复方苦参注射液靶向大麻素受体 1 治疗放射性肠炎：开启肠道健康新希望

为解决放射性肠炎治疗难题，研究人员开展复方苦参注射液（CKI）治疗放射性肠炎的研究。结果发现 CKI 可能通过靶向 CB1 发挥作用。该研究为放射性肠炎治疗提供新思路，极具科研价值，推荐科研读者阅读。

　　

在我国，直肠癌和宫颈癌的发病率逐年攀升，严重威胁着人们的健康。放疗作为治疗恶性肿瘤的重要手段，通过直接或间接阻断、破坏肿瘤细胞的增殖过程发挥作用。然而，它却带来了一个令人头疼的 “副作用”—— 急性放射性肠炎（RE）。这是盆腔外放疗最常见的并发症，大约 90% 的盆腔放疗患者会出现肠道习惯改变，急性放射性肠炎的发病率在 50 - 70%。RE 的形成是一个复杂的多因素过程，与肠道上皮细胞损伤、肠壁血管损伤、肠道菌群移位以及炎症因子释放等都有关系。它不仅让患者饱受腹痛、腹泻等不适的折磨，还可能导致放疗中断，影响治疗效果。如果没有及时有效的治疗，甚至会发展成慢性放射性肠炎，出现肠道纤维化、肠穿孔、肠梗阻等严重后果，极大地影响患者的生活质量和预后。

目前针对 ARE 的治疗主要是保护肠黏膜、预防腹泻、炎症和感染，但治疗周期长，部分患者治疗效果不佳。因此，寻找更有效的预防和治疗 ARE 的方法迫在眉睫。就在这样的背景下，作者[第一作者单位] 的研究人员在《BMC Complementary Medicine and Therapies》期刊上发表了名为《Compound Kushen Injection alleviates radiation enteritis by targeting cannabinoid receptor 1: a network pharmacology and experimental validation study》的论文，为攻克这一难题带来了新的希望。他们的研究发现，复方苦参注射液（CKI）可能通过靶向大麻素受体 1（CB1）发挥抗放射性肠炎的作用，这一成果为放射性肠炎的治疗提供了新的方向和理论依据。

为了开展这项研究，研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：一是网络药理学分析，通过数据库筛选 CKI 成分的潜在作用靶点以及放射性肠炎相关的靶基因，并对潜在靶点进行生物信息学注释；二是动物实验，构建放射性肠炎的大鼠模型，将大鼠分组并给予不同处理，之后测定肠道推进率、进行 H&E 染色、免疫组化、qRT - PCR、Western blot、ELISA 以及免疫荧光等实验，从多个角度检测相关指标，探究 CKI 治疗放射性肠炎的效果及机制。

