新型二代水解蛋白干粮治疗犬慢性肠病：突破传统疗法困境的前沿探索

为解决犬慢性肠病（CE）治疗难题，法国国立阿尔福特兽医学校的 Valérie Freiche 等人开展了相关研究。结果显示，新型水解蛋白饮食可改善患犬症状。这为 CE 治疗提供新思路，极具科研与临床价值，推荐大家阅读。

　　

法国国立阿尔福特兽医学校（école Nationale Vétérinaire d’Alfort）的 Valérie Freiche 等研究人员在《BMC Veterinary Research》期刊上发表了题为 “An extensively hydrolysed protein-based extruded diet in the treatment of dogs with chronic enteropathy and at least one previous diet-trial failure: a pilot uncontrolled open-label study” 的论文。这篇论文对于犬类慢性肠病（Canine chronic enteropathies，CE）的治疗及相关营养研究领域意义重大，为临床治疗提供了新的思路和方法，有助于改善患慢性肠病犬的健康状况。

摘要解读

在这项前瞻性、多中心、非对照、开放标签的研究中，研究人员评估了一种以广泛水解禽羽为蛋白质来源的商业干粮，对之前饮食和抗菌治疗无反应的 CE 患犬的治疗效果。研究排除了患有中度或重度蛋白丢失性肠病（Protein-losing enteropathy，PLE）的犬。经过筛选，符合条件的犬进入第一阶段并开始食用试验饮食。随后进行胃肠内镜检查，只有经组织病理学证实有小肠炎症的犬才能进入第二阶段。试验饮食在两个阶段共喂养 10 周，主要评估指标是临床成功，即犬炎症性肠病活动指数（Canine Inflammatory Bowel Disease Activity Index，CIBDAI）降低≥75%；次要评估指标包括身体状况评分（Body Condition Score，BCS，1 - 9 分制）和粪便稠度评分（1 - 5 分制）。结果显示，共有 15 只犬开始第一阶段试验，13 只进入第二阶段，其中 2 只在第 5 周因违反试验方案退出。CIBDAI 评分在基线时为 9（7 - 16），第 2 周降至 2（1 - 11），第 5 周降至 2（0 - 6），第 10 周降至 1（0 - 3），治疗成功率在第 5 周为 8/13，第 10 周为 10/11。粪便评分和 BCS 在基线到第 10 周也有显著改善。这表明，对于之前饮食和抗菌治疗无效的 CE 患犬，食用这种水解蛋白干粮 10 周内临床症状得到改善。

研究背景

犬类慢性肠病是一组以胃肠道疾病的持续或反复临床症状为特征的疾病，且没有原发性肿瘤、代谢、寄生虫或其他感染性病因。常见症状包括呕吐、腹泻、里急后重、黏液便、便血、体重减轻、腹痛和厌食等，持续时间超过 3 周。在近期的一项回顾性研究中，近 65% 出现慢性腹泻的犬最终被诊断为 CE。尽管 CE 的病因尚不明确，但普遍认为是宿主遗传、免疫系统和肠道微生物群之间复杂相互作用的结果。

CE 通常根据治疗反应进行分类，包括食物反应性肠病（Food-responsive enteropathy，FRE）、抗生素反应性肠病（Antibiotic-responsive enteropathy，ARE）、免疫抑制剂反应性肠病（Immunosuppressant-responsive enteropathy，IRE）和无反应性肠病（Non-responsive enteropathy，NRE）。其中，FRE 是 CE 的主要类型，更易影响年轻犬，临床症状相对较轻。饮食试验，如使用单一来源蛋白质或水解蛋白食物，是诊断和一线治疗 CE 的重要手段，多数犬通过饮食调整无需免疫调节治疗即可缓解症状。

然而，当饮食试验效果不佳时，传统上会考虑进行抗菌试验。但近年来有观点认为，经验性抗菌治疗应在排除其他所有疾病且其他治疗方法无效时使用。FRE 的免疫失调表现为对饮食蛋白质的耐受性丧失，可能涉及 IgE 介导的 I 型超敏反应等多种免疫机制。此外，饮食蛋白质的大小和结构会影响其引发抗体介导的超敏反应的能力，因此将饮食蛋白质水解为较小的寡肽可能有助于减少免疫原性。同时，水解蛋白饮食诱导的 CE 缓解与肠道微生物群组成的改善有关。目前市场上有多种水解蛋白来源的治疗性饮食，但它们的蛋白质水解程度和性质各不相同。本研究旨在探讨一种第二代水解蛋白饮食对之前治疗无效的 CE 患犬的疗效。

