揭秘水稻耐热调控新机制:OsEBF1-OsEIL5-OsPP91 模块的关键作用

【字体: 时间:2025年02月19日 来源:Cell Reports 7.5

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  全球变暖影响作物产量,水稻对高温敏感。研究人员开展 “OsEBF1-OsEIL5-OsPP91 模块调控水稻耐热性” 的研究,发现该模块通过泛素化和转录激活调控水稻耐热,为培育耐热水稻品种提供遗传资源。

  在全球气候变暖的大背景下,地球表面平均温度不断攀升,高温天气愈发频繁和强烈。这对农作物的生长和产量产生了极大的负面影响,据估计,全球平均气温每升高 1°C,主要农作物的产量就会下降 3% - 8%。水稻作为全球一半以上人口的主食,在幼苗期和生殖期都对高温胁迫极为敏感,这不仅导致产量降低,还会影响其品质。因此,探索水稻耐热的分子机制,挖掘相关基因资源,对于培育耐热水稻品种、保障粮食安全至关重要。
福建农林大学的研究人员针对这一问题展开研究,他们发现了一个全新的分子调控模块 ——OsEBF1-OsEIL5-OsPP91,该模块在水稻响应热胁迫过程中发挥着关键作用。这一重要研究成果发表在《Cell Reports》杂志上。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法:一是利用 CRISPR-Cas9 技术构建相关基因的突变体,如 oseil5 和 ospp91 突变体,以此来研究基因功能缺失对水稻耐热性的影响;二是采用 RNA 测序(RNA-seq)技术分析基因表达谱,从而筛选出受 OsEIL5 调控的基因;三是运用染色质免疫沉淀(ChIP)、酵母单杂交(Y1H)和电泳迁移率变动分析(EMSA)等技术,验证转录因子与靶基因启动子之间的相互作用。

研究结果如下:

  1. OsEIL5 对水稻耐热性的影响:在六个 EIL 基因中,OsEIL5 受 heat stress 诱导最为显著。通过构建 oseil5 突变体和 OsEIL5 过表达(OE)株系发现,oseil5 突变体在热胁迫下表现出更高的敏感性,存活率降低,H2O2积累增加,电解渗漏升高;而 OsEIL5-OE 株系则具有更强的耐热性,存活率提高,H2O2积累减少,电解渗漏降低。在生殖期,OsEIL5 同样能提高水稻的耐热性,增加种子结实率。此外,OsEIL5 过表达对水稻的关键农艺性状没有明显负面影响。
  2. OsEIL5 的亚细胞定位和转录激活功能:研究表明,OsEIL5 主要定位于细胞核,且具有转录激活活性,其转录活性依赖于 C 末端 339 - 504 位氨基酸。
  3. OsEIL5 与 OsPP91 的关系:研究人员发现 OsEIL5 可能不参与乙烯响应,而是直接激活 OsPP91(编码一种 2C 型蛋白磷酸酶)的转录。OsPP91 是水稻耐热性所必需的,敲除 OsPP91 会降低水稻的耐热性,而过表达 OsPP91 能部分挽救 oseil5-1 的热敏感性。
  4. OsEIL5 对其他热响应基因的调控:通过 RNA-seq 分析,研究人员发现除 OsPP91 外,OsEIL5 还能调节一些与内质网(ER)蛋白加工相关的热响应基因的表达。OsEIL5 过表达株系对 ER stress 的抗性更强,表明其可能通过调节 ER stress 响应来提高水稻的耐热性。
  5. OsEBF1 与 OsEIL5 的相互作用及对水稻耐热性的影响:OsEBF1 与 OsEIL5 相互作用并通过泛素化途径降解 OsEIL5,从而抑制 OsPP91 的表达,降低水稻的耐热性。敲低 OsEBF1 的表达可提高水稻的耐热性,而敲除 OsEIL5 会部分降低高耐热株系 EBF1R13 的耐热性,这表明 OsEBF1 在水稻响应热胁迫中的功能部分依赖于 OsEIL5。

研究结论和讨论部分指出,本研究揭示了 OsEBF1-OsEIL5-OsPP91 模块在转录后和转录水平上精细调控水稻耐热性的机制。OsEBF1 通过促进 OsEIL5 的泛素化降解,抑制 OsPP91 的表达,降低水稻耐热性;而当 OsEBF1 水平较低时,OsEIL5 可激活 OsPP91 的表达,增强水稻耐热性。此外,研究还发现除 OsPP91 外,OsEIL5 可能通过激活 ER stress 相关基因来提高水稻耐热性。这一研究成果为深入理解水稻热胁迫响应机制提供了新的视角,也为培育耐热水稻品种提供了重要的遗传资源和理论依据。然而,该研究也存在一些局限性,如无法确定 OsEIL1 对 EBF1R13 高耐热性的贡献,以及 OsPP91 的磷酸酶活性、相互作用蛋白等问题尚待进一步研究。但总体而言,这项研究在水稻耐热性研究领域取得了重要突破,对未来的农业生产具有重要的指导意义。
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