下面我们来详细看看研究结果：

• 网络药理学和生物信息学分析：研究人员通过在 GeneCard 数据库搜索相关关键词，得到了 2871、2987 和 5789 个相关性分数至少为 1 的基因，取交集后共获得 899 个与 RE 相关的基因。在 BATMAN - TCM 网络查询中预测出 CKI 可能的 971 个靶基因，与之前的基因交集后，得到 41 个 CKI 调节 RE 的潜在靶点。进一步分析发现，RE 与 CB1（CNR1）显著相关，CB1 预计与 CKI 的 25 种主要药用化学成分中的 17 种相互作用。GO 富集分析显示，CKI 与细胞 - 细胞信号传导、跨膜转运体活性和氧化还原酶活性显著相关；KEGG 富集分析表明，这些基因与神经活性配体 - 受体相互作用、大麻素受体途径和钙信号通路显著相关；OMIM/TTD 疾病富集分析则发现，药物与镇痛药、疼痛、精神 / 神经疾病和枫糖浆尿病显著相关。由此推测，CKI 可能通过控制疼痛、调节氧化还原和内源性大麻素受体途径在 RE 治疗中发挥作用。
• HE 染色观察大鼠回肠组织变化：研究人员对大鼠回肠进行 H&E 染色，结果发现，与对照组相比，模型组回肠黏膜层结构受损，肠绒毛萎缩、脱落，黏膜炎症细胞浸润。而 CB1 激动剂组、CKI 组和 CKI + CB1 拮抗剂组的肠绒毛萎缩得到缓解，仅有少量炎症细胞浸润黏膜。不过，与 CKI 组相比，CKI + CB1 拮抗剂组部分肠绒毛脱落，黏膜肠腺稍有萎缩。这表明 CKI 和 CB1 激动剂都能在一定程度上改善回肠组织的损伤情况。
• 免疫组化观察 CD68 和 CD16b 在大鼠回肠的浸润：通过免疫组化染色检测大鼠回肠组织中 CD68 和 CD16b 的浸润程度，结果显示，模型组中 CD68 和 CD16b 的表达显著高于对照组。经过治疗后，CB1 激动剂组、CKI 组和 CKI + CB1 拮抗剂组中 CD68 的表达均显著下降；CB1 激动剂组和 CKI 组中 CD16b 的表达显著下降，CKI + CB1 拮抗剂组中 CD16b 的表达也有所下降，但与 CKI 组相比，其表达又有所增加。这说明 CKI 和 CB1 激动剂能有效减少免疫炎症细胞的浸润，而 CB1 拮抗剂会削弱 CKI 的这种作用。
• PCR 检测大鼠回肠炎症细胞因子：研究人员利用 qRT - PCR 检测大鼠回肠中炎症因子 MCP1、TNF - α、IL - 1β 和 IL - 10 的表达。结果发现，模型组回肠中这些炎症因子的表达显著高于对照组。CB1 激动剂组和 CKI 组中，这些炎症因子的表达显著下降，而 CKI + CB1 拮抗剂组中只有 TNF - α 的表达显著下降。这表明 CKI 和 CB1 激动剂能有效降低炎症因子的表达，减轻炎症反应，而 CB1 拮抗剂会影响 CKI 对炎症因子的抑制作用。
• WB 检测大鼠回肠 NF - κB 信号激活：NF - κB 通路是关键的炎症通路，研究人员通过 WB 检测发现，模型组回肠中 p - IκBα/IκBα 比值显著高于对照组。与模型组相比，其他三组的 p - IκBα/IκBα 比值均下降，而 CKI + CB1 拮抗剂组的 p - IκBα/β - IκBα 比值相较于 CKI 组有所升高。这意味着 CKI 能够抑制 NF - κB 信号通路的激活，减轻炎症反应，而 CB1 拮抗剂会削弱 CKI 的这种抑制作用。
• ELISA 检测大鼠回肠 SOD、GSH - Px、MDA、ROS 和 NO 表达：通过 ELISA 检测发现，与对照组相比，模型组回肠中 SOD 和 GSH - Px 的水平显著降低，MDA、ROS 和 NO 的水平显著升高。经过治疗后，其他三组回肠中 SOD 和 GSH - Px 的水平显著升高，MDA、ROS 和 NO 的水平显著降低。但与 CKI 组相比，CKI + CB1 拮抗剂组中 SOD 和 GSH - Px 的水平显著降低，MDA、ROS 和 NO 的水平显著升高。这表明 CKI 能够改善肠道的氧化应激损伤，而 CB1 拮抗剂会削弱 CKI 的抗氧化作用。
• WB 检测大鼠回肠 NOX4 表达：NOX4 是与氧化应激相关的重要酶，研究人员通过 WB 检测发现，模型组回肠中 NOX4 的表达显著高于对照组。CB1 激动剂组和 CKI 组中，NOX4 的表达显著下降。这说明 CKI 和 CB1 激动剂能够降低 NOX4 的表达，减轻氧化应激反应。
• WB 检测大鼠回肠 CB1 和 p - p38 MAPK/p38 MAPK 表达：研究人员通过 WB 检测发现，模型组回肠中 CB1 和 p - p38 MAPK/p38 MAPK 的表达显著高于对照组。CB1 激动剂组和 CKI 组中，这两者的表达显著降低。而 CKI + CB1 拮抗剂组中 p - p38 MAPK/p38 MAPK 的比值相较于 CKI 组显著升高。这表明 CKI 和 CB1 激动剂能够抑制 CB1 和 p - p38 MAPK/p38 MAPK 的表达，而 CB1 拮抗剂会削弱 CKI 的这种抑制作用。
• 免疫荧光共染观察大鼠回肠 CB1 和 p - p38 MAPK 共表达：通过免疫荧光共染发现，与对照组相比，模型组中 CB1 + p - p38 MAPK、CB1 和 p - p38 MAPK 的荧光强度显著增加，荧光信号增强。CB1 激动剂组、CKI 组和 CKI + CB1 拮抗剂组中，CB1 和 p - p38 MAPK 的荧光强度相较于模型组显著降低。但与 CKI 组相比，CKI + CB1 拮抗剂组中 CB1 + p - p38 MAPK 和 p - p38 MAPK 的荧光强度显著增加，荧光信号增强。这进一步证实了 CKI 和 CB1 激动剂能够抑制 CB1 和 p - p38 MAPK 的表达，而 CB1 拮抗剂会削弱 CKI 的作用。

综合研究结果和讨论部分来看，CKI 能够改善大鼠回肠的形态和结构，减少 CD68 和 CD16b 的浸润，降低炎症因子的表达，减轻肠道氧化应激损伤。研究推测 CKI 可能通过介导 CB1 抑制 p38 MAPK 通路来改善放射性肠炎。不过，这项研究也存在一些局限性，比如动物模型样本量较小，对 CKI 具体分子成分的研究不够深入，也缺乏基因模型来验证 CB1 的直接作用。但这依然是一个重要的开端，为后续研究指明了方向。未来，研究人员计划进一步探究稳定敲低 CNR1 后 CKI 在 RE 中的作用，对 CKI 中的主要化合物进行分子模拟对接，明确与 CNR1 相互作用的成分，同时研究 CNR2 在 RE 中的作用，以及 CKI、脂质筏和 Wnt/β - catenin 信号通路之间的关系。这些研究将有助于更深入地理解 CKI 治疗放射性肠炎的机制，为开发更有效的治疗方案提供有力支持，有望为广大放射性肠炎患者带来新的希望。