circ_0001103：治疗视网膜下纤维化的新希望

为探究巨噬细胞向肌成纤维细胞转化（MMT）在视网膜下纤维化形成中的作用，研究人员对 circ_0001103 展开研究，发现其可调节 MMT 和视网膜下纤维化，为治疗提供新方向。

　　在眼科疾病的领域中，年龄相关性黄斑变性（AMD）就像一个隐藏在暗处的 “视力杀手”，悄无声息地威胁着众多中老年人的视力健康。它是导致 55 岁以上人群不可逆失明的主要原因。据预测，到 2050 年，早期和晚期 AMD 患者的新增病例数将分别达到 3905 万和 641 万 。AMD 主要分为非新生血管性 AMD 和新生血管性 AMD 两种类型，其中新生血管性 AMD 又以脉络膜新生血管（CNV）为主要特征，是造成 AMD 患者视力丧失的主要亚型。目前，针对新生血管性 AMD 的一线治疗方法是靶向血管内皮生长因子（VEGF），然而，这种治疗方法却无法阻止视网膜下纤维化的进展。视网膜下纤维化不仅是影响新生血管性 AMD 治疗效果和患者视觉预后的主要因素，而且如果新生血管性 AMD 得不到及时治疗，CNV 还会逐渐发展为视网膜下纤维化，最终导致失明。更为棘手的是，临床观察发现，在反复注射抗 VEGF 药物后，约 50% 的患者会出现视网膜下纤维化和瘢痕形成，严重损害视力。因此，探索视网膜下纤维化形成的关键机制，寻找有效的干预措施，对于改善患者的视觉功能具有重要的临床意义。

为了攻克这一难题，皖南医学院第一附属医院（弋矶山医院）等单位的研究人员开展了一项关于视网膜下纤维化的研究，相关成果发表在《Journal of Translational Medicine》上。

研究人员采用了多种关键技术方法来开展研究。首先是构建动物模型，通过激光诱导 C57BL/6J 小鼠形成视网膜下纤维化和 CNV 模型；细胞实验方面，利用 TGF-β1 诱导 RAW264.7 巨噬细胞发生 MMT；实验检测技术上，运用定量实时 PCR（qRT-PCR）、蛋白质免疫印迹法（Western blotting）、免疫组化（Immunohistochemistry）、荧光原位杂交（FISH）、双荧光素酶报告基因检测（Luciferase reporter assay） 等多种技术，从基因、蛋白等多个层面检测相关指标的变化。

研究结果如下：

• circRNA 表达谱分析：研究人员建立激光诱导的小鼠 CNV 模型后，通过基因芯片分析，发现了 58 种在 CNV 小鼠视网膜色素上皮 - 脉络膜 - 巩膜复合体中显著差异表达的 circRNA（变化倍数 > 2.0，p<0.01）。随机选取 12 种失调的 circRNA 进行 qRT-PCR 分析，验证了基因芯片数据的可靠性和可重复性。
• circ_0001103 的表达及稳定性：研究发现，TGF-β1 刺激 RAW264.7 巨噬细胞诱导 MMT 后，MMT 的标志物 α -SMA 表达显著增加，circ_0001103 的表达也随之增加，且 circ_0001103 主要在 MMT 的细胞质中表达。经 RNase R 处理后发现，circ_0001103 对 RNase R 消化具有抗性，稳定性良好。在激光诱导后的不同时间点检测发现，circ_0001103 在 CNV 病变中的表达显著高于正常组织。
• circ_0001103 对 MMT 的调节作用：体外实验设计针对 circ_0001103 的 siRNA，发现 siRNA2 转染可显著降低 circ_0001103 的表达，进而影响 α -SMA 的表达，表明 circ_0001103 可调节 MMT。体内实验通过玻璃体注射腺相关病毒 shRNA 降低 circ_0001103 表达，免疫荧光染色显示，抑制 circ_0001103 可影响 MMT 转化，但不影响巨噬细胞。
• circ_0001103 的作用机制：由于 circ_0001103 主要存在于细胞质中，研究人员推测其可能作为 miRNA 海绵发挥作用。通过数据库分析、RIP 实验、RNA-FISH 以及双荧光素酶报告基因检测等一系列实验证实，circ_0001103 可以海绵吸附 miR-7240-5p，而 miR-7240-5p 能够靶向 SLC9A1 基因，从而调节 SLC9A1 介导的 MMT。
• circ_0001103 对视网膜下纤维化和 CNV 的影响：体内实验通过玻璃体注射 circ_0001103 shRNA，免疫荧光染色结果显示，抑制 circ_0001103 可显著抑制 CNV 面积和视网膜下纤维化面积，表明 circ_0001103 对视网膜下纤维化和 CNV 的形成有重要影响。

研究结论和讨论部分指出，circ_0001103 是调节巨噬细胞向肌成纤维细胞转化和诱导视网膜下纤维化形成的关键因素，它通过吸附 mmu-miR7240-5p 来调节 SLC9A1 介导的 MMT 和视网膜下纤维化。抑制 circ_0001103 可通过抑制 MMT 来抑制视网膜下纤维化和 CNV 渗漏。这一研究成果为视网膜下纤维化的治疗提供了新的潜在分子靶点，为后续的临床治疗研究奠定了重要的实验基础。不过，该研究也存在一些局限性，如 circ_0001103 在人体中的表达情况尚不清楚，动物实验样本量较小，且 circ_0001103 调节 MMT 和视网膜下纤维化的机制较为复杂，未来还需要更多的实验进行深入探索。但总体而言，这项研究为视网膜下纤维化的治疗带来了新的希望，为眼科领域的研究开辟了新的方向。