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为探究肝片吸虫（Fasciola hepatica）新脱囊幼虫（FhNEJ）穿透宿主肠壁机制，研究人员开展 FhNEJ 与宿主纤溶系统相互作用的研究。结果发现 FhNEJ 可与前尿激酶（pro-u-PA）结合并激活它，增强纤溶酶生成。这为预防 FhNEJ 感染提供新策略。
在神秘的生物世界里，寄生虫与宿主之间的 “战争” 时刻都在上演。肝片吸虫（
Fasciola hepatica）作为一种能引发片形吸虫病的寄生虫，给全球畜牧业带来了沉重打击，每年造成的经济损失高达数十亿美元，同时它也是一种人畜共患疾病，严重威胁着人类的健康。片形吸虫病主要通过被污染的水生植物或水传播，当宿主误食含有肝片吸虫囊蚴的食物后，囊蚴在十二指肠孵化出 FhNEJ。这些 FhNEJ 如同 “小战士”，需要穿越肠道壁，历经重重困难到达肝脏，在那里定居并发育成熟，给宿主的肝脏带来诸多病变。
然而，FhNEJ 究竟是如何穿透宿主肠道壁的呢？这一直是困扰科学家们的难题。此前研究发现，FhNEJ 能够结合宿主的纤溶酶原（PLG），并在宿主来源的 PLG 激活剂作用下生成纤溶酶，进而降解肠道细胞外基质（ECM）的主要成分层粘连蛋白（LM），这似乎为 FhNEJ 的 “征途” 提供了帮助。但这背后是否还有其他不为人知的机制呢？
来自西班牙萨拉曼卡自然资源与农业生物学研究所（IRNAS-CSIC）和爱尔兰戈尔韦大学的研究人员决定深入探究这个神秘的过程。他们将目光聚焦在 u-PA 及其前体 pro-u-PA 上，因为 u-PA 是肠道中主要的 PLG 激活剂，研究 FhNEJ 与它们的相互作用，或许能揭开 FhNEJ 成功感染宿主的秘密。这项研究成果发表在《Veterinary Research》杂志上，为我们理解肝片吸虫的感染机制提供了新的视角。
研究人员在本次研究中，运用了多种关键技术方法。首先，通过体外刺激肝片吸虫囊蚴孵化获取 FhNEJ，并提取其外皮富含蛋白的组分（FhNEJ-Teg）。接着，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 FhNEJ-Teg 与 u-PA、pro-u-PA 的结合情况；利用二维电泳（2D）、配体印迹和液相色谱 - 串联质谱（LC-MS/MS）技术鉴定与 pro-u-PA 结合的蛋白；还通过 u-PA 特异性活性测定、纤溶酶活性测定等实验，探究 FhNEJ-Teg 对 pro-u-PA 的激活作用以及对纤溶酶生成的影响。
研究结果如下：
- FhNEJ-Teg 含有与 pro-u-PA 结合的蛋白：ELISA 实验表明，FhNEJ-Teg 能与 pro-u-PA 和 u-PA 结合，且与 pro-u-PA 的结合更为高效，这种结合呈浓度依赖性，并且不依赖赖氨酸残基。
- 鉴定 FhNEJ 外皮中与 pro-u-PA 结合的蛋白：通过 2D-MS/MS 分析，发现 FhNEJ-Teg 中有多个蛋白与 pro-u-PA 结合，如肌动蛋白、组织蛋白酶（cathepsins）B3、L1、L2、L3、谷胱甘肽 S - 转移酶（FhGST）等。这些蛋白不仅能与 pro-u-PA 结合，还能与 PLG、LM 结合，在寄生虫与宿主纤溶系统和 ECM 的相互作用中发挥重要作用。其中，一些蛋白如烯醇化酶（FhENO）和 FhGST，虽为细胞内酶，但可能具有 “兼职” 功能，从细胞内转移到寄生虫表面执行特殊任务。
- FhNEJ-Teg 含有激活 pro-u-PA 的蛋白：u-PA 特异性活性实验显示，FhNEJ-Teg 能增强 pro-u-PA 的活性，使其转化为有催化活性的 u-PA，且呈剂量依赖性。但研究发现，重组的肝片吸虫组织蛋白酶 L1、L2、L3 和 B2 并不能激活 pro-u-PA，推测可能存在一种尚未确定的丝氨酸蛋白酶参与这一过程。
- FhNEJ-Teg 激活 pro-u-PA 增强宿主 PLG 的纤溶酶生成：在 PLG 存在的情况下，FhNEJ-Teg 激活 pro-u-PA 产生的 u-PA 能够切割宿主 PLG，显著增加纤溶酶的生成，促进了寄生虫对宿主组织的侵袭。
综合研究结论和讨论部分，这项研究意义重大。它揭示了 FhNEJ 与宿主来源的 pro-u-PA 之间的相互作用，发现 FhNEJ-Teg 蛋白通过直接切割（可能由未知蛋白酶介导）增强 pro-u-PA 的激活，进而显著提高 FhNEJ 激活其表面纤溶系统的能力。这一发现与之前该实验室揭示的 FhNEJ 与宿主 PLG 相互作用促进纤溶酶生成、降解 LM 的研究结果相互补充，共同展示了 FhNEJ 表面多层次激活宿主纤溶系统的过程。这为针对早期片形吸虫病的免疫或治疗干预提供了新的潜在靶点，有望开发出更有效的防治策略，减少肝片吸虫感染对畜牧业和人类健康造成的危害。
