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为解决家兔诱导排卵问题,研究人员探索微囊化 rrBNGF 诱导排卵效果,发现其对未产母兔有效,意义重大。
家兔作为诱导排卵的动物,其排卵过程颇为独特。在自然交配时,母兔需要特定的机械和神经内分泌信号刺激,才能促使垂体释放促黄体生成素(LH),进而触发排卵。而在养殖场中,人工授精(AI)是常用的繁殖管理手段,但缺乏自然交配的刺激,就需要借助外源性激素来诱导排卵。目前,肌肉注射促性腺激素释放激素(GnRH)类似物是诱导家兔排卵的常见方法,不过这种方式存在一些弊端。一方面,它给兔子带来了额外的应激,不利于动物福利;另一方面,对于非性接受状态的母兔,使用该方法的繁殖效果不佳。同时,一些研究尝试通过阴道给药的方式来替代肌肉注射,却面临着诸如药物吸收受性接受程度影响、精子浓度和给药时间会干扰激素用量等问题。此外,精液中的一些成分也可能影响药物效果。基于这些现状,西班牙马德里理工大学等机构的研究人员开展了一项关于利用微囊化重组兔 β 神经生长因子(rrBNGF)诱导家兔排卵的研究。该研究成果发表在《BMC Veterinary Research》杂志上,为家兔繁殖领域带来了新的思路。
研究人员在此次研究中主要运用了细胞培养、精液分析和动物实验这几种关键技术方法。在细胞培养方面,选用商业 PC12 细胞系进行体外培养,以探究微囊化 rrBNGF 对细胞分化和活力的影响;精液分析则是通过添加空微胶囊,观察其对精液活力、运动性和获能状态的作用;动物实验选取了新西兰白兔与加利福尼亚兔杂交的未产(4 个月大)和经产(4 - 5 次分娩)成年母兔,随机分组后进行不同处理,以此来评估微囊化 rrBNGF 诱导排卵的效果。
下面来看具体的研究结果:
- rrBNGF 的体外评估:通过对 PC12 细胞的形态和活力分析发现,确定 50 ng/mL 的 rrBNGF 为促进细胞分化的最佳剂量,且不影响细胞活力。实验表明,微囊化 rrBNGF(Micro - NGF 组)和游离 rrBNGF(Micro - empty + NGF 组)都能促进 PC12 细胞向神经表型分化,且各组细胞活力相似。这说明微囊化 rrBNGF 在体外具有良好的生物活性,且不会对细胞产生毒性12。
- 与壳聚糖微胶囊共孵育的精液分析:研究发现,空壳聚糖微胶囊对精子活力、总运动性和前向运动性没有负面影响,但随着孵育时间增加,精子运动性和活力会降低。此外,壳聚糖微胶囊对精子获能状态也没有显著影响。这表明壳聚糖微胶囊不会干扰精液的基本特性,为其在体内应用提供了一定的可行性3。
- 壳聚糖微囊化 rrBNGF 对家兔诱导排卵的影响:在未产母兔实验中,不同处理组的排卵率相似,NGFch - 30 组和 GnRH 组的妊娠率显著高于 NGFch - 0 组,且各组的产仔数相似。在经产母兔实验中,GnRH 组的排卵率和妊娠率最高,NGFch - 30 组和 NGFch - 0 组的排卵率和妊娠率较低。同时,机械刺激(如使用空导管或含精液的导管)也能诱导一定比例的母兔排卵45。
综合研究结果和讨论部分来看,此次研究意义非凡。一方面,验证了微囊化 rrBNGF 在体外对 PC12 细胞和精子的安全性和有效性;另一方面,发现微囊化 rrBNGF 在诱导未产母兔排卵方面,效果与 GnRH 注射相似,但在经产母兔中效果不佳。此外,研究还表明机械刺激在家兔排卵诱导中起着重要作用,这为后续研究提供了新的方向。不过,研究也存在一些需要进一步探讨的地方,例如需要明确母兔性接受状态在排卵诱导中的具体机制,以及如何优化微囊化 rrBNGF 的使用方法,以提高其在经产母兔中的排卵诱导效果。这项研究为家兔繁殖技术的改进提供了重要的理论依据和实践参考,有望推动家兔养殖产业的发展。
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