SARS-CoV-2中和抗体检测新突破：侧流免疫层析法结合光度测量技术的临床应用

本研究针对现有SARS-CoV-2中和抗体检测方法复杂性高的问题，开展基于侧流免疫层析法与光度测量系统（LFIA-SPM）的检测技术研究，结果显示其与ELISA检测具有高度一致性，为疫苗接种后中和抗体水平的快速检测提供了新思路，具有重要的临床应用价值

　　自新冠疫情爆发以来，中和抗体水平与疫苗有效性之间的强相关性引起了广泛关注。然而，目前用于检测中和抗体的方法大多复杂且需要专业设备，限制了其广泛应用。为解决这一问题，美国Temple University的研究团队开展了一项研究，旨在评估一种基于侧流免疫层析法（LFIA）结合光度测量系统（SPM）的新型检测方法，并将其与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行比较。研究结果表明，该方法在检测SARS-CoV-2中和抗体方面表现出色，具有较高的灵敏度和特异性，为疫苗接种后的免疫反应评估提供了一种快速、便捷的替代方案。论文发表于《Scientific Reports》。

研究背景与意义

新冠疫情的全球大流行促使各国加速疫苗研发与接种，以遏制病毒传播和降低感染风险。疫苗接种后，人体会产生中和抗体（Neutralizing Antibodies, NAb），这些抗体能够有效阻断病毒与宿主细胞的结合，从而提供保护。然而，目前用于检测中和抗体的方法大多复杂且需要专业设备，如酶联免疫吸附试验（ELISA）和中和试验（Neutralization Assay），这些方法不仅耗时，还需要专业人员操作，限制了其在临床和现场检测中的应用。因此，开发一种快速、便捷且准确的中和抗体检测方法具有重要意义。

研究方法

Temple University的研究人员采用了一种基于侧流免疫层析法（LFIA）结合光度测量系统（SPM）的检测方法。该方法利用侧流免疫层析条检测SARS-CoV-2中和抗体，并通过光度测量系统对检测结果进行定量分析。研究中，研究人员收集了274份已知SARS-CoV-2 RNA检测结果和疫苗接种状态的血浆样本，包括接种疫苗的次数和疫苗类型，并将其与FDA授权的GenScript cPass? ELISA中和抗体检测试剂盒进行比较。

研究结果

检测限与线性范围

研究人员首先确定了该检测方法的检测限（Limit of Detection, LoD），结果表明，当样本中中和抗体浓度达到40 U/mL时，检测结果的假阳性和假阴性率均低于5%。此外，该方法在37.5至600 U/mL的浓度范围内表现出良好的线性关系（R2=0.9865），表明其能够准确检测不同浓度的中和抗体。

重复性与干扰实验

在重复性实验中，研究人员对五份不同浓度的血浆样本进行了多次检测，结果显示，对于强阳性样本，其变异系数（Coefficient of Variation, CV）小于5%；对于中等阳性样本，CV小于7.02%；而对于弱阳性样本，CV小于16.23%。此外，研究人员还评估了常见干扰物质（如乙酰氨基酚、咖啡因、白蛋白等）对检测结果的影响，结果表明，这些物质均未对检测结果产生显著干扰。

交叉反应性与基质等效性

在交叉反应性实验中，研究人员测试了多种病毒抗体（如流感病毒、冠状病毒等）对检测结果的影响，结果表明，除MERS-CoV IgG外，其他病毒抗体均未引起交叉反应。此外，研究人员还评估了全血与EDTA抗凝血浆的基质等效性，结果表明，两种样本类型的检测结果具有一致性。

临床性能比较

研究人员将LFIA-SPM检测结果与ELISA检测结果进行了比较，结果显示，LFIA-SPM的阳性预测值（Positive Predictive Value, PPV）为99.0%（95% CI: 96.4–99.7%），阴性预测值（Negative Predictive Value, NPV）为91.9%（95% CI: 83.4–96.2%）。在不同疫苗接种亚组中，LFIA-SPM的PPV和NPV也表现出良好的一致性，仅在接种一剂Pfizer疫苗的个体中PPV略低（80%）。

研究结论与讨论

本研究开发的基于侧流免疫层析法结合光度测量系统的检测方法在检测SARS-CoV-2中和抗体方面表现出色，其检测限、线性范围、重复性、干扰实验和交叉反应性均符合临床应用要求。与传统的ELISA方法相比，该方法具有快速、便捷、无需专业设备和人员的优势，尤其适用于疫苗接种后的免疫反应评估。此外，该方法还可进一步扩展至现场快速检测，为疫情防控和疫苗接种策略的制定提供重要参考。然而，研究也存在一些局限性，如样本量有限，且未涵盖最新的疫苗变种序列。未来的研究将进一步优化该检测方法，并探索其在更多场景中的应用潜力。