研究方法

1. 研究设计：这是一项为期 10 周的前瞻性、多中心、非盲且非对照（单组）、两阶段的现场试验。以个体犬为实验单位，主要观察指标是基于 CIBDAI 变化的临床反应，成功治疗定义为 CIBDAI 评分降低至少 75%；次要观察指标包括粪便稠度、体重、BCS 和食欲的变化。
2. 研究地点和时间：研究在法国的 4 个地点（法国国立阿尔福特兽医学校、图卢兹国立兽医学校、波尔多 Clinique Alliance 诊所、埃西讷 Clinique Aquivet 诊所）和加拿大的 1 个地点（加拿大魁北克市 Centre Vétérinaire Daubigny 诊所）进行。犬只于 2013 年 2 月 4 日至 2014 年 2 月 21 日进行筛选和入组，研究随访时间为 2013 年 2 月 19 日至 2014 年 5 月 15 日。
3. 伦理考量：研究获得皇家宠物食品公司（Royal Canin SAS）伦理审查委员会批准（协议代码 RCIBD - 2012），所有犬主人均知情并签署书面同意书。
4. 入选标准：第一阶段纳入有疑似小肠源性胃肠道疾病症状（如呕吐、腹泻）且持续至少 4 周的客户自有犬。通过内镜活检确定是否符合第二阶段标准，只有确诊为慢性肠病且有小肠炎症组织学证据的犬才能进入第二阶段。排除患有全身性疾病、肠道寄生虫感染、特定胃肠道疾病（如中度至重度 PLE、胰腺炎、外分泌胰腺功能不全）、临床症状仅源于结肠、有胃肠道异物或肠套叠、有胃肠道手术史的犬，以及对之前饮食和抗菌治疗无反应、无法停用调味药物或膳食补充剂的犬。
5. 试验流程：初始筛选评估犬只是否符合第一阶段标准，并在第一阶段开始前给予 5 天芬苯达唑治疗。第一阶段包括两次访视，访视 0 在初始筛选后不超过 7 天进行，进行胃肠内镜检查并开始试验饮食；访视 1 在访视 0 后约两周进行，根据胃肠道组织学结果确定是否进入第二阶段。第二阶段在访视 1 后立即开始，包括访视 2 和访视 3，分别在访视 0 后约 5 周和 10 周进行，犬只继续食用试验饮食 8 周。
6. 试验饮食和喂养方案：试验饮食是一种干挤压食品（Anallergenic? Canine Formula，皇家宠物食品公司），由经盐酸广泛水解的禽羽蛋白（角蛋白）制成，含有 88% 的游离氨基酸和小于 1 千道尔顿（6 - 8 个氨基酸）的寡肽，并添加纯化氨基酸以平衡必需氨基酸组成。根据犬只体重和 BCS 计算每日喂养量，要求犬只在 10 周内只食用该试验饮食并自由饮水。
7. 临床症状监测：在研究前筛查访视和 4 次计划访视中进行全面身体检查，每次访视测量体重，除访视 1 外评估 BCS。犬主人每两周填写问卷记录犬只胃肠道症状、食欲、毛发状况和疼痛迹象，包括粪便评分和饮食适口性评分。临床医生根据观察和问卷结果评估 CIBDAI 评分。
8. 不良事件和试验中断：记录所有疑似不良事件，若认为与试验饮食有关则立即暂停参与。研究期间允许使用蒙脱石（diosmectite）和肠外钴胺素治疗，若治疗反应不佳可由临床医生酌情添加其他治疗，但使用全身性皮质类固醇或抗菌药物的犬必须退出研究，犬主人也可随时无理由撤回犬只参与。
9. 临床病理学检查：在初始筛选、访视 2 和访视 3 采集空腹血样进行血液学、临床化学分析，包括血常规、生化指标、尿液分析、血清胰蛋白酶样免疫反应性（TLI）、犬胰腺特异性脂肪酶、叶酸和钴胺素检测以及粪便寄生虫检查。根据临床需要测量静息皮质醇浓度，必要时进行促肾上腺皮质激素（ACTH）刺激试验。
10. 超声检查：入组前对所有犬只进行腹部超声检查，排除可能导致不符合研究条件的疾病。
11. 胃肠内镜和组织学检查：访视 0 时进行联合胃十二指肠镜和回结肠镜检查，从胃、十二指肠、回肠末端和结肠获取多处黏膜活检。组织学切片由专业实验室制备，由两位法国认证病理学家使用世界小动物兽医协会（WSAVA）胃肠道标准化小组开发的评分系统进行评估。
12. 数据处理和统计分析：数据录入电子表格后导入 R 语言进行分析，使用特定软件包处理数据。结局指标（CIBDAI、BCS、粪便评分和适口性评分）以中位数（范围）总结，CIBDAI 还按严重程度分类统计。临床病理变量根据是否在实验室参考区间内评估。对参与两个阶段的犬只，使用单因素重复测量方差分析评估访视对结局指标的影响，必要时进行数据转换，有显著影响时进行 Tukey 事后检验，设定 P < 0.05 为有统计学意义。

