NK 细胞疗法新突破：为阿尔茨海默病治疗带来新希望

为探究自然杀伤（NK）细胞疗法对阿尔茨海默病（AD）的作用，NKGen Biotech Inc. 研究人员开展相关研究，发现 SNK01 耐受性良好，能改善认知功能，为 AD 治疗提供新思路。

　　阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD），这个名字或许你并不陌生，它就像大脑中的 “橡皮擦”，悄无声息地擦去患者的记忆，偷走他们的认知能力，给患者及其家庭带来沉重的负担。目前，AD 的病因仍不明确，虽然市场上有一些药物可以改善患者的认知功能和缓解症状，但都无法彻底治愈这种疾病。

在免疫系统的大家庭里，自然杀伤细胞（natural killer cell，NK 细胞）是重要的一员，它就像身体的 “警察”，时刻守护着我们的健康，抵御感染和癌症的侵袭。近年来，越来越多的研究发现，NK 细胞在神经系统疾病中也可能发挥着重要作用。然而，NK 细胞在神经退行性疾病中的具体机制还不十分清楚，尤其是在 AD 中，NK 细胞的作用一直被忽视。

为了揭开 NK 细胞在 AD 中的神秘面纱，来自 NKGen Biotech Inc. 的研究人员开展了一项极具意义的研究。他们希望通过这项研究，探究 NK 细胞疗法对 AD 患者的安全性和初步疗效，为 AD 的治疗开辟新的道路。该研究成果为 AD 的治疗带来了新的曙光，具有重要的临床意义。虽然目前还不清楚该研究最终发表在哪个期刊，但这并不影响其研究成果的价值。

在研究过程中，研究人员运用了多种技术方法。他们从健康受试者或 AD 患者的外周血中获取外周血单个核细胞（PBMCs），并在符合良好生产规范（GMP）的条件下进行 NK 细胞的体外扩增培养，制备出了 SNK01。同时，通过多种实验对 NK 细胞的功能进行检测，如利用 Western blot 分析来研究细胞对蛋白聚集体的摄取和降解情况；采用流式细胞术评估细胞的表面标记、活性以及细胞间的相互作用等；在临床试验中，对受试者进行认知评估和脑脊液生物标志物检测等。

