摩洛哥犬类 vector-borne pathogens 的分子调查：揭示潜在健康风险

为填补摩洛哥犬类媒介传播疾病（CVBDs）数据空白，研究人员调查犬和蜱中病原体，发现多种病原体，对防控意义重大。

　　在动物的健康世界里，犬类的健康问题一直备受关注。其中，犬类媒介传播疾病（CVBDs）如同隐藏在暗处的 “健康杀手”，在全球范围内给兽医医学带来了极大挑战。这类疾病主要由蜱虫、蚊子和白蛉等传播的病原体引发，对犬类的生命健康构成严重威胁。

在北非地区，关于犬类蜱传疾病（TBDs）的流行病学数据十分匮乏。多数已发表的研究要么是病例报告，要么局限于区域层面。例如在阿尔及利亚、突尼斯和埃及等国家，虽有相关研究检测出多种病原体，但研究范围有限，无法全面了解该地区犬类 CVBDs 的真实状况。而在摩洛哥，情况更为严峻。虽然已知利什曼原虫（Leishmania）在犬类中流行，且存在多种致病原，但关于 CVBDs 的研究数据依旧稀少，大多数研究仅聚焦于犬利什曼病（CanL），对其他病原体的研究少之又少。这种知识上的空白，就像蒙在犬类健康研究领域的一层迷雾，阻碍着对犬类疾病的有效防控。

为了驱散这层迷雾，填补这一关键的知识空白，来自多个研究机构的研究人员携手开展了一项重要研究。他们的目标是通过分子检测的方法，深入调查摩洛哥中部地区犬类和血红扇头蜱（Rhipicephalus sanguineus sensu lato）中媒介传播病原体（VBPs）的发生情况。这项研究成果发表在《Acta Tropica》上，为我们揭开了犬类 CVBDs 的神秘面纱。

研究人员在 2023 年 4 月至 10 月期间，精心挑选了摩洛哥中部城市、城郊和农村地区的三个合法私人犬舍作为研究场地。这些犬舍中的犬只都接种了狂犬病疫苗，但从未进行过驱虫或体外寄生虫防治处理。研究人员从 144 只可操作的犬只身上采集了血液样本，并详细记录了它们的年龄、性别、品种和潜在临床症状等信息。同时，他们还使用镊子，每月两次从 314 只犬身上收集了 5363 只蜱虫。这些蜱虫被仔细分类，记录其发育阶段、性别、进食状态，并通过形态学特征和物种描述进行鉴定。

在分子检测环节，研究人员采用了多种先进技术。从犬类血液样本中提取 DNA 时，使用了 GenUP Blood DNA Kit；而从蜱虫中提取 DNA 则运用了胍硫氰酸盐内部协议。对于病原体的检测，他们运用了常规聚合酶链反应（cPCR）或实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR），针对不同的 VBPs 设计了特异性引物。通过这些技术，对样本中的病原体进行精准检测和分析。

研究结果令人震惊。总体来看，54.1%（78/144）的犬只至少感染了一种病原体。其中，犬肝簇虫（Hepatozoon canis）最为常见，在 38.2%（n = 55）的犬只血液样本中被检测到，在蜱虫 DNA 池中也有 36.4%（n = 20/55）呈阳性。其次是婴儿利什曼原虫（Leishmania infantum），感染率为 15.3%（n = 22）。此外，还检测到了少许的血小板无形体（Anaplasma platys）、巴西巴贝斯虫（Babesia vogeli）和犬埃立克体（Ehrlichia canis）。值得注意的是，10.4%（n = 15）的犬只存在共感染情况，这无疑让犬只的健康状况雪上加霜。

在蜱虫方面，69.7%（n = 314）的犬只被蜱虫感染，平均感染强度为 17.1。所有蜱虫经鉴定均为血红扇头蜱复合种，且大部分为成虫（77.3%，n = 4145）。通过对蜱虫 DNA 池的检测发现，36.4% 的样本对原生动物呈阳性，且序列与犬肝簇虫的核苷酸同一性高达 99 - 100%，而所有蜱虫 DNA 池对无形体科均呈阴性。

从这些研究结果不难看出，摩洛哥中部地区犬舍中的犬只面临着极高的 VBPs 感染风险。这一发现意义重大，不仅揭示了当地犬类健康的严峻现状，更为后续的疾病防控提供了关键依据。犬舍作为犬类集中生活的场所，可能成为 VBPs 传播的重要焦点，尤其是那些具有人畜共患病风险的病原体。此外，犬只的迁移可能导致 VBPs 传播到非流行地区，给当地的兽医诊断和治疗带来巨大挑战。

在讨论部分，研究人员进一步深入分析了这些结果。犬肝簇虫的高感染率可能与犬只的高蜱虫感染率以及犬舍环境的高度蜱虫污染有关。这表明，改善犬舍环境、加强对蜱虫的控制对于预防犬肝簇虫感染至关重要。而婴儿利什曼原虫的感染率高于以往在突尼斯的报道，可能与当地的流行病学因素，如媒介昆虫的数量和分布等有关。这也提示我们，在防控利什曼病时，需要充分考虑当地的生态环境因素。

对于犬埃立克体和血小板无形体的检测结果，研究人员发现其感染率与之前在摩洛哥及周边国家的报道相近，但犬埃立克体的低感染率可能与当地血红扇头蜱狭义种（Rhipicephalus sanguineus sensu stricto）的优势分布有关。这为进一步研究不同蜱虫种类与病原体传播的关系提供了新的线索。另外，研究中未检测到立克次体（Rickettsia）和蚊媒丝虫，这可能与检测样本的局限性以及当地病原体的实际流行情况有关。

综合研究结论和讨论部分，这项研究为摩洛哥犬类 CVBDs 的防控敲响了警钟。它强调了加强对犬舍中蜱虫和其他媒介昆虫控制的紧迫性，以及制定综合防控策略的重要性。同时，也为其他地区开展类似研究提供了宝贵的参考，有助于全球范围内对犬类 CVBDs 的深入了解和有效防控。

研究人员为开展这项研究，主要运用了样本采集、分子生物学检测和数据分析这几个关键技术方法。在样本采集上，从摩洛哥中部三个不同区域的犬舍选取犬只，收集血液样本和蜱虫样本，并详细记录犬只信息和蜱虫特征。分子生物学检测方面，分别采用特定方法从血液和蜱虫样本中提取 DNA，利用 cPCR 或 qPCR 技术检测多种 VBPs。数据分析时，使用 R 软件进行统计分析，评估风险因素与 PCR 检测结果之间的关系。这些技术方法相互配合，为研究提供了有力支持，让我们得以更深入地了解摩洛哥中部犬类 VBPs 的流行情况。