研究结果

1. 研究犬只和基线变量：最初筛选 22 只犬，3 只被排除，19 只进入第一阶段，其中 4 只因临床记录不完整被排除，15 只完成第一阶段。2 只仅第一阶段有胃炎组织学证据被排除在第二阶段外，最终 13 只确诊为 CE 的犬进入第二阶段。这些犬年龄为 4.2（1.1 - 7.1）岁，BCS 为 3（2 - 4），之前均进行过饮食和抗菌治疗且失败。
2. 临床症状基线：13 只犬均有 CE 临床症状，症状持续时间中位数为 11（1 - 56）个月，常见症状包括腹泻、食欲减退、体重减轻和呕吐等。
3. 先前饮食和抗菌治疗：所有犬都接受过至少一次持续 14 天以上的饮食试验和抗菌试验且失败。
4. 胃肠道活检组织学分析：内镜检查在初次检查后中位数 7（1 - 16）天进行，平均取 16（11 - 34）处活检。组织学结果显示，不同部位存在不同程度的炎症浸润、纤维化等病变。
5. 同时治疗、方案偏差和研究退出：13 只进入第二阶段的犬中，2 只退出，4 只接受蒙脱石治疗，3 只接受肠外钴胺素治疗。部分犬还接受了其他药物治疗，存在一些饮食方案偏差，但总体饮食适口性良好。
6. CIBDAI 评分：CIBDAI 评分在第一阶段从基线的 9（7 - 16）降至访视 1 的 2（1 - 11），第二阶段访视 2 时，8/13（62%）的犬 CIBDAI 评分较访视 0 降低≥75%，访视 3 时，10/11（91%）的犬达到这一标准，且所有犬 CIBDAI 评分对应 “临床症状不明显疾病”。
7. 体重、身体状况评分和食欲：在 11 只完成研究的犬中，1 只体重不变，8 只体重增加，2 只体重减少；BCS 在访视 0、2 和 3 时中位数分别为 3（2 - 4）、4（2 - 4）和 4（3 - 5），总体有显著改善；多数犬食欲在研究过程中改善。
8. 临床病理检查：血液学和临床化学分析显示，部分结果超出实验室参考区间，其中血清白蛋白浓度在多数犬中低于参考区间，部分犬叶酸和钴胺素浓度异常。
9. 粪便评分：粪便评分在访视 0、1、2 和 3 时中位数分别为 1（1 - 3）、4（2 - 5）、4（3 - 5）和 4（3 - 5），访视 1、2 和 3 的评分均显著高于访视 0，研究结束时多数犬粪便稠度正常或接近正常。

研究结论与讨论

在本研究中，13 只对先前饮食和抗菌治疗无反应的 CE 患犬，在食用含有禽羽来源氨基酸和寡肽的第二代水解饮食后临床症状成功改善。根据 CIBDAI 评分，这些犬的 CE 在研究开始时多为中重度，经过 10 周试验饮食治疗后，11 只犬被归类为临床症状不明显疾病，可正式诊断为 FRE。这表明这种氨基酸和寡肽基饮食对无中度或重度 PLE 的 CE 患犬具有潜在价值，否则这些犬可能因先前治疗失败而考虑免疫抑制剂治疗。

目前治疗犬 CE 最常见的饮食策略是排除饮食，如单一来源蛋白质饮食或水解蛋白饮食。单一来源蛋白质饮食并非本质上低敏，而第一代水解蛋白饮食虽对治疗 CE 有效，但水解程度有限。本研究使用的第二代水解物水解更彻底，产生游离氨基酸和短链寡肽，已被证明对犬低敏，不易引发过敏反应，且配方类似营养研究中的纯化饮食，消化率和生物利用度高。

过去 10 年虽有多篇关于犬 CE 饮食研究的论文发表，但多数未评估无抗菌或免疫抑制药物时饮食改变的效果，且并非所有研究采用序贯治疗试验。已有研究证明大豆基水解饮食对犬 CE 有效，但这些研究中 CE 的具体性质并不明确。本研究也存在局限性，如样本量小且未进行样本量计算，虽临床反应显著，但仍需更大样本量研究验证；研究为开放标签且无对照组，结果需前瞻性随机双盲研究确认；PLE 诊断标准可能导致部分轻度 PLE 病例被纳入或排除，存在选择偏倚；未进行食物激发试验确认饮食在 CE 发展中的作用；未测量所有犬的静息皮质醇，可能漏诊非典型肾上腺皮质功能减退症；无内镜重新评估和长期随访，无法确定反应的性质和程度，也无法测试犬在临床缓解后能否恢复先前饮食。

尽管如此，本研究初步证实了饮食在犬 CE 治疗中的重要作用。对于那些对传统饮食和抗菌治疗无效的 CE 患犬，这种新型水解蛋白饮食提供了一种新的治疗选择，为临床兽医治疗此类疾病提供了有价值的参考。未来需要进一步的研究来克服本研究的局限性，更深入地探究这种饮食的作用机制和长期效果，为犬 CE 的治疗提供更坚实的理论和实践基础。