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为解决丹麦 LYD 猪血液学参考区间(RIs)缺失问题,奥胡斯大学研究人员开展相关研究,确定了 LYD 猪血液学 RIs,对动物健康评估和研究意义重大。
在生物医学研究和外科手术训练中,猪扮演着极为重要的角色。想象一下,在实验室里,科研人员正借助猪的身体结构和生理特征,探索人体疾病的奥秘、研发新的治疗方法;外科医生们也在猪身上苦练手术技巧,为未来拯救更多生命做准备。然而,要想让这些研究和训练顺利开展,确保实验动物的健康至关重要。
目前,全球范围内实验用猪的数量众多,仅在 2020 年,欧盟和挪威就有约 73,500 头猪用于科学目的,全球数字更是远超于此。在丹麦,LYD 猪(丹麦长白猪、约克夏猪和杜洛克猪的杂交品种)每年产量超 3000 万头,其中约 24,000 头用于科研。但令人困扰的是,尽管 LYD 猪广泛应用于科研,却一直缺少符合规范的最新血液学参考区间(Reference Intervals,RIs)。
血液学指标就像是动物健康的 “晴雨表”,通过分析血液中的各种成分,如红细胞(Red Blood Cells,RBC)、白细胞(White Blood Cells,WBC)、血红蛋白(Hemoglobin,HGB)等,科研人员和兽医能精准判断动物的健康状况,评估实验前后动物的生理变化,从而做出更科学的决策。可现有的其他猪品种血液学参考区间,由于受到品种、年龄、性别等因素的影响,并不能直接套用到 LYD 猪身上。此前虽有关于 LYD 母猪妊娠期血液学 RIs 的研究,但对于生物医学研究中常用的幼年动物,相关数据仍是空白。这无疑给科研工作带来了诸多不便,甚至可能影响研究结果的准确性和可靠性。
为了填补这一空白,奥胡斯大学(Aarhus University)的研究人员勇敢地踏上了探索之旅。他们开展了一项旨在建立用于生物医学研究的 LYD 猪血液学 RIs 的研究,其研究成果对于提高动物健康评估水平、优化实验流程、推动生物医学研究发展具有重要意义。目前该研究成果未提及具体发表期刊。
研究人员为开展此项研究,采用了一系列科学严谨的技术方法。他们从经过特定病原体筛查的农场选取健康的雌性 LYD 猪作为样本来源。通过两次全面的临床检查,包括观察猪的外观、活动状态、测量体温、心率等,严格筛选符合条件的实验猪。在血液采集方面,研究人员在猪耳缘静脉采集血液样本,并使用 ProCyte Dx 血液分析仪进行检测。检测过程中,通过质量控制确保仪器稳定,随后运用专业的统计分析软件,根据数据分布特点,合理计算出血液学指标的参考区间。
研究结果
- 样本筛选结果:研究人员最初检查了 141 头猪,经过严格筛选,排除因疾病症状、采血问题等不符合要求的样本后,最终得到 133 份可用血液样本用于 RI 测定。
- 血小板异常情况:分析仪在 32 份血液样本中检测到 “血小板异常分布” 标记。经过进一步研究发现,这些样本的血小板聚集情况与正常样本并无差异,且采样难度与血小板异常标记也无关联。不过,异常血小板样本会影响血小板计数和相关指标的参考区间下限,因此在计算这些指标的 RI 时,研究人员将异常样本排除。
- 血液学参考区间确定:经过科学计算,研究人员成功确定了 LYD 猪的多项血液学参考区间。其中,红细胞计数为 5.10–7.00×10?/μL,血红蛋白为 9.36–12.29 g/dL,血细胞比容为 30.46–40.47%,白细胞计数为 11.73–25.00×103/μL 。
研究结论与讨论
这项研究成果意义非凡。研究人员发现,LYD 猪的血液学参考区间与其他猪品种存在显著差异。例如,与挪威生长猪和幼年约克夏猪相比,LYD 猪的红细胞、血红蛋白和血细胞比容的参考区间有所不同;与未补充铁的仔猪相比,LYD 猪的血红蛋白参考区间明显更高,这与 LYD 猪接受铁补充剂有关。此外,不同年龄、妊娠状态的猪,其白细胞参考区间也存在差异。这充分表明,建立特定品种的血液学参考区间至关重要,在解读血液学数据时,必须综合考虑年龄、品种、妊娠状态等多种因素。
研究人员在研究过程中严格把控各个环节,对实验猪进行了全面细致的健康检查,最大程度减少了因动物健康问题导致的数据偏差。同时,为降低应激对实验结果的影响,在采血时对猪进行了麻醉处理。但他们也意识到,麻醉本身可能会对血液学参数产生影响,这也是未来研究需要进一步探讨的方向。
在样本采集和检测方面,研究人员精心选择了合适的采血部位和器材,使用 EDTA 抗凝管采集血液样本。不过,EDTA 可能会导致血小板聚集,未来可考虑使用其他抗凝管进行研究。研究中使用的 ProCyte Dx 血液分析仪虽然功能强大,但在检测血小板时仍存在一些问题。未来,更先进的血小板计数技术,如基于荧光标记和流式细胞术的方法,可能会为解决这些问题带来新的希望。
总的来说,该研究为 LYD 猪的血液学研究提供了宝贵的数据支持,有助于科研人员和兽医更准确地评估 LYD 猪的健康状况,优化生物医学研究和外科手术训练的流程。同时,这一成果也推动了 3R 原则(替代、减少、优化)在动物实验中的应用,在提高研究质量的同时,更好地保障了实验动物的福利。它为疾病建模、异种移植等研究领域提供了重要的参考依据,有望推动生物医学研究向更高水平迈进。