印度塔尔沙漠濒危物种 Calligonum polygonoides 高效微繁殖技术研究

为保护印度塔尔沙漠濒危物种 Calligonum polygonoides，研究人员开发出高效微繁殖协议，意义重大。

　　Calligonum polygonoides 是印度塔尔沙漠中的一种木本、濒危且关键的物种。本研究首次报道了针对该物种的高效快速微繁殖方案。研究发现，春季采集的成熟植株上中等直径的节间茎段最适合用于建立无菌培养。在添加了 3.0mg/L 6 - 苄氨基腺嘌呤（6-benzyleaminopurine，BAP）的 Murashige 和 Skoog（MS）培养基上，约 80% 的外植体在体外出现腋芽萌发。通过优化母外植体的连续转接、营养培养基、外源应用植物生长调节剂（plant growth mediators，PGRs）的类型和浓度，提高了芽的增殖频率。在改良的 Murashige 和 Skoog 培养基（modified murashige and skoog medium，MMS）上，观察到最佳的芽增殖数（115.33±10.10）和平均长度（7.57±0.52cm），该 MMS 培养基含有双倍强度的大量元素盐（CaCl₂·2H₂O、KH₂PO₄和 MgSO₄·7H₂O），并添加了 0.25mg/L BAP、0.25mg/L 激动素（kinetin，KN）和 0.025mg/L 吲哚 - 3 - 乙酸（indole-3-acetic acid，IAA）。体外再生的芽在添加了 0.1mg/L 吲哚 - 3 - 丁酸（indole-3-butyric acid，IBA）的全强度 MS 培养基上生根。茎解剖结构的对比分析显示，在体外条件下机械组织发生了分化，这表明小植株在自然环境中的生存能力。此外，利用起始密码子靶向标记和简单序列重复区间标记对遗传同质性进行验证，结果显示在所有 15 株微繁殖植株以及母株中，单态性达到 95.93%。较高的单态性条带模式证明了这种针对 Calligonum polygonoides 微繁殖系统的可靠性。因此，该讨论的方案可用于优良基因型的大规模繁殖和保护。