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为解决次氯酸盐消毒效力不一致问题,研究人员探究其在不同 pH 下对芽孢杆菌的消毒效果,发现 pH 9.5 为最佳平衡点,对优化消毒策略意义重大。
在食品行业和医疗领域,细菌芽孢污染一直是令人头疼的大难题。芽孢杆菌属的污染不仅会导致食源性疾病爆发,还会因产品变质造成严重经济损失;在医院环境中,芽孢污染更是可能引发如艰难梭菌感染等严重疾病,在发展中国家,手术设备被芽孢污染甚至会危及患者生命。因此,有效对芽孢污染的表面进行消毒,成为保障公众健康和食品安全的关键。
次氯酸钠(NaOCl)作为常见家用漂白剂和医院消毒剂的有效成分,是全球广泛使用的消毒剂之一。它能通过释放氯,对包括细菌芽孢在内的生物物质进行降解。然而,次氯酸盐对芽孢的消毒效果在不同研究中差异巨大。在中性或低 pH 环境下,次氯酸盐虽能因形成次氯酸(HOCl)而具备杀菌能力,但具体的最佳条件以及 pH 在消毒过程中的具体作用并不明确,而且低 pH 环境还会增加溶液腐蚀性、缩短货架期。同时,由于不同研究在实验方法上的差异,使得次氯酸盐消毒效果的相关数据缺乏一致性,难以直接对比,这也导致人们对芽孢灭活的精确机制以及 pH 对次氯酸盐杀菌活性的影响了解有限。
为了解决这些问题,来自瑞典于默奥大学、挪威生命科学大学等机构的研究人员 Timir Baran Sil、Dmitry Malyshev 等人开展了相关研究。他们的研究成果发表在《BMC Microbiology》杂志上,为优化次氯酸盐消毒策略提供了重要依据。
研究人员在此次研究中主要运用了以下关键技术方法:一是通过调整次氯酸钠溶液的 pH,模拟常见的表面消毒操作,研究不同 pH 条件下次氯酸盐对芽孢的消毒效果;二是采用 Raman 光谱技术,监测次氯酸盐在不同 pH 下离子状态的变化,探究消毒效果变化的化学机制;三是利用荧光成像技术,以 Thioflavin T(ThT)作为芽孢通透性标记,观察芽孢在不同 pH 次氯酸盐处理后的变化。
研究结果如下:
- 次氯酸盐杀菌效率在 pH 9.5 - 11.0 间急剧变化:研究人员用 5000 ppm 的次氯酸盐溶液在 pH 7.0 - 12.0 的范围内处理芽孢 10 分钟。结果显示,当 pH 在 11.0 - 12.0 时,次氯酸盐几乎无法杀灭芽孢;而在 pH 11.0 - 9.5 之间,杀菌效率显著提升,芽孢的菌落形成单位(CFU)大幅下降,实现了 4.1-log 的减少;在 pH 7.3 时,芽孢活力进一步降低,又额外实现了 0.9-log 的减少。
- pH 对次氯酸盐化学性质和货架期的影响:次氯酸盐在高 pH 时以 ClO-形式存在,中性 pH 时以 HOCl 形式存在。研究人员通过 Raman 光谱确定了次氯酸盐离子状态转变的 pKa值为 7.6±0.05。他们还发现,低 pH 虽能增强杀菌效果,但会严重影响次氯酸盐溶液的货架期。当溶液初始 pH 在 8.9 及以上时,24 小时内 pH 无明显变化;而初始 pH 为 8.0 及以下时,pH 会迅速呈指数下降,最终稳定在约 pH 4.5。
- 低 pH 次氯酸盐增加芽孢通透性和 CaDPA 释放:通过 Raman 光谱分析发现,随着次氯酸盐 pH 降低,与芽孢中 CaDPA 相关的 Raman 峰强度下降,表明 CaDPA 释放增加。同时,用 ThT 作为芽孢通透性标记进行荧光成像检测发现,降低 NaOCl 溶液的 pH 会使芽孢对 ThT 的通透性增加,更多 ThT 分子进入芽孢,导致荧光强度增强。
在研究结论和讨论部分,研究明确了 pH、次氯酸盐杀菌效力和货架期之间的复杂关系。pH 9.5 是一个关键平衡点,在此 pH 下,次氯酸盐既能实现高效杀菌,对蜡状芽孢杆菌芽孢的活力可实现 4-log 的降低,又能保证溶液有相对合理的货架期,比之前建议的 pH 7.0 - 8.0 范围更具优势。这一发现对食品行业和医疗机构意义重大,为这些场所制定更有效、稳定和可持续的消毒策略提供了理论基础,有助于控制芽孢杆菌污染,提升高风险环境中的安全性和卫生水平。但在实际应用中,还需考虑有机污染物对低 ppm、pH 调节后的次氯酸盐溶液的影响,避免溶液因中和而低于消毒阈值。
总的来说,这项研究深入揭示了次氯酸盐消毒的关键影响因素,为优化消毒流程、保障公共健康提供了有力支持。不过,未来还需进一步研究在复杂实际环境中,如何更好地应用这些发现,以确保消毒效果的稳定性和可靠性。