高效液相色谱法同时定量注射用油凝胶中左旋多巴和卡比多巴的分析方法开发与绿色评估

本研究针对帕金森病治疗药物左旋多巴(LD)和卡比多巴(CD)在注射用油凝胶制剂中的稳定性问题，开发了一种新型HPLC分析方法。研究人员通过优化梯度洗脱程序，成功实现了药物与抗氧化剂亚硫酸氢钠的峰分离，建立的方法在10-100 μg/ml范围内线性良好(r2>0.999)，并应用多种绿色评估工具验证了方法的环保性。该研究为长效注射制剂的研发和质量控制提供了可靠的分析手段。

　　

帕金森病作为一种进行性神经系统退行性疾病，全球影响着超过1000万患者的生活质量。左旋多巴(LD)作为多巴胺前体药物，自1967年George Cotzias首次应用于临床以来，一直是治疗帕金森病的"金标准"。然而，这种治疗方案面临着诸多挑战：药物在体内快速代谢导致半衰期短，患者需要每天多次服药；外周代谢产生的多巴胺引发恶心、低血压等副作用；现有缓释制剂生物利用度低等问题。更棘手的是，LD在碱性条件下极不稳定，这给制剂研发和质量控制带来了巨大困难。

Centre for Pharmaceutical Innovation, University of South Australia的研究团队针对这些关键问题，开发了一种创新的长效注射用油凝胶制剂，并建立了配套的分析方法。他们发表在《BMC Chemistry》的研究成果，不仅解决了LD和卡比多巴(CD)在制剂分析和释放测试中的稳定性难题，还从绿色化学角度评估了分析方法的可持续性。

研究人员主要采用了高效液相色谱法(HPLC)进行方法开发，使用Luna-C18色谱柱，通过梯度洗脱优化分离条件。为评估方法性能，进行了全面的方法学验证，包括线性、精密度、准确度等指标测试。制剂研究方面，采用透析袋法进行体外释放实验，并运用多种绿色评估工具(ESA、ComplexMoGAPI、AGREE)对分析方法进行环保性评价。

在方法开发部分，研究人员发现常规HPLC方法无法分离药物与抗氧化剂亚硫酸氢钠的色谱峰。通过系统优化，他们创新性地在流动相A中添加35 mM四丁基硫酸氢铵(TBAS)作为离子对试剂，成功实现了三者的基线分离。LD和CD的保留时间分别为3.05±0.001 min和3.64±0.001 min，亚硫酸氢钠峰出现在4.99 min。方法验证结果显示，在10-100 μg/ml范围内，两种药物的线性关系良好(r²>0.999)，日内和日间精密度RSD均小于2%，符合FDA指导原则要求。

溶液稳定性研究表明，LD和CD在流动相中14天内保持稳定，但在pH 7.4释放介质中，CD在室温下3天后开始降解。这一发现提示体外释放实验需要每24小时更换新鲜介质，以确保数据可靠性。研究人员将开发的方法成功应用于油凝胶制剂的含量测定和释放研究，测得LD和CD的回收率分别为101.97%和96.93%。

在制剂性能评价方面，油凝胶显示出典型的双相释放特征：初期爆发释放(LD 27.75%，CD 23.19%)后，进入持续7天的缓释阶段。这种释放特性有望解决现有治疗方案需要频繁给药的临床痛点。

绿色评估是该研究的另一大亮点。通过ESA、ComplexMoGAPI和AGREE三种工具的全面评价，该方法获得了76分(满分100)的绿色评分。虽然使用了部分危害性试剂，但通过最小化用量和优化条件，使方法整体符合绿色分析化学原则。BAGI评估则显示该方法在实用性方面得分75，表明其适合常规分析使用。

这项研究的意义在于：首先，建立的分析方法解决了LD/CD制剂开发中的关键分析难题，能够准确测定药物在复杂体系中的含量；其次，开发的长效注射制剂有望显著改善患者用药依从性；最后，研究展示了如何在新方法开发中兼顾分析性能和环保要求。这些成果不仅为帕金森病的治疗提供了新的制剂思路，也为绿色分析方法开发树立了典范。

值得注意的是，研究也存在一些局限性，如体外释放实验需要频繁更换介质，增加了操作复杂性；油凝胶的突释现象可能需要进一步优化。未来研究可探索更稳定的制剂配方，并开发更绿色的分析方法，以推动帕金森病治疗领域的进步。