ALKBH1 与 PSMD14：子痫前期治疗的新希望

研究人员针对子痫前期（PE）开展 ALKBH1 介导的 m5C 修饰研究，发现相关调控机制，为 PE 治疗提供新靶点。

　　子痫前期（Preeclampsia，PE）是一种严重影响母婴健康的妊娠期疾病，常常在孕妇妊娠 20 周后出现高血压、蛋白尿等症状。在中国，PE 的发病率约为 9.4% - 10.4%，它极大地增加了不良妊娠结局的风险，严重时甚至会导致孕产妇和新生儿死亡。目前，虽然对 PE 发病机制的研究涉及胎盘因素、遗传因素、免疫因素等多个方面，但这些理论仍无法完全解释其具体病因。

研究发现，滋养层细胞的侵袭和生长不足会影响胎盘植入和灌注，这可能是 PE 孕妇一系列临床症状的重要原因。因此，探索影响滋养层细胞增殖和侵袭的分子调控机制，对 PE 的靶向分子治疗意义重大。5 - 甲基胞嘧啶（m⁵C）甲基化修饰是一种在 DNA 或 RNA 的胞嘧啶环第 5 位碳原子上连接甲基的可逆性表观遗传修饰，近年来研究发现它参与多种疾病的调控，但在 PE 等妊娠相关疾病方面的研究较少。其中，ALKBH1（adeno-associated virus encoding alkB homolog 1）作为 m⁵C 修饰中的去甲基化酶，在 PE 研究中尚未见报道。另外，PSMD14（Proteasome 26S subunit, non - ATPase 14）在 PE 患者中表达降低，但其是否受 ALKBH1 介导的 m⁵C 修饰调控还不清楚。

为了深入探究这些问题，郑州大学第三附属医院（河南省妇幼保健院）的研究人员开展了相关研究。他们以缺氧处理的人外渗滋养层细胞（HTR-8/SVneo）模拟 PE 的发生，研究 ALKBH1 介导的 PSMD14 的 m⁵C 修饰对 HTR-8/SVneo 细胞生长、迁移和侵袭能力的调控作用。该研究成果发表在《Scientific Reports》上，为 PE 的治疗提供了新的潜在靶点和理论依据。

研究人员在此次研究中用到了多种关键技术方法。细胞实验方面，进行细胞培养与处理，将 HTR-8/SVneo 细胞分为缺氧处理组和对照组；同时进行细胞转染，以干扰相关基因表达。检测分析技术上，运用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测基因表达量，蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测蛋白水平，Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力，m⁵C Dot blot assay 检测 m⁵C 水平，M5C 甲基化 RNA 免疫沉淀测定（M5C MeRIP assay）分析 PSMD14 的 m⁵C 水平，RNA 结合蛋白免疫沉淀（RIP）和双荧光素酶报告基因检测（Dual-luciferase reporter assay）验证分子间的相互作用。

研究结果如下：

• ALKBH1 在缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞中上调：研究人员通过对缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞进行 m⁵C RNA 修饰相关基因表达分析，发现 ALKBH1 表达显著增加。RT-qPCR 和 Western blot 检测进一步证实，缺氧处理后 HTR-8/SVneo 细胞中 ALKBH1 的 mRNA 和蛋白表达均升高。
• ALKBH1 敲低促进缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞生长、迁移和侵袭：转染 shALKBH1 沉默 ALKBH1 表达后，发现细胞中 m⁵C 水平、细胞活力、迁移和侵袭能力均显著增加，表明 ALKBH1 敲低能缓解缺氧对细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用。
• ALKBH1 通过 m⁵C 修饰与 PSMD14 相互作用：通过蛋白质 - 蛋白质相互作用（PPI）网络分析，发现 PSMD14 是 ALKBH1 调控的关键基因之一。研究显示，缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞中 PSMD14 的蛋白和 mRNA 水平降低，ALKBH1 敲低后其水平升高，且 PSMD14 的 m⁵C 水平也发生相应变化。RIP 实验证实 ALKBH1 与 PSMD14 存在相互作用，双荧光素酶报告基因检测表明 ALKBH1 通过调节 PSMD14 基因 147 位点的 m⁵C 水平调控其表达，同时 ALKBH1 敲低会 PS 降低 MD14 的 mRNA 稳定性。
• PSMD14 敲低逆转 ALKBH1 沉默对缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞的作用：同时敲除 ALKBH1 和 PSMD14 后发现，PSMD14 敲低能显著降低细胞活力、迁移和侵袭能力，说明 PSMD14 敲低可逆转 ALKBH1 沉默对缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞的促进作用。

研究结论与讨论部分指出，滋养层细胞功能异常与 PE 发病机制密切相关，缺氧诱导的滋养层细胞侵袭和生长不足可能是 PE 进展的关键因素。该研究表明，ALKBH1 敲低通过增强 PSMD14 的 m⁵C 水平，促进缺氧处理的 HTR-8/SVneo 细胞的生长、迁移和侵袭。这揭示了 ALKBH1 和 PSMD14 在 PE 发病机制中的重要作用，它们可能成为 PE 治疗的潜在靶点。不过，该研究也存在局限性，即缺乏公开患者数据集的验证。后续研究人员计划寻找合适的患者数据集或与临床合作收集样本，进一步在临床相关背景下验证研究结果，推动研究成果向临床诊断和治疗策略转化。