探寻慢性髓系白血病对酪氨酸激酶抑制剂二次耐药的预测标志物 —— 染色体畸变的关键作用

为预测慢性髓系白血病（CML）对酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）二次耐药，研究人员分析染色体畸变（CAs），发现其可区分患者，意义重大。

　　慢性髓系白血病（Chronic Myeloid Leukemia，CML）是一种血液系统恶性肿瘤，在医学领域一直是备受关注的难题。它由致癌融合蛋白 Bcr-Abl 引发，该蛋白是一种持续激活的酪氨酸激酶。第一代酪氨酸激酶抑制剂（Tyrosine Kinase Inhibitor，TKI）伊马替尼（imatinib）的出现，曾给众多 CML 患者带来希望，能使 86% 处于慢性期（Chronic Phase，CP）的患者病情缓解。然而，治疗过程中却出现了令人头疼的问题：部分患者对伊马替尼治疗毫无反应，即原发性耐药；还有些患者在初始治疗有反应后，逐渐变得不再敏感，也就是二次耐药。耐药问题一旦出现，疾病往往会迅速进展到终末期急性期 —— 急变期（Blast Crisis，BC），此时患者的生存期仅约 7 - 11 个月。

在社会经济发达地区，由于疾病能及时被检测出来，患者后续的随访也很严格，且治疗依从性较高，所以 TKIs 的治疗效果相对较好，患者生存期有所延长。但 TKIs 并不能彻底治愈 CML，患者需要终身服药来维持病情缓解状态，这就导致二次耐药患者的数量不断增加。据估计，到 2030 年，全球 CML 的患病率将增长约 4 倍，受影响的患者人数可达约 300 万，届时，对伊马替尼治疗产生耐药的患者将形成一个庞大的群体。

在这样的背景下，寻找能在治疗开始前预测二次耐药的标志物就显得尤为重要。它不仅能帮助医生在诊断时选择更合适的治疗方案，还能节省等待耐药发生后才调整治疗的时间。基于此，来自塔塔纪念中心（Tata Memorial Centre）的研究人员开展了一项研究，旨在探索染色体畸变（Chromosomal Aberrations，CAs）作为 CML 对 TKIs 二次耐药预测标志物的可行性，该研究成果发表在《Advances in Biomarker Sciences and Technology》杂志上。

研究人员为开展此项研究，采用了多种关键技术方法。首先，收集了 13 例 CML 患者（其中 CP 患者 10 例，BC 患者 3 例）的外周血样本，以及 2 例健康供者的白细胞分离产物作为对照。通过 Ficoll - Hypaque 离心、磁珠分选（MACS）等方法，从样本中分离出 CD34⁺细胞，并利用流式细胞术检测其纯度。接着，从纯化的 CD34⁺细胞中提取基因组 DNA，采用基于微阵列的比较基因组杂交技术（aCGH），使用 Affymetrix CytoScan? HD 芯片对基因组进行分析，从而识别出染色体畸变情况。最后，对数据进行统计分析，确定与耐药相关的染色体畸变特征。

研究结果如下：

• 患者临床特征：对招募的患者和对照的临床资料进行整理分析，获取了患者的血液学特征、疾病分期、治疗情况以及耐药检测结果等信息。最终招募的 13 例患者中，5 例在诊断时就被归类为耐药，后续随访过程中又有 2 例患者从初始对伊马替尼有反应转变为耐药。
• 检测染色体畸变：在分析患者样本的杂交阵列数据时，研究人员发现，按照常规以 logR 比值强度高于 ±1 且样本间完全重叠来筛选，能用于区分样本的片段很少。于是，他们调整策略，分析所有 logR 比值 > ±1 的片段上的基因，并排除健康供者样本中存在的基因，以此确定 CML 患者特有的染色体畸变相关基因。结果发现，伊马替尼耐药患者在 1、3、4、6、8、9、11、14、19、21 和 22 号染色体上的 CAs 更多，而在 7、12 和 16 号染色体上，伊马替尼敏感患者的 CAs 更高。进一步筛选出 1、3、7、8、11、16 和 22 号染色体进行聚类分析，发现 1、3、7、16 和 22 号染色体上的 CAs 数量可将敏感和耐药患者分为两个不同的簇，尽管有 3 例患者出现了分类错误，但后续随访数据表明，该分类结果仍具有一定的预测价值。

在讨论部分，研究人员指出，虽然之前有研究关注过 CML 中 CAs 与 TKI 耐药的关系，但能预测伊马替尼耐药的标志物尚未被报道。他们通过聚焦每条染色体上 CAs 的数量，成功构建出伊马替尼敏感和耐药患者的 CAs 特征图谱。这不仅揭示了耐药患者和敏感患者染色体畸变的差异，还发现所鉴定出的耐药患者相关染色体畸变与以往研究有重叠之处。虽然研究中存在部分患者分类错误的情况，但随访数据显示，该研究构建的 CAs 特征图谱不仅能区分伊马替尼的敏感和耐药患者，还可能在治疗开始前预测伊马替尼耐药的发生。

综上所述，这项研究意义重大。随着 CML 患者生存期的延长和接受 TKI 治疗患者数量的增加，TKI 耐药患者也会相应增多。本研究识别出的对 TKIs 二次耐药易感性的预测标志物，若能在更大规模的患者队列中得到验证，将对 CML 慢性期和急变期患者的治疗方案选择产生重大影响，为临床精准治疗提供有力的支持，有望改善 CML 患者的治疗现状和预后情况。