犬类抗癌新突破：抗 PD-L1 抗体展现卓越疗效

为治疗犬类癌症，研究人员开发抗 PD-L1 抗体，发现抗体 #15 效果显著，有望用于临床。

　　《犬类抗癌新突破：抗 PD-L1 抗体展现卓越疗效》

在动物的世界里，癌症同样是一个可怕的 “杀手”，尤其是对于人类的忠诚伙伴 —— 狗狗们。癌症在犬类中十分常见，每年新增病例超四百万，是导致狗狗疾病相关死亡的主要原因。淋巴瘤、骨肉瘤、肥大细胞瘤等多种肿瘤困扰着狗狗们的健康。传统的治疗手段，像手术、放疗和化疗，不仅存在损伤正常细胞、疗效有限的问题，还会让狗狗们承受呕吐、食欲不振、疲劳等副作用的折磨。

随着人们对宠物健康的关注度不断提高，寻找更有效的癌症治疗方法迫在眉睫。在此背景下，免疫治疗成为了研究的热点方向。其中，针对程序性死亡受体 1（PD-1）/ 程序性死亡配体 1（PD-L1）通路的免疫治疗，在人类癌症治疗中展现出了巨大的潜力，也为犬类癌症治疗带来了新的希望。然而，目前尚无专门用于治疗犬类癌症的 PD-L1 抗体，这一空白严重限制了犬类癌症免疫治疗的发展。

为了填补这一空白，韩国江原国立大学（Kangwon National University）和全南国立大学（Chonnam National University）的研究人员展开了深入研究。他们致力于开发针对犬类 PD-L1 的特异性抗体，期望为犬类癌症治疗提供新的有效手段。经过不懈努力，研究取得了重要成果，相关论文发表在《Scientific Reports》上。

研究人员在这项研究中主要运用了以下关键技术方法：

1. 噬菌体展示技术：利用合成抗体库，通过噬菌体展示筛选出能与犬类 PD-L1 结合的单链可变片段（scFv）克隆，这是筛选特异性抗体的核心技术。
2. 细胞培养与转染技术：培养犬类骨肉瘤细胞系 D17 和 HEK-293F 细胞，并对 FreeStyle 293-F 细胞进行转染，用于后续的抗体表达和功能研究。
3. 动物实验模型：使用 NOG 小鼠建立犬类骨肉瘤异种移植模型，在体内评估抗体的治疗效果。

下面来看看具体的研究结果：

1. 发现特异性结合犬类 PD-L1 的抗体：研究人员通过噬菌体展示技术，从合成的 scFv 库中筛选出 18 个高亲和力且热稳定的 scFv 克隆，这些克隆能特异性结合犬类 PD-L1。
2. 筛选功能性 scFvs：利用竞争 ELISA 实验，验证了部分 scFv 能有效抑制犬类 PD-L1 与人类 PD-1 的结合，表明这些 scFv 具有潜在的治疗功能。
3. 犬类 PD-L1 特异性 scFv 衍生 IgGs 的功能验证：将 5 个优先级较高的 scFv 克隆转化为 IgG 形式，其中克隆 #8 和 #15 对犬类 PD-L1 表现出较强的结合能力，被选择进行进一步分析。
4. 犬类 PD-L1 特异性抗体的疗效：混合淋巴细胞反应实验显示，抗体 #8 和 #15 能显著促进犬类外周血单个核细胞（PBMCs）的增殖，且抗体 #15 的半数最大有效浓度（EC₅₀）更低，疗效优于对照抗体阿替利珠单抗（atezolizumab）。
5. 所选抗体对犬类骨肉瘤的抗肿瘤作用：在 NOG 小鼠异种移植模型中，抗体 #15 显著减小了肿瘤体积，促进了淋巴细胞浸润和肿瘤细胞凋亡，展现出强大的抗肿瘤效果。

研究结论和讨论部分表明，该研究成功开发出能结合犬类和人类 PD-L1 的抗 PD-L1 抗体，尤其是抗体 #15，在体内外实验中均展现出优异的抗肿瘤效果。这一成果为犬类癌症免疫治疗提供了新的候选药物，有望改善犬类癌症的治疗效果，提高患癌狗狗的生活质量。同时，由于犬类癌症与人类癌症在多个方面具有相似性，该研究也为人类癌症治疗提供了有价值的参考。不过，研究也存在一定的局限性，如小鼠模型不能完全模拟犬类免疫系统，犬类肿瘤微环境复杂，单一靶点治疗可能存在不足等。未来需要开展更多的犬类临床试验，探索联合治疗方案，以进一步验证和提升抗 PD-L1 抗体的治疗效果。总的来说，这项研究是犬类癌症免疫治疗领域的重要进展，为后续的研究和临床应用奠定了坚实基础。