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为解决当前 RNA 编辑技术局限于单碱基编辑的问题，研究人员开展了关于 RNA 选择性切割和分子内连接（SCISSOR）的研究。结果显示 SCISSOR 能灵活切割 RNA 等，在 RNA 治疗和生物医学研究意义重大，值得一读。
亮点
- 带有凸起环的工程化向导 RNA（gRNA）突破了 III 型 CRISPR 的 6 个核苷酸切割规则。
- SCISSOR 技术能够在非 6 个核苷酸的间隔处切割 RNA，实现灵活的 RNA 切除。
- SCISSOR 技术可修复致病性移码突变并恢复蛋白质表达。
- SCISSOR 技术可修饰开放阅读框，以产生具有免疫原性的移码多表位。
摘要
目前的 RNA 编辑技术主要局限于单碱基编辑。在此，我们介绍了 RNA 选择性切割和分子内连接技术（SCISSOR），用于 RNA 的选择性切割和分子内连接。基于 III 型 CRISPR 复合物根据 gRNA 长度以 6 个核苷酸为增量来确定靶标切割位置这一原理，我们假设设计带有凸起环的 gRNA 可以规避这一规则，从而实现灵活的 RNA 切除。通过对带有各种凸起环的 gRNA 进行系统评估，我们建立了精确的非 6 个核苷酸靶标切割和修复规则。我们发现该复合物能够耐受 1 至 2 个核苷酸的凸起环，并且可以容纳 6 至 24 个核苷酸的大凸起环。因此，SCISSOR 技术几乎可以实现任何长度的短片段切除。鉴于其修饰开放阅读框的能力，我们展示了 SCISSOR 技术在修复人类细胞中的移码突变以及引入移码以产生具有免疫原性的多表位方面的潜力。SCISSOR 技术在 RNA 治疗和生物医学研究中具有广阔的应用前景。
图形摘要
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