电针镇痛新机制：CB1受体介导抑制 RVM 区 GABA 能神经元

为探究电针（EA）镇痛机制，研究人员经实验发现 EA 通过 CB1受体抑制 RVM 区 GABARVM神经元镇痛，意义重大。

　　在生活中，疼痛就像一个不速之客，时常困扰着人们。急性疼痛能提醒身体避免伤害，可要是它 “赖着不走”，发展成慢性疼痛，那麻烦就大了。慢性疼痛不仅会让患者情绪低落、睡眠变差、饮食不香，还严重影响社交，给心理带来沉重负担。据统计，全球超 30% 的人都深受慢性疼痛的折磨，然而现有的药物治疗效果有限，还常伴有各种副作用。在这样的困境下，针灸这一中国传统疗法脱颖而出。世界卫生组织认可其对 77 种疾病的治疗作用，尤其是在疼痛管理方面表现突出。电针（Electroacupuncture，EA）作为针灸的改良形式，结合了传统针灸技术和微弱电流，能有效缓解急慢性疼痛，因其安全性高、副作用小而被广泛应用。但尴尬的是，电针的镇痛机制却一直没有完全弄清楚，这大大限制了它的进一步推广和最佳治疗方案的制定。

为了揭开电针镇痛的神秘面纱，华中科技大学同济医学院等机构的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Chinese Medicine》杂志上。这项研究意义非凡，它为电针镇痛找到了新的作用机制，有助于开发新的策略来改善临床疼痛治疗。

研究人员在本次研究中用到了多种关键技术方法。首先，通过构建炎症性疼痛模型（由完全弗氏佐剂（Complete Freund’s adjuvant，CFA）诱导）和神经性疼痛模型（由慢性压迫性损伤（Chronic constrictive injury，CCI）诱导）来模拟疼痛状态。其次，运用原位杂交技术，检测相关基因的表达情况；采用化学遗传学方法，精准调控神经元的活动；利用在体小鼠钙成像技术，实时监测神经元内钙离子的活动；借助在体电生理记录技术，记录神经元的电活动变化 。

下面来看看具体的研究结果：

• 电针的镇痛及缓解负面情绪作用：研究人员在 CFA 或 CCI 处理后的小鼠上进行实验，对其患侧 “足三里”（ST36）穴位进行电针治疗（0.5 mA/10 Hz，每天 30 分钟）。行为学评估发现，CFA 和 CCI 处理会使小鼠对 von Frey 和热刺激的爪退缩阈值显著降低，而电针治疗能在 CFA 处理后第 4 - 5 天、CCI 处理后第 9 - 11 天显著提高小鼠的触觉退缩阈值和热退缩潜伏期，缓解疼痛。此外，条件性位置偏好（Conditioned place preference，CPP）实验表明，电针还能增加 CFA 或 CCI 处理小鼠在与电针治疗匹配的实验箱中的停留时间，提高 CPP 评分，减轻疼痛引起的负面情绪。
• 电针抑制 GABA^RVM神经元活动：为了探究 GABA^RVM神经元活动与疼痛超敏及电针治疗效果的关系，研究人员采用了原位杂交、在体钙成像和在体电生理技术。RNAscope 原位杂交显示，CFA 和 CCI 小鼠 RVM 区 c-Fos 阳性细胞数显著增加，电针治疗虽对 c-Fos 阳性细胞总数无影响，但能使 c-Fos 阳性的 GABA 能神经元数量明显减少。在体钙成像发现，CFA 和 CCI 处理使 GABA^RVM神经元的 GCaMP 信号显著增强，电针治疗则使其明显降低。在体电生理记录表明，伤害性刺激会增加对照组小鼠 GABA^RVM神经元的放电频率，CFA 和 CCI 处理进一步升高其放电频率，而电针治疗可降低 CFA 或 CCI 处理小鼠 GABA^RVM神经元的放电活动。这些结果表明，电针能抑制由组织炎症和神经损伤引起的 GABA^RVM神经元活动增强。
• 抑制 GABA^RVM神经元缓解疼痛超敏：研究人员向 Vgat-ires-cre 小鼠的 RVM 区注射 AAV-DIO-mCherry-hM4Di 病毒，以评估 GABA^RVM神经元活动在疼痛超敏中的作用。行为学评估显示，在 CFA 注射后第 1 - 2 天或 CCI 诱导后第 5 - 7 天，小鼠的触觉退缩阈值和热爪退缩潜伏期明显降低；化学遗传学抑制 GABA^RVM神经元后，小鼠对 von Frey 刺激的触觉退缩阈值升高，对热刺激的爪退缩潜伏期延长；在 CNO 洗脱 2.5 小时后，这些指标又恢复到基线水平。这表明增加的 GABA^RVM神经元活动介导了炎症和神经损伤诱导的疼痛超敏。
• 激活 GABA^RVM神经元抵消电针镇痛效果：研究人员向 Vgat-ires-Cre 小鼠的 RVM 区注射 AAV-DIO-hM3Dq-mCherry 病毒，观察 GABA^RVM神经元激活对电针镇痛的影响。行为学测试表明，电针治疗 2 - 3 天后，CFA 和 CCI 处理的小鼠触觉退缩阈值和热退缩潜伏期显著增加；而化学遗传学激活 GABA^RVM神经元则抑制了电针对这些指标的影响；在 CNO 洗脱 2.5 小时后，触觉退缩阈值和热退缩潜伏期又恢复到基线水平。这说明激活 GABA^RVM神经元会抵消电针的镇痛效果。
• 敲低 GABA^RVM神经元上的 CB₁R 拮抗电针的镇痛和缓解负面情绪作用：为探究 CB₁受体（Cannabinoid Type 1 Receptors，CB₁R）在电针镇痛中的作用，研究人员向 CB₁R^flox/flox小鼠的 RVM 区注射 rAAV-mDIx-cre-EYFP 病毒，选择性降低 GABA^RVM神经元上 CB₁R 的表达。CPP 实验显示，敲低 CB₁R 拮抗了电针诱导的条件性位置偏好；von Frey 和热板实验表明，敲低 CB₁R 抑制了电针对 CFA 和 CCI 处理小鼠的镇痛作用。此外，敲低 CB₁R 对小鼠的运动和焦虑水平无影响。

综合研究结论和讨论部分内容，本次研究首次揭示电针通过抑制 RVM 区的 GABA 能神经元产生镇痛作用。在炎症性和神经性疼痛小鼠模型中，电针降低了 GABA 能神经元的 c-Fos 表达、神经元钙内流和放电。化学遗传学抑制 GABA^RVM神经元可减轻疼痛超敏，激活 GABA^RVM神经元则会导致正常小鼠疼痛超敏，并抑制电针在炎症性和神经性疼痛模型中的镇痛效果。此外，敲除 GABA^RVM神经元上的 CB₁R 会拮抗电针的镇痛和缓解负面情绪的作用。这表明 CB₁R 介导的对 GABA^RVM神经元的抑制可能是电针镇痛的重要机制。该研究为针灸镇痛提供了新的机制，也为后续开发更有效的疼痛治疗策略奠定了基础，有望推动临床疼痛管理的发展。