们似乎都起源于印度尼西亚的 AEFV 毒株。
- AEFV 海南株的蚊子宿主范围：利用碘克沙醇密度梯度超速离心法分离出的 AEFV 海南株，在电子显微镜下呈圆形，直径约 40 - 50nm。它能在白纹伊蚊 C6/36 细胞中引发明显的细胞病变效应（CPE），使细胞出现肿胀、融合、空泡化等现象。进一步研究发现，该毒株可感染白纹伊蚊和埃及伊蚊，但无法感染致倦库蚊。在细胞实验中，AEFV 在 Aag2 和 Cxq-1 细胞中的感染效率和复制能力有限，在致倦库蚊 Cxq-1 细胞中，甚至无法进入细胞。
- AEFV 海南株对哺乳动物细胞的感染风险：研究人员用 AEFV 海南株感染仓鼠肾（BHK - 21）、非洲绿猴肾（Vero）、人肾上皮（293T）和人宫颈癌细胞（HeLa）这四种哺乳动物细胞。结果显示，病毒在这些细胞中的滴度随时间显著下降，且大多无法进入细胞，这表明 AEFV 海南株对这四种哺乳动物细胞的感染风险很低。
- AEFV 对致病虫媒病毒在白纹伊蚊中复制的影响：白纹伊蚊是 ZIKV 和 DENV2 的主要传播媒介。研究人员给白纹伊蚊注射 AEFV 海南株，5 天后让蚊子吸食含有 ZIKV 或 DENV2 的血液。相对 qPCR 检测发现，AEFV 的存在会抑制 ZIKV 和 DENV2 在白纹伊蚊体内的复制，但对这两种病毒在蚊子唾液腺中的传播影响有限。
- AEFV 激活白纹伊蚊的抗病毒反应：Janus 激酶 / 信号转导与转录激活因子（JAK - STAT）、Toll 和 RNA 干扰（RNAi）通路在伊蚊抵御 ZIKV 和 DENV 感染时发挥着重要的抗病毒作用。研究人员检测了这些通路中相关蛋白的表达变化，发现 AEFV 感染可激活 JAK - STAT 和 RNAi 通路，抑制 ZIKV 和 DENV2 的复制。
综合研究结论和讨论部分，AEFV 海南株虽然能在伊蚊中复制，但对哺乳动物细胞的感染风险较低。更重要的是，它能通过激活伊蚊的抗病毒反应，抑制 ZIKV 和 DENV2 等致病黄病毒在伊蚊中的复制。这意味着 AEFV 有望成为一种免疫诱导剂，在病毒病爆发时，降低伊蚊传播致病黄病毒的能力，为防控蚊媒传播疾病提供了新的思路和潜在方法。这一研究成果就像一盏明灯，为后续相关研究和疾病防控指引了方向，具有重要的理论和实践意义。
研究人员在研究过程中，主要使用了以下关键技术方法：
- 病毒分离与培养：从野生白纹伊蚊中分离 AEFV 海南株，并在不同细胞系中进行培养。
- 核酸检测技术：运用荧光原位杂交（FISH）和定量聚合酶链反应（qPCR），检测病毒感染情况和基因表达水平。
- 病毒感染实验：对蚊子和细胞进行 AEFV 感染，以及后续与致病黄病毒的共感染实验。
- 基因测序与分析：测定 AEFV 基因组序列，进行序列比对和系统发育分析。
