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血液提取RNA必须红细胞裂解吗?基因公司帮您简化步骤
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年02月28日 来源:基因有限公司
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基因有限公司新出的【自营核酸提取产品】之血液提取系列(适用于新鲜、凝固和干粉状血液样品、骨髓、淋巴细胞和培养细胞等),无需分离白细胞即可获得高纯度RNA,新一代柱膜设计无需加蛋白酶K,更不使用苯酚/氯仿等有毒试剂。
在医学、生物学研究及临床诊断中,通过提取和分析血液中的DNA和RNA,可以为疾病的早期诊断、精准治疗和科学研究提供重要的依据。然而传统方法面临很大挑战:
红细胞裂解or 白细胞分离:前者裂解过程中释放的血红蛋白和血红素,极有可能会干扰核酸提取和后续的实验,后者虽可获得高纯度的核酸,但操作起来较为复杂;
苯酚/氯仿危害:不但存在操作复杂、时间长、有害有机溶剂残留等问题,而且萃取过程中易出现核酸沉淀难以溶解的情况;
蛋白酶K的使用:存在消化不完全、操作时间长、需要低温保存以及高温消化可能导致核酸降解等问题。
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基因有限公司新出的【自营核酸提取产品】之血液提取系列(适用于新鲜、凝固和干粉状血液样品、骨髓、淋巴细胞和培养细胞等),无需分离白细胞即可获得高纯度RNA,新一代柱膜设计无需加蛋白酶K,更不使用苯酚/氯仿等有毒试剂。
核心优势:无需分离白细胞,即可获得高纯度RNA
独特的红细胞裂解缓冲液:低温条件下快速裂解红细胞,同步灭活RNase,保护RNA完整性。
避免白细胞分离:简化流程,节省30%操作时间。
图2:使用血液总RNA小量抽提试剂盒从猪血和小鼠血中提取得到的RNA
(Lane M:DNA Marker;Lane 1,2,3:猪血;Lane 4,5,6:小鼠血)
彻底摒弃苯酚/氯仿
零毒性试剂:采用新型变性缓冲液沉淀蛋白,杜绝有机溶剂残留,保障实验人员安全。
规避沉淀难题:避免多糖与RNA结合形成不溶物,提升核酸溶解率。
苯酚/氯仿萃取过程中存在的问题:
1. 不能完全去除样品中的杂质和抑制剂。
2. 采用含RNA的上层水相需要注意,在经乙醇/异丙醇沉淀后,间相的碎片污染会导致RNA沉淀难以溶解。
3. 苯酚/氯仿具有刺激性,会给实验人员的健康造成影响。
4. 操作时间长,不便于多样品制备。
无需蛋白酶K消化
高效蛋白去除:独特缓冲液直接沉淀血蛋白与血红素,省去酶解步骤,避免柱膜堵塞;
常温操作:无需低温保存试剂,高温降解风险归零。
图3:使用蛋白酶K消化的问题:
1. 由于消化不完全导致纯化柱堵塞。
2. 需要更长时间才能完成。
3. 需要低温贮存。
4. 仍有残留的DNA。
5. 高温(56°C-60°C)消化可能导致RNA降解
新一代离心柱设计
基因自营品牌核酸抽提产品,采用缩口的柱膜设计和独特的试剂配比。优化的柱形设计,让提取结果更优秀,提取过程更便捷!
除上述血总RNA试剂盒外,血基因组DNA 抽提试剂盒及DNA/RNA共提试剂盒均表现优异。前者可从200-250ul的抗凝全血中获得多至12ug的基因组DNA,后者得率和纯度也很高,所得核酸同样适用于RT-PCR或PCR等分子生物学实验。
数据展示
1、RNA纯度验证:猪血/小鼠血提取RNA条带清晰,无DNA污染
使用血液总RNA小量抽提试剂盒从猪血和小鼠血中提取得到的RNA
(Lane M:DNA Marker;Lane 1,2,3:猪血;Lane 4,5,6:小鼠血)
2、DNA完整性:酶切实验显示基因组DNA完整度高,适用于PCR/测序
使用血液基因组提取试剂盒从人血中提取DNA进行酶切
(Lane M:Marker;Lane 1,3:酶切前;Lane 2,4:EcoRⅠ酶切后)
3、广泛样本兼容:血块与干血提取效果媲美新鲜样本
使用血基因组DNA 抽提从人血块和人干血中纯化得到的基因组DNA
(Lane M:Marker;Lane1-3:血块;Lane4-5:干血)
产品信息
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