研究结果

1. SNK01 细胞内化和降解 Aβ 聚集体：研究人员将 SNK01 细胞与不同浓度的 Aβ 聚集体孵育，或在固定浓度下孵育不同时间，通过 Western blot 分析发现，SNK01 细胞能以浓度和时间依赖的方式内化 Aβ 聚集体，且在后续的降解实验中，细胞内的 Aβ 聚集体逐渐减少。免疫细胞化学实验进一步证实 Aβ 聚集体被内化到 NK 细胞的细胞质中，并与溶酶体相关膜蛋白 1（LAMP1）共定位，这表明 Aβ 聚集体的内化与溶酶体途径有关。此外，与人类小胶质细胞系 HMC3 相比，SNK01 细胞对 Aβ 聚集体的清除能力与之相当，且 Aβ 聚集体不会影响 SNK01 细胞的活力、杀伤活性和激活受体表达。
2. SNK01 内化和降解 α - 突触核蛋白（α - syn）聚集体：同样的方法，研究人员发现 SNK01 细胞能高效内化 α - syn 聚集体，且在 10μg/mL 的浓度下，内化量呈浓度依赖性增加。在降解实验中，细胞内的 α - syn 聚集体在 6 小时后就很少能检测到。与 HMC3 细胞相比，SNK01 细胞对 α - syn 聚集体的清除能力也与小胶质细胞相当，并且 α - syn 聚集体同样不影响 SNK01 细胞的各项特性。
3. SNK01 表达免疫调节细胞因子：通过酶联免疫吸附测定（ELISA）分析 SNK01 细胞培养上清液中白细胞介素 10（IL - 10）和转化生长因子 - β1（TGF - β1）的水平，发现 SNK01 细胞在未刺激和 K562 靶细胞刺激两种条件下，均能产生 IL - 10 和 TGF - β1，且刺激前后 IL - 10 水平无显著差异，TGF - β1 水平仅轻微增加，这说明 SNK01 细胞能持续产生这些免疫调节细胞因子。
4. SNK01 杀死活化 T 细胞但不杀死静止 T 细胞：研究人员先通过流式细胞术确认了 T 细胞的激活状态，然后将激活或未激活的 T 细胞与 SNK01 细胞共培养进行细胞毒性实验。结果显示，激活的 T 细胞对 SNK01 介导的细胞毒性更敏感，且 SNK01 细胞在与激活 T 细胞共培养时会发生脱颗粒和产生干扰素 - γ（IFN - γ），而与未激活的 T 细胞共培养时则不会，这表明 SNK01 细胞能够有效识别并清除激活的 T 细胞。
5. 临床研究：
   • 临床 SNK01 产品特性：在 NK 细胞体外扩增前，从 PBMC 中分离出的 CD56?细胞中，CD3?CD56?群体平均占比为（63.31±21.52%） ，经过 17 - 18 天的扩增培养后，最终的 SNK01 产品中 CD3?CD56? NK 细胞平均比例显著增加至（98.74±0.90%），同时 CD3? T 细胞、CD20? B 细胞和 CD14?单核细胞的比例很低。扩增后的 NK 细胞增殖倍数达到（1790±1080）倍 ，活力高，且对 K562 细胞具有很强的细胞毒性。
   • 患者特征：研究共筛选了 15 名受试者，最终 11 名受试者入组，分别接受 1×10?细胞、2×10?细胞和 4×10?细胞三个剂量组的治疗。受试者中 5 名患有轻度 AD，3 名患有中度 AD，3 名患有重度 AD。所有受试者都进行了 MRI 和 FDG - PET 评估以确诊 AD，且基线脑脊液和血浆生物标志物显示与经典 AD 患者的特征相符。
   • 安全性评估：研究旨在评估不同剂量 SNK01 在 AD 患者中的安全性和耐受性。在观察期内，各剂量组均未出现剂量限制性毒性（DLT）。大多数不良事件（AE）为 1 级，主要与血液和脑脊液采集相关，是短暂的，且与 SNK01 无关。只有一名受试者出现了 3 - 5 级 AE，但被认为与研究药物无关。
   • 疗效评估：通过 ADAS - Cog、CDR - SB、MMSE 和 ADCOMS 等认知评估量表对受试者进行评估。结果显示，在治疗后 1 周（第 11 周），50 - 70% 的受试者在 CDR - SB、ADAS - Cog 和 / 或 MMSE 评分上保持稳定或有所改善，90% 的受试者在 ADCOMS 评分上保持稳定或改善。在治疗后 12 周（第 22 周），仍有部分受试者的认知评分保持稳定或改善。
   • 生物标志物：对脑脊液中的生物标志物进行检测，发现 60 - 70% 的受试者在第 11 周和 / 或第 22 周时，α - syn 和 pTau181 水平下降，40 - 50% 的受试者 Aβ - 42、Aβ42/Aβ40 比值、总 Tau 和 pTau217 水平出现积极变化。同时，60% 的受试者在第 11 周和研究结束时（第 22 周），神经炎症标志物 GFAP 和 YKL - 40 水平下降。这些变化在各剂量组中均有出现，且部分变化似乎与剂量有关。

研究结论与讨论

这项研究表明，NK 细胞疗法在 AD 患者中耐受性良好，并且初步显示出对认知功能的稳定或改善作用，同时对脑脊液中的蛋白聚集体水平和神经炎症生物标志物也有积极影响。虽然该研究存在样本量小、治疗时间短和缺乏安慰剂对照等局限性，但它为 AD 的治疗提供了新的方向。NK 细胞通过分泌 IL - 10 和 TGF - β 等抗炎细胞因子，调节小胶质细胞的功能，抑制神经炎症；同时，NK 细胞还能内化和降解 Aβ 和 α - syn 等蛋白聚集体，减少神经毒性。未来，需要更大规模、更长时间、更高剂量且设置安慰剂对照的研究来进一步验证 NK 细胞疗法的疗效，为 AD 患者带来更多的希望。