基于聚糖微阵列技术对卵巢癌相关抗体的发现平台构建及研究

【字体: 时间:2025年02月28日 来源:Analytical Biochemistry 2.6

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  来自莫斯科相关机构的研究人员利用聚糖微阵列(Glycan microarray)研究卵巢癌(OvaCan)相关抗体,发现特定抗体与 OvaCan 诊断显著相关,有望用于癌症诊断。

  聚糖结构能影响众多自然过程,包括蛋白质 - 蛋白质相互作用、蛋白质迁移与折叠、免疫识别、细胞黏附和细胞间信号传导等。健康个体循环中的抗聚糖抗体种类独特且稳定,可用于监测疾病中保护性抗体的变化。抗聚糖抗体谱受环境因素或既往疾病影响,其中针对肿瘤相关聚糖(TAGs)的抗体,对癌症免疫治疗、诊断和预后评估意义重大。
传统免疫组化方法大多一次只能检测一种标记物,且需大量样本。酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫组化(IHC)和流式细胞仪检测等常用诊断工具,临床应用局限于自身免疫性和感染性疾病。质谱(MS)虽能高灵敏、特异地鉴定和定量复杂的肿瘤相关聚糖,但耗时且需专业解读。聚糖微阵列技术在分析碳水化合物 - 蛋白质相互作用方面优势明显,如能在一张玻片上并行筛选数千个结合事件、实验所需样本和糖类极少、芯片上聚糖呈多价展示模仿自然状态、结果全面且可重复等。

研究人员开发了一个利用聚糖微阵列技术的发现平台,用于选择性检测卵巢癌患者体内针对 63 种不同异常聚糖的癌症相关抗体,这些聚糖包括 O - 聚糖(如 Thomsen - Friedenreich(TF)及其前体(Tn)和唾液酸化 Tn)、球系列聚糖(Globo - H)、Lewis 抗原(Lea、Leb、LeX和 LeY)、聚唾液酸等。

研究选取了 203 例卵巢癌患者和健康志愿者的血清样本,其中 154 例卵巢癌患者处于肿瘤不同阶段,49 例作为对照组(包括 29 例良性肿瘤患者和 20 例健康志愿者)。血清样本采集于 P.A. Hertsen 莫斯科研究肿瘤研究所 —— 国家医学研究放射学机构的诊所。

免疫分析基于抗体 - 抗原对的特异性结合,常见的有夹心型免疫分析和竞争型免疫分析。夹心型免疫分析因抗原上有两个结合位点,灵敏度和特异性高,适合检测复杂样本中的少量抗原,常用于大分子定量,但存在交叉反应风险。

在聚糖微阵列上固定分子探针比传统平面表面优势显著,被视为癌症诊断的潜在方法。血清肿瘤标志物检测广泛用于原发性肿瘤和转移灶的早期诊断及治疗监测。理想的生物标志物应对特定肿瘤有高特异性和灵敏度,但多数肿瘤标志物难以满足。

研究发现,聚糖微阵列可在单次实验中同时对 63 种异常聚糖进行定量免疫分析以检测卵巢癌。针对聚糖(6 - O - su - Lec)的抗聚糖 IgG 抗体和针对聚糖(Ley)的抗聚糖 IgM 抗体的血清水平与卵巢癌诊断显著相关。这一成果有望推动聚糖微阵列在卵巢癌及其他肿瘤诊断中的应用,使其成为未来癌症生物标志物研究的有力工具。

Vadim S. Pokrovsky 负责撰写初稿、提供资源、开展调查和整理数据;Louay Abo Qoura 负责撰写初稿、验证、调查、形式分析和整理数据;Aleksei A. Tikhonov 负责调查、整理数据和构思;Alla Yu Rubina 负责审阅编辑、监督和提供方法学;Nikolai E. Kushlinskii 负责审阅编辑和监督。

该研究未获得公共、商业或非营利部门资助机构的专项拨款。所有作者均阅读了期刊关于潜在利益冲突披露的政策,无利益冲突声明。同时,所有作者阅读了期刊的作者署名协议,对提交版本进行了审核并最终批准。研究团队感谢莫斯科谢苗诺夫 - 奥夫钦尼科夫生物有机化学研究所聚糖和脂质化学生物学系主任 Nikolai V. Bovin 教授提供用于微阵列固定的聚糖。
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